MS4A6D通过激活NLRP3炎性小体促进卡拉胶诱导的小鼠足垫肿胀

目的研究巨噬细胞特异性表达的4次跨膜蛋白MS4A6D(membrane-spanning 4-domain subfamily A(MS4A)superfamily protein 6D)对卡拉胶(carrageenan,CGN)诱导的小鼠足垫肿胀的影响及其可能的机制。方法以雄性SPF级野生型(WT)小鼠及各种基因敲除(Ms4a6d^(-/-)、Nlrp3^(-/-)、Casp-1^(-/-)及IlR1^(-/-))小鼠为研究对象,采用一次性足下注射100μl 1%CGN(w/v)+20μl CaCl_(2)(50 mmol/L)的方法建立小鼠足垫肿胀模型;对比观察WT及各基因敲除小鼠的足垫肿胀严重程度;利用H&E染色对足垫肉组织进行病理学分析并采用免疫荧光检测足垫组织中巨噬细胞的浸润情况;采用Western blot对比分析组织NLRP3、IL-1β及IL-18的蛋白表达水平。结果1)在1%CGN+CaCl_(2)(50 mmol/L)的联合注射可显著促进小鼠的足垫肿胀,然而Ms4a6d^(-/-)小鼠的足垫肿胀程度显著低于WT小鼠(P<0.05);2)H&E染色可见WT模型组小鼠足垫发生明显的组织损伤和炎症浸润,并伴有坏死病灶,而Ms4a6d^(-/-)小鼠的足垫其水肿程度减轻、炎症浸润显著减轻,CD68+巨噬细胞浸润明显减少;3)WT模型组足垫组织中成熟的Caspase-1酶及IL-1β的表达显著高于Ms4a6d^(-/-)组;4)与WT对照小鼠相比,卡拉胶诱导的Nlrp3^(-/-)、Casp-1^(-/-)及IlR1^(-/-)小鼠其足垫肿胀程度显著减轻(P<0.05)。结论MS4A6D通过促进巨噬细胞NLRP3炎性小体的激活并诱导IL-1β及炎症因子的释放而加剧CGN诱导的小鼠足垫肿胀,表明MS4A6D促进急性炎症进展。