NF-κB寡核苷酸诱骗剂构建大鼠特异性耐受性树突状细胞

目的:运用NF-κB寡核苷酸诱骗剂(NF-κB ODN Decoy)构建大鼠耐受性树突状细胞(dendritic cell,DC),并将其负载牛Ⅱ型胶原(BⅡC),对其成熟状态进行评价。方法:取SD大鼠脾脏单核细胞,用粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和IL-4诱导其转化为DC后分成5组:单纯DC组、脂多糖(LPS)DC组、Decoy-DC组、LPS刺激Decoy-DC组、负载BⅡC-Decoy-DC组,对终细胞进行形态观察、评价活力、表型鉴定。结果:大多数大鼠脾脏来源DC呈CD80+和CD86-的表型特征,各组大鼠DC特异性标志OX-62表达率>70%,差异无统计学意义(P<0.05);与单纯DC组比较,Decoy-DC组细胞表面共刺激分子CD80和CD86阳性表达率和表达强度均呈明显降低(P<0.05),经LPS刺激后DC细胞CD80及CD86阳性表达率和表达强度上调均不明显(P>0.05);BⅡC-Decoy-DC组DC细胞形态学与Decoy-DC组无明显差别,也同样呈CD80和CD86低表达。结论:用NF-κB ODN Decoy成功构建耐受性DC,此耐受性DC负载了特异性抗原BⅡC后表型稳定。

类风湿关节炎患者外周血疱疹病毒DNA的检测及其Th亚群激活状况研究

目的 研究类风湿关节炎 (RA)患者疱疹病毒感染情况以及Th亚群的激活状况。方法 通用引物PCR扩增 32份RA患者和 36份健康对照者全血和血清标本EB病毒 (EBV)、巨细胞病毒(CMV)、疱疹病毒 (HSV) 1、HSV 2DNA ,并用限制性内切核酸酶SmaⅠ、BamHⅠ进行酶切鉴定 ;酶联免疫吸附测定 (ELISA)法检测 36例RA患者和 2 5名健康对照血清干扰素 (IFN) γ、白细胞介素 14(IL 4)水平 ,并与健康对照组进行比较。结果 ①RA患者全血与血清标本疱疹病毒DNA检出率分别为6 2 %和 3 1% ,健康对照组分别为 0和 2 8%。②RA患者血清IFN γ水平 (2 1± 33)pg/ml及IFN γ/IL 4比值 2 5± 2 0显著高于健康对照 (10 1± 2 6 ) pg/ml和 17± 8,P均 <0 0 5。IL 4在两组间的差异无显著性。③IFN γ水平及IFN γ/IL 4比值与RA病情严重程度显著相关。结论 ①HSV、EBV、CMV等疱疹病毒DNA检出率与RA发病无相关性。②RA患者体内存在Th1(主要分泌IFN γ)与Th2 (主要分泌IL 4)激活比例失衡的现象。主要分泌致炎性细胞因子的Th1细胞活性增高而主要分泌抗炎性细胞因子的Th2细胞活性相对不足 ,这可能与RA患者慢性持续性关节炎症有关。