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TGFβ1/Smad3信号通路介导的赖氨酸羟化酶2活性变化在肺纤维化胶原沉积中的作用
被引量:
13
1
作者
邵松军
方海燕
+5 位作者
叶贤伟
饶姗姗
张帮艳
袁国航
刘维佳
张湘燕
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第10期1858-1863,共6页
目的:探讨TGFβ1/Smad3信号通路对赖氨酸羟化酶2(lysyl hydroxylase 2,LH2)活性变化的影响,以及这一变化在肺纤维化胶原沉积中的作用及机制。方法:用含10%胎牛血清的F12培养基培养人肺成纤维细胞株HFL1。实验分为对照组、TGFβ1(10μg/L...
目的:探讨TGFβ1/Smad3信号通路对赖氨酸羟化酶2(lysyl hydroxylase 2,LH2)活性变化的影响,以及这一变化在肺纤维化胶原沉积中的作用及机制。方法:用含10%胎牛血清的F12培养基培养人肺成纤维细胞株HFL1。实验分为对照组、TGFβ1(10μg/L)刺激组和米诺地尔(5μmol/L)干预组,对照组加等量培养基;48 h后收集各组RNA及蛋白,采用RT-qPCR检测PLOD2、α-SMA及COLⅠ的mRNA表达水平,Western blot检测LH2、总Smad3、磷酸化Smad3、α-SMA、COLⅠ和COLⅣ的蛋白水平变化,ELISA检测细胞中羟基赖氨酰吡啶酚(hydroxylysylpyridinoline,HP)的含量变化。结果:TGFβ1刺激后,PLOD2、α-SMA及COLⅠ的mRNA表达上调(P<0.01);其对应的蛋白水平如LH2、磷酸化Smad3、α-SMA、COLⅠ和COLⅣ蛋白水平增高,而总Smad3的蛋白水平没有变化。米诺地尔干预后上述基因的mRNA及蛋白表达减少(P<0.01)。TGFβ1刺激后ELISA检测到HP含量较对照组增加,米诺地尔干预后合成减少(P<0.05)。结论:TGFβ1/Samd3信号通路激活,使LH2表达增多;而米诺地尔通过抑制TGFβ1/Samd3信号转导,减少LH2的表达,减少羟基化胶原吡啶链的合成,从而减轻肺纤维化病变。
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关键词
肺纤维化
赖氨酸羟化酶2
胶原沉积
TGFβ1/Smad3信号通路
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职称材料
腺苷2a受体抑制剂抑制人非小细胞肺癌细胞系A549增殖和迁移
2
作者
邵松军
段玲弟
+3 位作者
方海燕
袁国航
郭兵
张湘燕
《基础医学与临床》
CSCD
2019年第1期37-41,共5页
目的探讨腺苷2a受体抑制剂(A2aRi)对人非小细胞肺癌细胞系A549增殖、迁移和凋亡的影响及其机制。方法将细胞分为对照组及干预组,干预组予不同浓度的A2aRi处理;用MTT法检测细胞增殖;划痕实验检测细胞迁移; 24 h后,免疫荧光观察A2aR和casp...
目的探讨腺苷2a受体抑制剂(A2aRi)对人非小细胞肺癌细胞系A549增殖、迁移和凋亡的影响及其机制。方法将细胞分为对照组及干预组,干预组予不同浓度的A2aRi处理;用MTT法检测细胞增殖;划痕实验检测细胞迁移; 24 h后,免疫荧光观察A2aR和caspase3在细胞中表达定位;用Western blot和RT-qPCR检测A2aR、caspase3蛋白和A2aR m RNA的表达。结果 A2aRi能抑制A549细胞的增殖(P<0. 01),其迁移能力减弱,A2aR红色荧光强度较对照组减弱,caspase3绿色荧光强度较对照组增强,两者均在胞质中表达。Caspase3蛋白表达增加(P<0. 01),A2aR蛋白表达减少(P<0. 01); A2aR m RNA表达下调(P<0. 05)。结论 A2aR在人非小细胞肺癌细胞系A549中高表达,A2aRi能抑制A549细胞增殖和减弱其迁移能力。
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关键词
非小细胞肺癌
腺苷
腺苷受体
CASPASE3
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职称材料
题名
TGFβ1/Smad3信号通路介导的赖氨酸羟化酶2活性变化在肺纤维化胶原沉积中的作用
被引量:
13
1
作者
邵松军
方海燕
叶贤伟
饶姗姗
张帮艳
袁国航
刘维佳
张湘燕
机构
贵州省
人民医院
呼吸与危重症医学
科
贵州省第二人民医院老年精神病科
出处
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019年第10期1858-1863,共6页
基金
国家自然科学基金资助项目(No.81460014)
贵阳市科技计划项目(黔科合同[20161001]09号)
贵州省卫计委科学基金资助项目(No.gzwjkj2017-1-019)
文摘
目的:探讨TGFβ1/Smad3信号通路对赖氨酸羟化酶2(lysyl hydroxylase 2,LH2)活性变化的影响,以及这一变化在肺纤维化胶原沉积中的作用及机制。方法:用含10%胎牛血清的F12培养基培养人肺成纤维细胞株HFL1。实验分为对照组、TGFβ1(10μg/L)刺激组和米诺地尔(5μmol/L)干预组,对照组加等量培养基;48 h后收集各组RNA及蛋白,采用RT-qPCR检测PLOD2、α-SMA及COLⅠ的mRNA表达水平,Western blot检测LH2、总Smad3、磷酸化Smad3、α-SMA、COLⅠ和COLⅣ的蛋白水平变化,ELISA检测细胞中羟基赖氨酰吡啶酚(hydroxylysylpyridinoline,HP)的含量变化。结果:TGFβ1刺激后,PLOD2、α-SMA及COLⅠ的mRNA表达上调(P<0.01);其对应的蛋白水平如LH2、磷酸化Smad3、α-SMA、COLⅠ和COLⅣ蛋白水平增高,而总Smad3的蛋白水平没有变化。米诺地尔干预后上述基因的mRNA及蛋白表达减少(P<0.01)。TGFβ1刺激后ELISA检测到HP含量较对照组增加,米诺地尔干预后合成减少(P<0.05)。结论:TGFβ1/Samd3信号通路激活,使LH2表达增多;而米诺地尔通过抑制TGFβ1/Samd3信号转导,减少LH2的表达,减少羟基化胶原吡啶链的合成,从而减轻肺纤维化病变。
关键词
肺纤维化
赖氨酸羟化酶2
胶原沉积
TGFβ1/Smad3信号通路
Keywords
Pulmonary fibrosis
Lysyl hydroxylase 2
Collagen deposition
TGFβ1/Samd3 signaling pathway
分类号
R563.19 [医药卫生—呼吸系统]
R363.2 [医药卫生—病理学]
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职称材料
题名
腺苷2a受体抑制剂抑制人非小细胞肺癌细胞系A549增殖和迁移
2
作者
邵松军
段玲弟
方海燕
袁国航
郭兵
张湘燕
机构
贵州省
人民医院
呼吸与危重症医学
科
贵州
医
科
大学病理生理教研室
贵州省第二人民医院老年精神病科
出处
《基础医学与临床》
CSCD
2019年第1期37-41,共5页
基金
贵州省科技合作计划项目(LH[2015]7126)
贵州省卫生计生委科学技术基金(gxwjkj2017-1-109)
文摘
目的探讨腺苷2a受体抑制剂(A2aRi)对人非小细胞肺癌细胞系A549增殖、迁移和凋亡的影响及其机制。方法将细胞分为对照组及干预组,干预组予不同浓度的A2aRi处理;用MTT法检测细胞增殖;划痕实验检测细胞迁移; 24 h后,免疫荧光观察A2aR和caspase3在细胞中表达定位;用Western blot和RT-qPCR检测A2aR、caspase3蛋白和A2aR m RNA的表达。结果 A2aRi能抑制A549细胞的增殖(P<0. 01),其迁移能力减弱,A2aR红色荧光强度较对照组减弱,caspase3绿色荧光强度较对照组增强,两者均在胞质中表达。Caspase3蛋白表达增加(P<0. 01),A2aR蛋白表达减少(P<0. 01); A2aR m RNA表达下调(P<0. 05)。结论 A2aR在人非小细胞肺癌细胞系A549中高表达,A2aRi能抑制A549细胞增殖和减弱其迁移能力。
关键词
非小细胞肺癌
腺苷
腺苷受体
CASPASE3
Keywords
non-small cell lung cancer
adenosine
adenosine receptor
caspase3
分类号
R563.9 [医药卫生—呼吸系统]
下载PDF
职称材料
题名
作者
出处
发文年
被引量
操作
1
TGFβ1/Smad3信号通路介导的赖氨酸羟化酶2活性变化在肺纤维化胶原沉积中的作用
邵松军
方海燕
叶贤伟
饶姗姗
张帮艳
袁国航
刘维佳
张湘燕
《中国病理生理杂志》
CAS
CSCD
北大核心
2019
13
下载PDF
职称材料
2
腺苷2a受体抑制剂抑制人非小细胞肺癌细胞系A549增殖和迁移
邵松军
段玲弟
方海燕
袁国航
郭兵
张湘燕
《基础医学与临床》
CSCD
2019
0
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职称材料
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