白及多糖的提取、纯化技术及结构表征研究进展

中药白及Bletilla striata(Thunb.)Reichb.f.是临床上常用的中药材之一,广泛用于各种出血、疮痈肿毒、皮肤皲裂等,具有很高的药用价值,白及多糖是中药白及的主要有效成分。大量研究发现,白及多糖具有止血、抗炎、抗氧化、黏膜保护和抗肿瘤等多种药理活性。同时,白及多糖还具备优良的生物相容性、生物可降解性、生物粘附性等特性,在生物材料及工业领域被广泛应用。近年来,白及多糖的提取、分离、纯化及结构表征相关研究文献较多。然而,各提取工艺及纯化方法对白及多糖的提取率和结构特征差异较大。综述了白及多糖的提取方法、纯化方法和结构特征研究进展,以期为白及多糖的进一步研究和开发提供帮助。

高效液相色谱法测定保健食品中芦荟苷的不确定度评定

采用高效液相色谱法测定保健食品中芦荟苷的含量,并根据《测量不确定度评定与表示》(JJF 1059.1—2012)和《化学分析测量不确定度评定》(JJF 1135—2005)来评定其测量不确定度。以测定原理为基础,建立数学模型,运用测量不确定度的基本评定方法,对影响结果准确度的每个因素进行测量不确定度的计算和评定,以此计算合成不确定度,当置信概率为95%时,得到保健食品中芦荟苷的测量结果为(551.6±14.23)mg/kg(k=2)。结果显示,拟合标准曲线所引入的测量不确定度是保健食品中芦荟苷含量不确定度评定的主要来源因素,本文对高效液相色谱法测定保健食品中芦荟苷结果的不确定度评定具有参考作用。

贵州特色花香风味白酒酒体理化指标的分析研究

贵州花香风味白酒是近几年新兴的一个酒种,其采用鲜花酿造的独特工艺,在市场上已形成一定的规模及消费人群。本研究抽取贵州本土市场"黔莼花"牌花香酒进行理化指标的检测,根据"贵州花香型白酒"团体标准T/GZSX 060-2019的检测规范对酒精度、固形物含量、甲醇、酸酯总量等多个指标进行测定。结果表明,各项指标均符合标准规范,其中氰化物和铅无检出。本次检测分析对市面上花香风味酒类产品的相关检测工作提供了数据参考。

灯盏花乙素磷脂复合物脂微球质量评价

目的评价灯盏花乙素磷脂复合物脂微球质量。方法HPLC法测定灯盏花乙素含量,观察脂微球外观形态,测定其pH值、粒径、酸值、甲氧基苯胺值、游离脂肪酸含量、过氧化值,再进行有关物质检查。结果灯盏花乙素在1~128μg/mL范围内线性关系良好(r=09998),加样回收率为8985%~9752%,RSD为035%~187%,3批样品中其平均含量为(3577±014)μg/g。所得脂微球呈乳白色,呈球形或类球形,pH值为700~705,平均粒径为16059 nm,酸值为094 mg/g,游离脂肪酸含量为357 mmol/L,甲氧基苯胺值为080,过氧化值为045 mmol/kg,均符合相关规定。在规定条件下的破坏性试验中,未发现相关杂质产生。结论该方法稳定可行,所制得的灯盏花乙素磷脂复合物脂微球相关指标均符合国家质量标准检查项目要求。

酸浆乙酸乙酯活性部位抗胃溃疡的机制研究

为了研究幽门结扎和乙醇诱导两种胃溃疡模型对酸浆乙酸乙酯活性部位抗胃溃疡的作用机理,采用幽门结扎胃溃疡模型测定胃液量、游离酸、总酸量及蛋白酶活性,采用乙醇诱导胃溃疡模型检测血浆中一氧化氮(NO)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)活性和组织匀浆液中表皮生长因子(EGF)的表达;通过蛋白质印迹法(Western blot)和实时荧光定量核酸扩增检测系统(QPCR)分析胃粘膜中环氧化酶1和2(COX-1/2)的蛋白表达和mRNA表达。结果显示:EAF以100、250和500 mg/kg 3个剂量灌胃时,均能显著降低胃液量、游离酸、总酸和胃蛋白酶活性(P<0.05)。EAF中、高剂量组能显著增加血浆中NO含量和SOD活性(P<0.05),降低MDA水平(P<0.01),上调胃组织匀浆液中EGF表达(P<0.05)。关于EAF对COX蛋白和mRNA表达的影响,COX-1的表达水平无显著差别(P>0.05),EAF各剂量组与模型组和对照组相一致。但相对于模型组,EAF各剂量组明显抑制COX-2蛋白和mRNA表达的上调(P<0.05)。EAF可能通过对大鼠胃液量、游离酸度、总酸度和胃蛋白酶活性的抑制,促进氧自由基清除剂SOD、保护因子NO和EGF的合成,降低MDA的损害和抑制COX-2信号通路,从而提高溃疡愈合质量。

白及清肺养胃口服液经口给药小鼠急性毒性试验研究

本研究通过检测白及清肺养胃口服液的急性毒性,为进一步研究及安全使用该产品提供了试验依据。采用一次性给予小鼠灌胃未稀释的白及清肺养胃口服液浸膏样品,记录14天内小鼠出现的死亡及反应情况,根据结果测定白及清肺养胃口服液对小鼠经口给药的半数致死量(Median lethal dose,LD50)或最大耐受量(Maximal tolerance dose,MTD),亦或最大给药量(Maximal feasible dose,MFD)。结果显示,对小鼠以最大给药容积与最大浓度一次性灌胃白及清肺养胃口服液后,14天内受试小鼠均未出现死亡及其他异常,是以只能测定其最大给药量为200g/kg。故得出结论,以最大剂量给小鼠灌胃白及清肺养胃口服液浸膏后,所有小鼠均未出现死亡及其他异常,提示该受试样品无毒性,且白及清肺养胃口服液对小鼠经口给药的最大给药量为200g/kg。

酸浆化学成分及抗胃溃疡活性研究

目的明确酸浆中哪些成分具有抗胃溃疡活性。方法本课题组对酸浆乙酸乙酯萃取部位进行系统化学成分分离。酸浆乙酸乙酯部位在大孔吸附树脂富集后经过反复硅胶柱色谱进行分离,再根据理化性质和波谱数据鉴定化合物的结构。采用乙醇诱导胃溃疡模型测定粗分片段和目标化合物抗胃溃疡活性。结果从酸浆活性部位分离获得30个化合物,化合物3、4、12、24和30为首次从酸浆中分离得到。9组粗分片段中,Fr G、Fr K和Fr OPQR三组表现出显著的抗胃溃疡活性(P<0.05,P<0.01),抑制率分别为55.3%、74.5%和93.8%,与之相比较,法莫替丁组的抑制率为89.3%;灌胃剂量为6.25、12.5和25 mg·kg^(-1)时,酸浆苦味素B的抑制率分别为27.8%、67.3%和74.6%;灌胃剂量为10、20和40 mg·kg^(-1)时,木犀草苷的抑制率分别为29.7%、45.6%和64.2%。结论酸浆苦味素B和木犀草苷可能是酸浆抗胃溃疡活性的主要成分。

酸浆苦味素B在大鼠体内的药代动力学参数及组织分布研究

建立大鼠血浆和组织中酸浆苦味素B的含量测定方法,研究酸浆苦味素B在大鼠体内的药代动力学过程及组织分布。以4.968、9.935、19.87 mg/kg 3个剂量酸浆苦味素B灌胃大鼠,采集血浆和组织样品,然后采用UPLC-MS/MS法测定大鼠血浆和组织中的酸浆苦味素B浓度,研究酸浆苦味素B药代动力学参数及组织分布情况。结果显示,在大鼠血浆和组织中,酸浆苦味素B在1.3 ng/mL~1300 ng/mL和1.3 ng/mL~6500 ng/mL范围内线性关系良好,日内、日间精密度均小于15%,提取回收率为94.17%~118.77%。酸浆苦味素B低、中、高3个剂量组在体内的主要药代动力学参数:达峰时间tmax均为0.667 h,达峰浓度Cmax分别为(169.0866.641)μg/L、(247.51323.434)μg/L和(619.56728.201)μg/L,半衰期t1/2z分别为(8.9752.966)h、(10.0223.196)h和(5.9122.271)h,药时曲线下面积AUC(0-t)分别为(748.73547.13)μg/L·h、(1189.897100.436)μg/L·h和(2963.312176.7)μg/L·h,说明酸浆苦味素B在体内吸收快,消除较慢,曲线下面积(AUC)与剂量之间呈线性关系。大鼠灌胃给药19.87 mg/kg后,20 min的组织分布顺序为胃>十二指肠>肺>卵巢>脂肪>肾>肝>小肠>直肠>大肠>脾>心>肌肉>脑;50 min的组织分布顺序为胃>十二指肠>小肠>肾>脂肪>卵巢>肝>脾>直肠>心>肺>大肠>肌肉>脑;180 min的组织分布顺序为十二指肠>胃>肝>小肠>脂肪>大肠>直肠>肺>心>卵巢>肌肉>肾>脾>脑。说明酸浆苦味素B在大鼠体内组织分布广泛,不同时间点药物浓度以胃中相对较高,推测其可能对胃有一定的靶向性。试验建立的UPLC-MS/MS检测方法操作简便、精密度高,适用于酸浆苦味素B在大鼠体内的药代动力学和组织分布研究,为酸浆苦味素B作用机制研究及药物开发提供一定的参考。

白及清肺养胃口服液质量标准研究

为建立白及口服液的质量标准,本研究采用TLC法对白及清肺养胃口服液中的白及进行定性鉴别,采用紫外-可见分光光度法测定多糖含量。结果显示,TLC鉴别中供试品与白及和酸浆对照药材在相应位置上显示相同的颜色斑点。3批供试品中,多糖平均含量不少于1.5%。故得出结论,采用水提醇沉法制备口服液具有效率高、适合大规模生产等特点。该质量控制方法快速、准确,可有效控制白及清肺养胃口服液的质量。

白及清肺养胃口服液制备工艺的研究

本研究处方中的白及和酸浆采用正交设计实验,以提取时间、溶剂倍量和提取次数作为考察因素,以白及中1,4-二[4-(葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯(militarine)收率、总多糖收率和总固体物为考察指标,筛选出白及口服液的最佳提取工艺参数。

消炎灵胶囊微生物限度检查适用性方法探索研究

目的建立消炎灵胶囊的微生物限度检查适用性方法,并对不同省份3个企业48批样品进行微生物限度检查及结果分析。方法按《中国药典》2020年版四部通则非无菌产品微生物限度检查方法(1105、1106和1107)进行方法探索研究。结果本品对金黄色葡萄球菌和铜绿假单胞菌有一定的抑菌活性,需氧菌总数采用供试液稀释法(1∶50,每皿1 mL)、霉菌和酵母菌总数采用常规法计数回收率均能达到0.5~2要求;大肠埃希菌、耐胆盐革兰氏阴性菌和沙门菌采用常规法,阳性菌均能生长良好。结论统一了消炎灵胶囊的微生物限度检查适用性方法,且方法可行;48批样品的微生物限度检查结果均符合规定。

不同产地铁线蕨药材指纹图谱的建立、分析及差异成分的含量测定

目的:建立不同产地铁线蕨药材的指纹图谱,并进行化学计量学分析和差异成分的含量测定,为铁线蕨药材质量控制提供参考。方法:采用高效液相色谱-二极管阵列检测器法(HPLC-DAD)检测并结合《中药色谱指纹图谱相似度评价系统》(2004A版)建立19批不同产地铁线蕨药材(S1~S19)的指纹图谱,同时进行共有峰指认和相似度评价。采用聚类分析、主成分分析(PCA)、正交偏最小二乘法-判别分析(OPLS-DA)等化学计量学分析方法对19批不同产地铁线蕨药材的质量进行评价,筛选差异成分,并对部分差异成分进行含量测定。结果:19批不同产地铁线蕨药材中,共确定22个共有峰,并指认了9号峰为绿原酸、17号峰为槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸、20号峰为山柰酚-3-O-芸香糖苷;19批药材的相似度为0.530~0.962。经聚类分析发现,S7、S10聚为一类,S15、S18聚为一类,S1~S6、S8、S9、S11~S14、S16、S17、S19聚为一类;经PCA、OPLS-DA发现,S7、S10聚为一类,S15为一类,S18为一类,S1~S6、S8、S9、S11~S14、S16、S17、S19聚为一类;筛选出绿原酸、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸、山柰酚-3-O-芸香糖苷以及14号峰所代表的化学成分为该药材的差异成分。19批铁线蕨药材中,绿原酸、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸和山柰酚-3-O-芸香糖苷的平均含量分别为0.10~4.25、0.31~7.11、0.61~12.00mg/g。结论:本研究建立了不同产地铁线蕨药材的HPLC-DAD指纹图谱,指认了3个共有峰;筛选出了4个影响铁线蕨药材质量的差异成分,其中绿原酸、槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸、山柰酚-3-O-芸香糖苷在不同产地铁线蕨药材中的含量差异明显。

酱香型白酒理化指标抽检分析及研究

对酱香型白酒品牌进行抽检,共选取25个样品。以遵义地区行业标准《遵义大曲酱香型白酒》(T/GZSX 030—2018)为基本依据,结合酒精度、固形物、己酸乙酯、甲醇、氰化物、铅含量、酸酯总量共7项指标的国家相关检测标准方法,对25款抽检样品的7个理化指标进行检测。结果表明,甲醇、氰化物、铅含量3项食品安全性指标均符合相关限量标准,其余4项指标有部分抽检样品检测数据上略有偏差,为酱香型白酒的质量监管及企业内部进行自检提供了可资借鉴的方法及数据。

团羽铁线蕨HPLC-DAD指纹图谱的建立与多种特征成分含量测定

通过建立团羽铁线蕨指纹图谱和多种共有成分含量测定方法,以在不同产地团羽铁线蕨质量控制中应用。采用SHISEIDO CAPCELL PAK C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm),检测波长280 nm,检测温度35℃,甲醇-0.05%磷酸水溶液梯度洗脱方法建立铁线蕨指纹图谱与特征成分含量测定的HPLC-DAD分析方法,对多批次药材以相似度软件与化学计量学分析相结合的方式进行质量评价。结果表明:本方法提取铁线蕨有13个共有峰,指认出共有峰2个,分别为槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸和山奈酚-3-O-芸香糖苷,相似度为0.558~0.901。结合聚类分析和主成分分析,使用化学计量学正交偏最小二乘判别分析法对13个共有峰进行评价,样本中槲皮素-3-O-β-D-吡喃葡糖苷酸和山奈酚-3-O-芸香糖苷含量范围分别为0.11~4.35 mg/g、0.15~10.35 mg/g,结果显示不同产地团羽铁线蕨数据差异大。建立的指纹图谱及多特征成分含量测定的HPLC-DAD分析方法,能更全面而准确地体现团羽铁线蕨药化学成分整体轮廓与各类特征成分含量贡献,为提升不同产地团羽铁线蕨药材的质量控制方法奠定了基础。