滇龙胆GrWRKY5基因的克隆和植物表达载体构建

WRKY蛋白是目前被广泛研究的一类DNA特异结合转录因子,在植物次生代谢物生物合成、植物生长和发育及衰老等生理过程以及生物、非生物防御反应中起重要的调控作用。该研究从滇龙胆幼叶中克隆萜类合成的关键转录因子基因Gr WRKY5,并利用生物信息学方法对基因功能进行预测,构建植物过表达载体。结果表明:根据三年生滇龙胆转录组Gr WRKY5基因序列,设计特异性引物,通过RT-PCR扩增Gr WRKY5 ORF序列,并进行TA克隆、测序和序列分析;构建入门载体p ENTRTM2B-Gr WRKY5,经LR反应后构建植物过表达载体。Gr WRKY5 ORF全长591 bp,编码196个氨基酸,Gen Bank登录号为KF922375,其中第167与170之间的色氨酸(W)、精氨酸(R)、赖氨酸(K)、酪氨酸(Y)组成WRKY蛋白所特有的"WRKY"结构。序列分析表明Gr WRKY5是WRKY超家族的成员。经生物信息学在线软件分析发现,Gr WRKY5的等电点为6.29,脂肪族指数为61.37,不稳定指数为57.80。总平均疏水性为-0.708,为亲水蛋白;含有20种氨基酸,其中天冬氨酸(Asp)和脯氨酸(Pro)含量最高,为8.1%;半胱氨酸(Cys)含量最低,仅为1.0%。氨基酸序列系统发育分析表明,Gr WRKY5与拟南芥中WRKY家族中遗传距离最接近的是WRKY27,属于Ⅱe类成员;与Cr WRKY22和Vv WRKY22蛋白的亲缘关系较近;与Jc WRKY47和Tc WRKY27亲缘关系较远;BLASTp结果显示,Gr WRKY5与欧洲油菜Bn WRKY27-1的同源性最高(为69%);与拟南芥Aa WRKY22的一致性最低(仅为31%)。以Gateway入门载体p ENTR2B和目的载体p K2GW7为基础,成功构建了植物过表达载体p K2-35S-Gr WRKY5,该载体的成功构建为该基因在拟南芥、滇龙胆等植物中的遗传转化奠定了基础,同时为WRKY基因功能的深入研究提供依据。

白麻芋半夏高产繁殖农艺措施的数学模型分析

通过不同种植密度及有机肥、氮肥、磷肥施用量对半夏繁殖产量的影响进行研究,为制定半夏高产繁殖措施提供依据,从而扩大白麻芋种源,为半夏生产提供优质的种源保障。在田间采用4个因子5个水平二次回归旋转组合设计方法进行试验。结果表明,4个试验因子对半夏繁殖块茎产量影响的重要程度表现为种植密度>磷肥施用量=有机肥施用量>氮肥施用量;建立各因素与半夏块茎产量的数学模型,通过对模型解析和模拟寻优,获得半夏繁殖块茎产量为10 538.39 kg/hm^2的优化栽培方案为种植密度1 158.30万~1 330.86万粒/hm^2、有机肥施用量30.84~40.80 t/hm^2、施氮量80.63~114.89 kg/hm^2、施磷量327.51~419.04 kg/hm^2。

种块茎腐烂病菌对不同居群半夏的影响

目的筛选抗块茎腐烂病的不同居群半夏。:方法采用花盆种植半夏,接种块茎腐烂病病原菌,测定产量,发病率等性状。结果不同半夏种质资源接种块茎腐烂病原菌后产量、发病率、出苗情况均有差异。结论接种HZ7菌筛选出2个抗病资源,接种H1菌筛选出7个抗病资源,接种Z3菌筛选出7个抗病资源,结果将为半夏规范化生产提供理论依据。

不同种植密度对党参光合特性及产质量的影响

目的寻找适合贵州省威宁县商品党参的种植密度。方法以素花党参为供试品种,设置5个密度梯度(1.2万株/667m^2、2.5万株/667m^2、3.8万株/667m^2、5.1万株/667m^2、6.4万株/667m^2),研究对党参光合特性及产质量的影响。结果随着党参种植密度的增加,党参叶片的胞间CO_2浓度成增加趋势,气孔导度呈减小趋势,蒸腾速率呈减弱趋势,党参叶片光合速率呈降低趋势;党参种植密度为3.8万株/667m^2时,亩产值最高,为13394.05元,其块根品质均符合《中国药典》规定,醇溶性浸出物66.59%,总灰分3.41%,水分8.67%。结论研究对贵州省威宁县商品党参栽培技术具有重要意义。

不同丹参资源遗传差异分析及生物学性状比较与评价

目的为黔西北地区筛选优良丹参资源应用于生产。方法采用田间试验与室内分析相结合的方法,对9个不同来源的丹参种质生物学性状、遗传差异、产量性状及药效成分含量进行研究和比较评价。结果 9个丹参种质生物学性状除山东日照百花丹参花色百色,与其它种质紫花差别较大,辨识度高,容易辨识外,其它资源在株高、冠幅、茎、叶、花冠颜色,以及根部性状方面虽互有差异,但辨识低,不易辨识。但遗传分析证明,9个丹参种质遗传差异明显,遗传相似系数最大为0.8571,最小为0.5714,9个丹参种质中川丹参1号、安徽亳州引、河南濮阳、航天丹参产量表现和综合农艺性状较好,而丹参酮ⅡA含量检测显示,9个丹参种质的丹参酮ⅡA含量在0.15%~0.36%之间,除安徽亳州引(0.15%)和河北安国大红袍(0.18%)两个资源丹参酮ⅡA含量未达药典标准外,其余品种均达到药典规定的0.2%的标准。结论结合产量、综合农艺性状及丹参酮ⅡA含量综合考虑,川丹参1号、航天丹参及河南濮阳三个资源最适宜在黔西北地区推广种植。

不同繁殖材料扦插对金荞麦繁殖系数影响

目的研究金荞麦不同部位和节数扦插,对金荞麦产量、植株农艺性状的影响。方法不同部位扦插设3个处理,采用植株的上部、中部、下部三部分分别作为扦插材料,不同扦插节数也设3个处理,扦插1节入土、扦插2节入土、扦插3节入土,考察各处理的金荞麦产量、植株性状。结果不同部位扦插试验,采用植株下部为扦插繁殖材料处理产量最高,为23066.7kg/hm2,相对应的单个块茎鲜重也最高,为86.4g/个,芽孢数也最多为4.1个,但与植株中部为扦插繁殖材料处理产量差异不显著;不同扦插节数试验,采用扦插3节入土处理产量最高,为23377.8kg/hm2,相对应的单个块茎鲜重也最高,为92.4g/个,芽孢数也最多为3.3个,但与扦插2节入土处理产量差异不显著。结论在金荞麦扦插繁殖中,扦插繁殖材料采用植株中下部,并且有2~3节入土,才能获得更高的产量,为生产提供更多的繁殖材料。

林下种植冬荪的丰产栽培技术

冬荪为鬼笔属真菌,含糖醛酸聚糖、甾醇、多糖、麦甾醇、苯乙酸、二氢查耳酮、异山梨醇等多种活性成分,具有除湿、活血祛痛等作用,是著名的药食两用真菌。本文介绍了冬荪的林下丰产栽培技术以及现有栽培技术存在的问题,以期为冬荪的深入研究及开发利用提供参考。