比较胰岛素样生长因子1受体抑制剂与胰岛素对2型糖尿病肾病小鼠肾间质巨噬细胞浸润的改善作用

目的比较胰岛素样生长因子1受体(insulin-like growth factor-1 receptor,IGF-1R)抑制剂与胰岛素对2型糖尿病肾病(DKD)小鼠肾间质巨噬细胞浸润的改善作用。方法选取24只雄性C57BL/6小鼠,适应性喂养1周后,随机抽取6只作为对照组;其余小鼠高脂高糖喂养8周后,腹腔注射链脲佐菌素(30mg/kg),72h后随机血糖大于16.7mmol/L,为2型糖尿病(DM)模型建立成功。DM小鼠8周后出现尿蛋白增加,即DKD造模成功。采用随机数余数法将DKD小鼠分为3组:DKD组、DKD+胰岛素组(胰岛素组,皮下注射1~2U/d胰岛素)和DKD+IGF-1R抑制剂组(IGF-1R抑制剂组,给予30mg·kg^-1·d^-1 IGF-1R抑制剂灌胃),每组6只,持续干预8周。血糖仪检测血糖;收集血液和尿液,生化仪检测血肌酐、尿素氮和尿蛋白等生化指标。收集肾脏组织,用苏木精-伊红染色(HE)和过碘酸希夫染色(PAS)检测肾脏病理变化,原位杂交检测细胞因子信号转导抑制因子2(suppressor of cytokine signaling2,SOCS2)和胰岛素样生长因子1(insulin-like growth factor-1,IGF-1)mRNA,免疫组化检测SOCS2、F4/80、Toll样受体4(TLR4)、CD68蛋白的表达。结果相对于对照组,DKD小鼠血糖、血肌酐、血清尿素氮和尿蛋白排泄率明显较高(均P<0.05),且DKD小鼠肾小管间质中CD68^+细胞、F4/80^+细胞以及TLR4表达均明显较多(均P<0.05)。经胰岛素或IGF-1R抑制剂干预后,DKD小鼠血肌酐、血清尿素氮和尿蛋白排泄率均明显减少(均P<0.05)。胰岛素干预可以明显降低小鼠血糖(P<0.05),但对巨噬细胞无明显影响。IGF-1R抑制剂虽没有明显降低血糖,但是可明显降低DKD小鼠肾间质中CD68、F4/80阳性细胞数及TLR4蛋白的表达(均P<0.05)。相对于DKD组,胰岛素干预明显减少IGF-1蛋白和mRNA表达(均P<0.01),增加SOCS2mRNA和蛋白表达(均P<0.01),且胰岛素组SOCS2蛋白表达与F4/80^+细胞数具有相关性(R^2=0.8461,P=0.005)。然而IGF-1R抑制剂组SOCS2表达无明显变化,但具有更好的抑制巨噬细胞浸润的效果。结论IGF-1R抑制剂抑制DKD小鼠肾间质巨噬细胞浸润效果较胰岛素好,可能与胰岛素使SOCS2表达上调激活了一些潜在通路,而IGF-1R抑制剂不使SOCS2表达上调相关。