基于SRAP分子标记的贵州5种忍冬属药用植物遗传多样性分析

【目的】分析贵州5种忍冬属药用植物的遗传多样性,为忍冬属药用植物鉴定、良种筛选及开发利用提供理论依据。【方法】采集贵州6份忍冬属药用植物材料的嫩芽为试验材料,采用SRAP分子标记研究其遗传多样性,并利用NTSYS-pc2.1计算各材料间的遗传相似系数,利用UPGMA进行聚类分析。【结果】从154对SRAP引物组合中筛选出15对重复性好、条带清晰、多态性丰富,且扩增条带(100～1000 bp)数目≥5的引物组合。15对SRAP引物共扩增出197条带,其中178条为多态性条带,多态性条带比率为90.36%,平均每对引物扩增11.87条多态性条带。引物组合Me8-Em10扩增的多态性条带数最多(16条);引物组合Me2-Em2扩增的多态性条带最少(8条);引物组合Me4-Em2扩增条带数为15条,均为多态性条带,但从5种忍冬属药用植物的扩增条带数不同。聚类分析结果显示,6份忍冬属药用植物材料间遗传相似系数为0.4213～0.8477,平均0.5672;其中,野生忍冬与栽培忍冬间遗传相似系数最大(0.8477),二者亲缘关系最近,灰毡毛忍冬与野生忍冬遗传相似系数最小(0.4213),二者亲缘关系最远。在遗传相似系数0.4873处,6份忍冬属药用植物分为两大类,第Ⅰ类包括灰毡毛忍冬、红腺忍冬和黄褐毛忍冬,均为山银花的基源植物;第Ⅱ类包括野生忍冬、栽培忍冬和红白忍冬,均为金银花的基源植物。【结论】贵州5种忍冬属药用植物具有丰富的遗传多样性,SRAP分子标记能有效分析其遗传多样性及亲缘关系,其引物组合Me4-Em2可用于鉴别5种忍冬属药用植物。

贵州省2011—2013年白术病虫害种类调查及防治措施

为了有效控制白术病虫害,2011年~2013年对贵州省内种植区白术病虫害进行调查、鉴定。结果表明,贵州白术常见病虫害有15种,其中病害9种,虫害6种。观察了主要病虫害的为害症状,并对主要病虫害的发生为害规律及其综合防治技术进行了探讨。

白星花金龟对9种植物的趋避行为

为明确对白星花金龟具有引诱或驱避作用的植物及醇提物,利用自制选择行为装置和“Y”形嗅觉仪,测定白星花金龟对9种气味植物鲜叶及醇提物的行为反应。结果表明:白星花金龟雌、雄成虫对植物及醇提物的嗅觉反应相似,对紫茎泽兰、青蒿、菖蒲醇提物有极显著负趋性(P<0.01);雌成虫对香樟、苍耳醇提物具有显著负趋性(P<0.05),对蛇床和蓖麻醇提物有极显著正趋性(P<0.01);幼虫对臭牡丹、苍耳、蓖麻醇提物表现为正趋性;各龄幼虫对紫茎泽兰、菖蒲醇提物均表现出负趋性,且随着龄期的增加负趋性逐渐增大。研究结果可为白星花金龟的引诱剂或驱避剂研发提供试验依据。

贵州艾纳香种苗繁育技术探讨

通过多年生产实践,总结了贵州艾纳香主产区罗甸、兴义一带艾纳香的种苗繁育技术,旨在通过对艾纳香种苗繁育技术进行总结,为贵州艾纳香的大面积推广种植提供技术支持,也为后期的推广种植奠定基础。

研究生自主管理实验室模式实践与探讨

以贵州大学贵州省药用植物繁育与种植重点实验室研究生自主管理实验室的实践为例,简述研究生自主管理实验室的发展历程,总结其在自主管理实验室过程中发挥的特色作用,探讨其自主管理实验室的可行性,以期为研究生自主管理实验室模式和培养研究生综合能力提供参考。

中草药复方对贵州隐性白羽鸡产蛋性能、蛋品质、血清和肝脏生化指标的影响

为研究饲粮中添加不同比例中草药复方对贵州隐性白羽鸡产蛋性能、蛋品质、内脏器官发育指标、血清生化指标的影响,选取420日龄、体重(1.04±0.15)kg的贵州隐性白羽鸡(蛋鸡)80只,随机分为4组,每组5个重复,每个重复4只鸡。对照组饲喂基础饲粮,试验组在基础饲粮中分别添加5%、10%、20%复方中草药添加剂。试验期31 d。结果表明:(1)饲粮中添加中草药复方对贵州隐性白羽鸡的产蛋率、平均日产蛋重、料蛋比有显著影响(P<0.05)。其中,与对照组相比,5%组、20%组产蛋率分别降低15.71%、28.57%(P<0.05),10%组也低于对照组,但无显著差异(P>0.05);5%组、20%组平均日产蛋重较对照组降低12.95%、28.58%(P<0.05),10%组低于对照组,但无显著差异(P>0.05);5%组、20%组的料蛋比均显著高于对照组,分别提高15.24%、40.33%(P<0.05)。(2)饲粮中添加中草药复方对贵州隐性白羽鸡喂药前1 d的鸡蛋重量、喂药第20天的蛋黄颜色和蛋壳厚度、喂药第25天的蛋壳强度有影响(P<0.05)。其中,喂药前1 d,5%组和10%组的鸡蛋重量显著高于对照组(P<0.05),分别提高9.60%、8.09%;喂药第20天,5%组、10%组、20%组的蛋黄颜色较对照组分别降低7.22%、8.00%、7.14%,5%组、10%组、20%组的蛋壳厚度较对照组分别降低7.32%、12.20%、7.32%(P<0.05);喂药第25天,10%组、20%组的蛋壳强度较对照组提高20.63%、31.36%(P<0.05),5%组蛋壳强度较对照组降低5.67%(P>0.05)。(3)饲粮中添加中草药复方对贵州隐性白羽鸡的肠脏指数、生殖器指数有显著影响(P<0.05)。其中,5%组的肠脏指数较对照组提高7.56%,10%组、20%组较对照组降低11.13%、4.89%,差异均不显著(P>0.05);20%组生殖器指数较对照组降低42.38%(P<0.05),5%组和10%组与对照组无显著差异(P>0.05)。(4)饲粮中添加中草药复方对贵州隐性白羽鸡的肌酸激酶、谷草转氨酶、甘油三酯、尿素氮、葡萄糖、总胆固醇、总胆红素、总蛋白无显著影响(P>0.05),对碱性磷酸酶、谷丙转氨酶、肌酐有显著影响(P<0.05)。其中,5%组、10%组的碱性磷酸酶较对照组提高119.98%、105.19%(P<0.05);10%组的谷丙转氨酶达到最大,为199.86 U/L,较对照组显著提高400.27%(P<0.05);肌酐含量最大的是10%组,为460.12μmol/L,显著高于对照组245.18%(P<0.05)。(5)隶属函数分析得出,饲粮中添加中草药复方的贵州隐性白羽鸡各组综合排名为:10%组>对照组>20%组>5%组。综上可知,饲粮中添加中草药复方可一定程度提高地方鸡产蛋性能、蛋品质以及血清和肝脏生化指标,其中贵州隐性白羽鸡以10%的中草药复方添加剂量效果最好。

贵州山地箭叶淫羊藿规范化种植技术规程(SOP)

为进一步推进中药材箭叶淫羊藿在贵州山地的规范化种植,从选地与整地、起苗移栽、田间管理、采收与产地初加工等方面制定了箭叶淫羊藿规范化种植技术规程(SOP)。

贵州山地箭叶淫羊藿种苗规范化无性繁育技术

为箭叶淫羊藿在贵州山地规范种植提供技术支持,从留种株选择及管护、选地与整地、根茎采收与处理、播种、田间管理、起苗等方面介绍了箭叶淫羊藿种苗规范化无性繁育技术。

氮磷钾肥配施对薏苡不同部位籽粒灌浆结实特性的影响

探明氮、磷、钾肥不同配比对薏苡不同部位籽粒灌浆结实特性的影响,可为薏苡高效施肥技术模式提供理论和技术支持。以‘贵薏1号’为材料,采用“3414”设计,应用Richards方程对不同氮磷钾肥配施下薏苡5个部位(上、中、下1、下2和下3部位)籽粒灌浆过程的影响进行了研究。结果表明:1)与不施肥处理相比,施用氮磷钾肥可延长薏苡上、中、下1、下2和下3部位籽粒灌浆速率达最大时需要的天数和籽粒活跃灌浆期,提高灌浆速率达最大值时的粒重、平均灌浆速率和最大灌浆速率,进而提高薏苡结实特性。2)氮磷钾肥配施显著提高薏苡中部和下1部粒重,在单因素肥效间表现为N>K>P,在双因素肥效互作间表现为PK>NP>NK,但过量施用氮磷钾肥会使粒重有所下降,结实特性显著变差。3)相关性分析表明,上、中、下1、下2和下3部位籽粒的千粒重与籽粒结实率、充实度、平均灌浆速率和最大灌浆速率呈正相关。4)拟合肥料与薏苡千粒重效应函数方程,得出薏苡N、P_(2)O_(5)、K_(2)O的最优推荐施肥范围分别为135.51~270.99 kg·hm^(-2)、75.00~150.50 kg·hm^(-2)、56.25~112.51 kg·hm^(-2)。氮磷钾肥配施显著影响薏苡不同部位籽粒灌浆结实特性,适当比例的氮磷钾肥配合施用既可以显著促进籽粒灌浆、缩小部位间差异,又可以提高结实率和粒重。在薏苡生产中,氮肥对薏苡籽粒灌浆结实特性影响最大,钾肥次之,磷肥影响最小。

植物土传病害生防细菌的筛选、鉴定及特性研究

为了防治植物土传病害,通过对峙培养法,从中药材根腐病重病田块的健康植株根际土样以及烟田土样中分离筛选拮抗菌株。共分离到10株细菌,它们对植物土传病菌具有一定的拮抗作用。其中,以DY-7菌株液体培养产生的抗菌物质对多种病原菌有较强的抑制作用,对何首乌根腐病菌的抑制率达96.14%,该抗菌物质具有较强的热稳定性、光稳定性和酸稳定性。通过对DY-7菌株培养物形态特征的观察和一系列的生理生化试验,初步鉴定该菌株为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。

15份淫羊藿属种质资源评价

为筛选优良淫羊藿种质,保证其药材质量稳定,测定了15份淫羊藿种质的农艺性状、矿质元素含量、产量、质量等,并对15份种质进行综合评价。结果表明,来自贵州省从江县的箭叶淫羊藿种质植株的株高、分枝数、叶片数、叶面积、叶宽、叶长、芽头数及须根、根茎、叶片产量表现较好,分别为27.40 cm、28.44枝、67.33片、1 127.09 cm2/株、6.23 cm、9.64 cm、12.78个、3.74 g/株、43.49 g/株、13.39 g/株,其N、P、K含量分别为17.51 g/kg、1.57 g/kg、9.40 g/kg,总黄酮和总黄酮醇苷含量最高,分别为12.68%、10.79%。结合农艺性状、矿质元素含量、药材质量三者的主成分分析、隶属函数分析和药材产质量综合评价发现,来自贵州省从江县的箭叶淫羊藿得分最高,在株高、叶面积、叶宽、叶长、芽头数、须根干重、根茎干重、茎干重、叶片干重、总黄酮、总黄酮醇苷方面具有明显优势。

贵州天门冬种质资源遗传多样性的ISSR分析

为了给合理地保护、利用与开发天门冬种质资源提供科学依据,采用ISSR分子标记技术对分布于贵州省不同生态环境的24份天门冬材料进行了遗传多样性分析。结果表明,8个引物共扩增出多态性带158条,多态性位点百分率为98%;材料间遗传相似系数在0.670 8～0.993 8,平均值为0.765 7。ISSR技术适合分析天门冬的遗传多样性,贵州天门冬具有较丰富的遗传多样性,可分为4个大类,野生种基本符合地域性分布规律。

氮磷钾用量和配比对“黔藿1号”种子产量及质量的影响

探讨配方施肥对“黔藿1号”种子产量和质量的影响,筛选适宜种子生产的最佳肥料配比,为“黔藿1号”种子生产的合理施肥提供参考依据。以“黔藿1号”两年生植株为试验材料,采用“3414”施肥试验设计,设置氮、磷、钾3因素,每个因素4水平,测定不同施肥处理对“黔藿1号”种子产量和质量的影响。结果表明:(1)N_(2)P_(2)K_(1)处理种子产量最高,N_(3)P_(2)K_(2)处理千粒重最高,N_(2)P_(2)K_(1)处理种子活力最高,N_(2)P_(2)K_(3)处理可溶性糖含量最高,N_(2)P_(1)K_(2)处理淀粉含量最高,N_(2)P_(3)K_(2)处理蛋白质含量最高,N_(1)P_(2)K_(1)处理含水量最高,较对照分别增加了86.81%、19.65%、12.87%、213.87%、29.93%、210.71%、20%,均差异显著。(2)结合隶属函数综合分析和肥料效应函数拟合得出,在处理N_(2)P_(2)K_(1)下,即氮磷钾施肥量分别为180 kg·hm^(-2)、270 kg·hm^(-2)和225 kg·hm^(-2),氮磷钾肥料配比为1∶1.5∶1.25时,“黔藿1号”种子可获得最高产量和最优质量。综上得出:在贵州省从江县生产区域“黔藿1号”种子最优氮磷钾肥施用量为180 kg·hm^(-2)、270 kg·hm^(-2)、225 kg·hm^(-2),氮磷钾肥料配比为1∶1.5∶1.25。

贵州野生百尾参生长土壤的养分特性

为了探明贵州野生百尾参生长的土壤养分特性,以贵州省9个地区的35份野生百尾参生长土样为材料,采用实验室方法对其pH、有机质、全氮、碱解氮、速效钾和速效磷等养分特征进行分析.结果表明：1）贵州百尾参生长土壤的pH为4.50～6.71,有机质含量为0.05～5.85 g/kg,全氮含量为5.96～77.49 g/kg,碱解氮含量为44.65～744.68 mg/kg,速效钾含量为44.45～611.80 mg/kg,速效磷含量为5.84～17.70mg/kg,有效微量元素铁含量为32.17～157.89 mg/kg,锰为2.34～260.46 mg/kg,铜为0.42～5.31 mg/kg,锌为1.23～17.37 mg/kg,钙为235.05～14 182.84 mg/kg,镁64.36～803.39 mg/kg.2）贵州野生百尾参生长土壤养分指标间存在一定的相关性,且以有机质和碱解氮的相关系数最大；有机质、全氮、碱解氮、速效钾及有效微量元素钙、镁、锰、锌是百尾参生长土壤养分的主要特征指标；各区域百尾参生长土壤的养分特征具有一定的相似性,但同一区域的土壤养分特性又存在一定的差异；百尾参对土壤养分的适应性较强,但对有机质含量的要求较高.因此,在种植百尾参时,可根据土壤实际情况施入适量有机肥和微肥作底肥.

贵州续断资源分布状况调查

为摸清贵州省续断资源分布状况,我们历时4年对该省续断资源进行了调查,并对调查结果进行了总结分析。结果表明:全省各地均有续断资源分布,但尤以西部、西南部、北部、东北部海拔1000 m以上的区域最为丰富,约占全省分布区蕴藏量(4500 t)的80%;生长地点主要是山坡、田边、林缘、路旁草灌丛等;生长地土壤多为黄壤。根据资源分布范围和药材质量,贵州西部和西北部、海拔在1000～1700 m的地区为续断最适宜种植区,而海拔在600～1000 m的地方为适宜区,也可适当发展。

贵州不同产地天门冬的品质比较

为了解不同产地天门冬品质的差异,根据中华人民共和国药典要求的测定方法等分析比较了贵州不同产地天门冬的含水量、醇溶浸出物、总灰分、皂苷和氨基酸含量。结果表明:不同产地天门冬的含水量为8.17%～14.03%,醇溶浸出物为63.49%～92.67%,总灰分为4.41%～4.82%,总皂苷为2.65%～4.36%,氨基酸总量为3.14%～6.83%。采集的野生样品基本符合中国药典对品质的要求,药效成分含量由高到低的产地依次为册亨、镇宁和沿河;相同产地的野生样品品质相当。

贵州太子参白绢病发生及防治

太子参白绢病属于土传病害,现已逐步上升为贵州部分地区太子参的主要病害。该病菌以菌丝体和菌核在病残体及土壤中越冬,成为翌年的初侵染源。太子参品种的抗病性、耕作栽培措施、高温高湿的气候条件等影响该病发生的主要因素。实行抗病品种筛选、轮作、改良土壤、种根药剂处理、田间肥水管理结合田间药剂防治,可有效控制病害的发生。

多组学综合分析白木通自花授粉后幼果脱落机制

【目的】通过多组学综合分析白木通幼果在自花授粉后的脱落机制,为白木通良种繁育提供理论依据。【方法】通过人工授粉技术对白木通栽培种BMTGKAN1进行自花授粉和栽培种间授粉,授粉后第13和18 d取样,利用苯胺蓝染色法分析授粉后花粉管的萌发情况,石蜡切片技术观察授粉后胚珠发育情况,统计不同授粉处理的幼果留存率,并结合转录组和代谢组分析授粉后幼果脱落机制。【结果】自花授粉和栽培种授粉的花粉在BMTGKAN1雌蕊内萌发生长情况相似,但在受精过程中,栽培种间授粉胚珠在授粉后6 h发生核融合,自花授粉组的胚珠面积较小,未发生核融合,授粉后18 d栽培种间授粉的胚珠发育出胚乳和胚,而自花授粉胚珠未发育出胚乳和胚,出现内外珠被分离,且此时幼果留存率存在明显差异,即自花授粉后第18 d幼果留存率仅为5.92%,栽培种间授粉后第18 d幼果留存率高达86.24%。在转录和代谢水平上,栽培种间授粉与自花授粉相比,授粉后第13 d和第18 d差异表达基因(DEGs)分别为444和3646条,差异代谢物(DEMs)分别为427和412个。在相同授粉方式的比较中,自花授粉后第13 d与第18 d相比,有3305个DEGs和457个DEMs,栽培种间授粉第13 d与第18 d相比,有1123个DEGs和420个DEMs。实时荧光定量PCR检测结果与转录组数据变化趋势基本相同,说明转录组数据分析结果相对准确。在各对比组DEGs和DEMs联合分析中,至少在一个对比组中被富集到的KEGG信号通路共有162条,其中有48条在各对比组中均被富集到。植物激素信号转导通路、亚油酸代谢通路、ABC转运蛋白通路和苯丙烷生物合成通路极有可能参与调控白木通自花授粉后的幼果脱落。【结论】BMTGKAN1属于晚期自交不亲和植物,其自花授粉后13~18 d大量脱落幼果,受其体内植物激素信号转导通路、亚油酸代谢通路、ABC转运蛋白通路、苯丙烷生物合成通路调控,在种植实践中选择2个及以上花期相近的白木通栽培品种隔行交叉种植以提高坐果率。

植物生长调节剂对苗药艾纳香产量和品质的影响

目的:为了探明植物生长调节剂对药用植物艾纳香生长、产量和品质的影响,用3种不同的植物生长调节剂6-苄氨基腺嘌呤(6-BA)、胺鲜酯(DA-6)、多效唑(PP333)在旺长期前期处理艾纳香,为艾纳香规范化栽培提供理论依据。方法:采用田间试验的方法,于7月在艾纳香植株上喷施植物生长调节剂。在采收期考察各处理的农艺性状并取样称量其叶片鲜重和单株鲜重,测定其挥发油、总黄酮和左旋龙脑的含量。结果:研究表明,3种不同的植物生长调节剂在不同浓度对艾纳香各农艺性状指标均有不同程度的促进作用,10 mg/L 6-BA可以显著的提高挥发油的含量,50 mg/L 6-BA和10 mg/L DA-6可以提高总黄酮的含量,而150 mg/L PP333可以使艾纳香显著增产,并有助于左旋龙脑含量的增加。结论:使用质量浓度为150 mg/L PP333处理,既可以保证艾纳香优质的农艺性状,从而得到较高的产量,还可以保证其含有的有效成分。

贵州金银花和山银花产业现状与发展对策

为贵州金银花和山银花产业发展提供决策参考,从种植基本情况、政府支持力度、产业发展模式及产业链完整程度等方面对贵州金银花和山银花产业的发展现状进行归纳总结,并针对其产业存在盲目扩大种植面积、产品质量参差不齐、政府支持力度较弱、产业链不完整及深加工技术较落后等问题,提出了稳定贵州金银花和山银花现有种植面积、加大产品研发力度、制定相关保障政策、扩大宣传力度和增强市场竞争力等对策建议。