贵州地方梨品种资源遗传多样性ISSR分析

【目的】探讨贵州地方梨品种资源的亲缘关系和遗传多样性,为品种资源的开发利用、品种鉴定提供理论依据。【方法】采用ISSR标记研究48份梨品种的遗传多样性。【结果】12对ISSR引物在48个梨品种中扩增出126个位点,其中多态性位点114条,多态性比率(PPB)为90.48%;所检测品种群体具有中等程度的遗传多样性,有效等位基因数Ne为1.487 4,Nei’s的遗传多样性指数(He)为0.285 2,Shannon信息指数(I)为0.430 7。采用NTsys 2.10e软件计算种质间Jaccard遗传相似系数,48个梨品种的遗传相似性分析表明,各基因型间的Jaccard相似系数为0.484~0.952。通过非加权算术平均数聚类法(UPGMA),绘制了48个梨品种遗传关系树状图。以0.67为阈值,将48份材料分为3大类群。【结论】供试48个梨品种遗传多样性丰富,大部分的砂梨品种聚在一起,白梨品种聚在一起。研究中发现,白梨和砂梨系统品种间存在广泛的种间杂交现象,种质之间渗入程度较大,但个别品种间的聚类结果与实际情况有所出入。

荷花品种不同部位DNA提取的比较研究

采用改良的3×CTAB法提取荷花品种笛女、国庆红、红苔莲的叶片、叶柄和花不同部位的DNA,并对提取的DNA进行琼脂糖凝胶电泳检测、纯度检测和ISSR分析。结果表明,除叶柄中提取的DNA效果不理想外,其余从叶片、花中提取的DNA纯度高、得率高,OD260/280比值在1.80左右,OD260/230比值在2.01左右。以红苔莲的花为试材,对改良的3×CTAB法提取基因组DNA的参数进行正交试验,选出提取DNA的最优组合。通过荷花基因组DNA的ISSR分析,完全满足实验要求。

梨ISSR-PCR反应体系的正交优化研究

以‘饼子梨’为试材,利用正交设计L16(45)研究了反应体系中引物、模板DNA浓度等5个因素4个水平对梨反应体系的影响,PCR结果应用极差分析和MINITAB软件对扩增结果进行方差分析.梨最佳ISSR-PCR反应体系:25μL反应体系中含2.5μL 10×Buffer,2.0mmol/L Mg2+,0.25mmol/L dNTPs,0.25μmol/L引物,60ng模板DNA,0.75UTaq DNA聚合酶.优化的ISSR-PCR反应体系稳定性高和重复性较好,为梨品种指纹图谱构建和遗传多样性分析奠定基础.

遗传学实验教学的改革与探索

遗传学实验是一门集遗传学思想、遗传学理论和实验技术于一体的课程。提高学生动手能力、创新设计能力和培养学生的科研思维是实验教学体系改进的重要方面。探索遗传学实验的基础性实验内容、验证性实验内容,并建立开放式实验模式、增加学生自主设计综合性实验,为进一步深化遗传学实验教学改革提供参考。

两种朱顶红杂交育种及后代花型分析

为了进一步提高朱顶红观赏价值,并为其花型优异性状的选育研究提供理论参考,实验选用花朱顶红和朱顶红品种蕊罗娜为亲本,进行人工杂交授粉。研究结果表明:两亲本具有较高亲和性,平均结实率达到92.2%,种子播种10天后开始萌发,萌发率达到91.1%;幼苗生长中,施用400×的花多多(15:15:15)可使小苗鳞茎生长最快,生长20个月后可开花,F1代种球只抽出一支花箭的比例高达61.1%,花葶高度为21.2~68.9cm,分离广泛,高度处于正常值占比48%,粗度在正常值范围内占比72%;每个种球盛开3~11朵花不等,花期长达1个多月,椭圆形花瓣占比52.8%,圆形花瓣47.2%;后代发生性状分离花色不一,其中红色条纹清晰或模糊、暗红色条纹清晰的花具有高观赏性。从花葶高度和粗度、每个种球花朵盛开数量、花期时长、花朵颜色和花瓣形状分析,杂交F1代综合两亲本的花朵特性,遗传了父本蕊罗娜白色花色和钝圆花瓣,具有植物生长健壮和观赏性高的特性。

基于SRAP标记的三十三份白及种质资源聚类分析及DNA指纹图谱的构建

以白及(BletillastriataRchb.f.)为试材,基于UPGMA法通过13对SRAP引物组合对6个野生居群的33份白及种质资源进行聚类分析并构建DNA指纹图谱,以期为白及品种鉴定和资源收集提供参考依据。结果表明:13对SRAP引物组合共扩增出182条条带(其中有152条为多态性条带),多态性比率为83.52%,平均Shannon’s信息指数(I)和Nei’s基因多样性指数(H)分别为0.4846和0.3243。6个野生居群根据UPGMA聚类,可分为2个支系。我国华南地区广东茂名、广西百色和华中地区湖南张家界3个白及居群聚为一支;西南地区贵州安龙、云南蒙自和四川峨眉山另外3个白及居群聚为另一支。Manteltest检测表明,物种遗传距离和地理距离间存在显著正相关性(r=0.6246;P<0.001)。4对SRAP核心引物组合构建了33份白及品种的DNA指纹图谱。

梨品种ISSR-PCR反应体系的优化与应用

以海子梨（Haizili）品种的DNA为材料，对影响ISSR—PCR扩增的重要因子进行单因素的优化设计，建立了最佳体系：25μL反应体系中含2．5μL 10×buffer、0．75U Taq DNA聚合酶、0．2mmol／L dNTPs、2．5mmol／L MgCl2、0．25μmol／L引物、10-60ng模板DNA。将最佳体系应用于黔西南的22个梨品种，证实了该体系的重复性好，很稳定。

正交设计优化荷花品种ISSR-PCR反应体系

以东方明珠荷花为试验材料,应用L9(34)正交设计,探讨反应体系中引物、Taq DNA聚合酶等4个不同因素的3个水平对荷花品种反应体系的影响,正交设计所用引物为UBC843,PCR结果应用MINITAB软件进行方差分析和极差分析。结果表明,荷花最佳ISSR-PCR反应体系(25μL):2.5μL 10×buffer,2.0 mmol/L Mg2+,0.20 mmol/L d NTPs,0.40μmol/L引物,20~80 ng模板DNA,1.00 U Taq DNA聚合酶。优化的ISSR-PCR反应体系稳定性高、重复性较好,为从分子水平对荷花品种进行各项研究奠定了基础。

应用ISSR分子标记绘制黔西南州梨品种DNA的指纹图谱

以黔西南州24个梨品种为材料,从ISSR随机引物中挑选出12条重复性好且条带清晰的引物,再从12条ISSR引物中遴选出3条核心引物UBC 825(AC)_(8)T、UBC 834(AG)_(8)YT、UBC 816(GA)_(8)T,绘制黔西南州24个梨品种的DNA指纹图谱,为梨分子身份证的构建奠定了基础。

荷花品种ISSR-PCR反应体系的优化

以荷花品种红苔莲的DNA为材料,引物UBC 811为单因素的固定引物,对影响ISSR-PCR扩增的重要因子进行单因素的优化设计,建立荷花品种ISSR-PCR最佳反应体系:25μL反应体系中含2.50μL 10×buffer、0.75U Taq DNA聚合酶、0.20mmol/L dNTPs、2.50mmol/L MgCl_2、0.25μmol/L引物、10~60ng/μL模板DNA。将最佳体系应用于21个荷花品种,重复性强,稳定性高。

白及不同地理群体的分子遗传学评价

以采自6个不同地理区域33份白及资源为试材,利用SRAP标记技术对白及资源进行分子遗传学评价研究,以期为白及品种资源的综合利用、野生资源的就地保护和迁地保护提供参考依据。结果表明:白及资源在物种水平遗传多样性比较丰富,白及居群的遗传多样性指数分别为Ht=0.3267,Hs=0.2356,Gst=0.2506,Nm=1.4952,说明白及居群间存在少量的基因交流,而且遗传变异主要发生在居群内。6个野生居群根据UPGMA聚类,可分为2个支系。居群结构分析结果表明,K=2时,样品分类效果最佳。Mantel test检测表明,白及居群间遗传距离越大居群之间地理距离就越远,呈显著正相关性(r=0.6246;P<0.001)。