移植肝冷保存-再灌注中肝细胞线粒体DNA ATPase8基因表达改变与细胞凋亡的研究

目的探讨移植肝冷保存-再灌注中肝细胞线粒体DNA ATPase8基因表达改变与细胞凋亡的关系。方法 (1)Wistar大鼠186只,采用改良"二袖套法"复制大鼠肝移植模型,动物随机分为A组(冷保存30min组),B组(冷保存6h组),C组(冷保存12h组)和D组(假手术对照组),分别于制模后于12h、24h、3d、5d、7d采集标本,保证每时相点存活大鼠6只。(2)观察线粒体形态变化,检测各组大鼠肝脏SOD、ATP含量和肝细胞凋亡数量。(3)采用RT-PCR检测mtDNA ATPase8 mRNA表达。结果冷保存-再灌注后早期(12h),A、B、C3组SOD、ATP含量、ATPase8 mRNA表达均降低,C组显著低于A组、B组(P<0.05),并且C组肝细胞线粒体受损较重,凋亡数量明显多于A组、B组(P<0.05)。再灌注24h后A、B、C3组SOD、ATP含量、ATPase8 mRNA表达升高,线粒体损伤减轻,肝细胞凋亡减少。结论冷保存-再灌注后ATPase8基因表达量和ATP含量减少,细胞凋亡增多,并且冷保存时间的延长,再灌注后变化越显著,提示ATPase8基因表达异常可能是影响肝细胞凋亡的主要原因之一。