研究生医学分子生物学实验教学方法改革效果

目的:探索教学方法改革后硕士研究生分子生物学实验教学效果。方法:选取2012级选修研究生医学分子生物学实验学生126名(基础型研究生102名,临床型24名)作为传统教学组(传统组),2013级学生133名(基础型研究生103名,临床型30名)作为教学改革组(教改组),分别采用传统和教改后实验教学方法进行教学,比较两组学生成绩。结果:教改组成绩为(85.7±3.1)分,传统组为(84.8±4.1)分,两组比较差异有统计学意义(P<0.05);基础型、临床型学生成绩分别比较,教改组(85.9±2.9)分、(85.2±3.6)分较传统组(85.1±4.1)分、(83±4.2)分也有所升高,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:研究生医学分子生物学实验教改后的实验教学效果优于传统教学,值得进一步推广。

硕士研究生《医学分子生物学》的教学体会

对医学硕士研究生而言,医学分子生物学课程是一门理论和实验并重的专业基础课。该文根据贵阳医学院硕士研究生《医学分子生物学》教学的情况,从教学的不同环节进行一些思考和总结,并对如何提高教学效果,培养跨学科的医学人才做了积极的探索。

医学生物技术本科生基因工程实验教学改革与实践

为了培养高素质医学生物技术本科人才,完善基因工程实验教学方法,对实验教学课程安排、实验内容、教学形式等进行了改革,建立合理的实验成绩评估体系,提高学生实验动手能力,调动学生实验学习兴趣,提高实验教学质量,以取得良好实验教学效果。

钙蛋白酶10基因多态性与贵阳地区人群2型糖尿病的相关性研究

目的探讨钙蛋白酶10(Calpain10)基因第3内含子SNP19多态性与贵阳地区人群2型糖尿病(T2DM)遗传易感性的关系。方法采用病例-对照研究设计,对74例T2DM患者和72例健康对照应用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)技术检测Calpain10基因SNP19位点多态性,并与不同人群进行比较分析。结果与对照组相比病例组SNP19基因型频率、等位基因频率均无显著差异,与其他研究人群的结果相近。结论 Calpain10基因SNP19位点多态性可能与贵阳地区人群T2DM的发生无关。

贵州省少数民族百越系统的分子人类学分析

目的:分析贵州省少数民族百越系统父系遗传结构,探讨其起源及迁徒。方法:采用聚合酶链式反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测贵州省百越系统7个少数民族10个单核苷酸位点(SNPs)构成的Y染色体单体型,并以省内苗族为对照分析其父系遗传结构。结果:侗族、水族集中于Y染色体-SNP中H11单体型,H11的频率分别为92.5%及58.7%,布依族、仡佬族、仫佬族、毛南族、壮族5个民族集中于Y染色体-SNP中H8单体型,苗族样本集中于Y染色体-SNP中的H8、H11与H12单体型。结论:贵州省从江侗族、三都水族父系遗传构成相对简单。通过主成分分析,证明贵州省从江侗族、三都水族与其他的壮侗语族人群相聚,而布依族、仡佬族、仫佬族、毛南族、壮族5个民族之间有密切联系,且与国内其他地域百越系统有较大的遗传差异,是一个相对独立的群体。

贵阳地区545对孕期夫妇地中海贫血筛查

目的 :为预防和控制地中海贫血重症患儿的出生 ,对贵阳地区 5 4 5对孕期夫妇进行地中海贫血血液学筛查。方法 :采用地中海贫血一管定量筛查法 ,HbA2 、HbF定量法。结果 :对进行围产期检查的 5 4 5对孕期夫妇 (共 10 90例 )进行地中海贫血血液学筛查 ,检出阳性病例 4 3例 ,检出率为 3 94 % ,男女检出阳性率为 1 15∶1,其中夫妇双方均为阳性病例者 6对。结论 :在贵阳地区进行孕期夫妇的地中海贫血筛查工作 ,为产前基因诊断奠定了基础 ,对避免重症患儿的出生具有重要的社会意义。

氟对SH-SY5Y神经细胞生物膜性脂质的作用

目的:深入了解氟中毒对神经细胞中生物膜性脂质结构的影响及其改变机制。方法:体外培养SH SY5Y人脑神经母细胞瘤细胞,在培养液中加入不同浓度的氟化物或加入抗氧化剂,培养48h后用测定细胞 MTT的方法来了解细胞的损伤程度,用高效液相色谱法分离和测定培养液中脂质过氧化物水平,用过柱和比色 法测定细胞生物膜磷脂含量,用高效液相色谱法测定细胞生物膜辅酶Q和胆固醇含量。结果:经氟处理的神经 细胞中MTT水平降低和脂质过氧化水平升高,呈现剂量依赖关系;高浓度氟处理的神经细胞中磷脂和辅酶Q含 量减少,但胆固醇含量不变;加入维生素E后可减弱高剂量氟对生物膜性脂质的破坏作用。结论:氟中毒可引 起SH SY5Y神经母细胞瘤细胞生物膜性脂质结构发生异常改变,其机制可能与高剂量氟引起的自由基增多而 对细胞生物膜造成的损害有关。

贵阳市6032例乙肝患者HIV感染情况调查

目的:了解乙型肝炎病毒(HBV)感染人群人免疫缺陷病毒(HIV)感染状况,为预防与控制艾滋病在乙肝感染者中的传播提供科学依据。方法:收集贵阳地区6 032例乙肝感染者的血清,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)进行HIV抗体筛查,初筛阳性血清复检仍为阳性后标本送贵州省临床检验中心艾滋病抗体确认实验室用蛋白印迹法(WB)进行确认。结果:6 032例HBV感染者中HIV阳性者8例,阳性率为1.3‰,其中乙肝病毒携带者(HBsAg阳性)HIV阳性4人。结论:HBV感染者中的HIV感染率明显高于一般人群感染率0.5‰,应采取有效措施预防并阻断艾滋病在乙肝感染者中的传播。

贵阳市孕妇夫妇血红蛋白的调查研究

目的 :对贵阳市 15 3对孕妇夫妇的血红蛋白进行测定 ,早发现、早治疗妊娠期贫血 ,提高围产期保健 ,为优生优育创造条件。方法 :采用氰化高铁血红蛋白法。结果 :妊娠早期、中期、晚期的血红蛋白 (Hb)均值分别为 136 .92 g/L ,130 .95 g/L ,12 6 .2 4g/L ;汉族孕妇Hb均值为 132 .15 g/L ,少数民族孕妇Hb均值为 12 6 .34 g/L ;15 3例孕妇中Hb <10 0 g/L的有 4例 ,占 2 .5 % ;配偶的Hb均值为 16 7.32 g/L ,Hb <12 0g/L的仅 1例 ,孕妇贫血率较WHO所调查的孕妇贫血率 (5 0 % )低。结论 :孕妇定期、常规检查Hb含量 ,发现贫血即给予治疗 ,对降低孕妇和围产儿死亡有重要意义。

贵州3个民族亚甲基四氢叶酸还原酶基因的遗传多态性

目的对贵州侗族、布依族、苗族亚甲基四氢叶酸还原酶(MTHFR)基因多态性进行研究。方法应用TaqManMGB探针基因分型方法检测贵州3个民族MTHFR基因两个SNP(677及1 298位)多态位点的基因频率及基因型频率,并构建单倍型。结果 MTHFR 677C/T位点3个民族之间基因型和等位基因频率差异有统计学意义(P<0.05),其中布依族与苗族间基因型和布依族与侗族、苗族间等位基因频率差异有统计学意义(P<0.01)。MTHFR 1298A/C位点3个民族之间基因型和等位基因频率差异无统计学意义(P>0.05)。677CC/1298AA双野生型频率以布依族最低,3个民族中均未见677TT/1298CC双纯和突变及677TT/1298AC组合。3个民族中以677C-1298A(54.3%)单倍型所占平率最高。布依族和苗族两位点间存在677C/T和1298A/C连锁不平衡现象。结论 MTHFR基因677C/T和1298A/C位点在不同民族、不同地区间的分布存在明显差异。

贵州三都水族β-地中海贫血筛查及基因分析

目的 了解贵州省三都水族β-地中海贫血的发病率、基因突变类型及分布特点,进一步从分子水平揭示β-地中海贫血多态性。方法 采用"红细胞休克一管定量法"测定红细胞脆性,乙酸纤维素薄膜电泳分离测定HbA2,一分钟碱变性法测定HbF。对贵州省三都水族自治县1 090例当地水族居民,进行β-地中海贫血血液学筛查。用常规酚-氯仿抽提法提取β-地中海贫血携带者DNA,经PCR-反向点杂交法对β珠蛋白基因进行突变分析。结果 在受检的1 090人中,共检出β-地中海贫血携带者49例,检出率为4.50％,男性26例,女性23例,男女比值为1.1:1。经基因分析该地人群的β-地中海贫血基因突变类型主要为CD41-42(TCTT)移码突变(20例,40.82％)和CD17(A→T)无义突变(20例,40.82％),尚有9例(18.36％)不在中国人常见的16种β-地中海贫血突变范围内,待测序。结论 贵州省三都地区水族人群中β-地中海贫血有较高的发生率,且其基因突变类型有明显的地区差异和显著的民族特点,是我国一个较为特殊的β-地中海贫血分布区域。

贵州三都水族Y染色体单倍型频率分析

在92例贵州三都水族个体中,用PCR-RFLP法研究由11个单核苷酸多态位点(SNPs)组成的Y染色体单倍型频率分布,结果显示该人群的Y染色体主要为南方特异的H11和H9单倍型,两者频率高达90.22%。主成分分析结果显示其父系遗传结构与我国黎族、布依族等汉藏语系壮侗语族民族最为接近。通过Y染色体的遗传学观察与历史记载和语言学分类有较好一致性。

贵州从江侗族和江口土家族人群β-地中海贫血基因突变型的研究

目的了解β-地中海贫血在贵州从江县侗族、江口县土家族中的基因类型特点、基因型频率及分布规律。方法采用抗碱血红蛋白(HbF)和血红蛋白A2(HbA2)定量测定对人群进行β-地中海贫血初筛,同时应用全自动血细胞分析仪进行RBC、Hb、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW等7项血液学指标分析,用常规酚-氯仿抽提法提取筛查阳性受检者DNA,经PCR-反向点杂交法对β珠蛋白基因进行突变分析。结果受检982人中,共检出52例β-地中海贫血携带者,总检出率为5.27%,其中侗族、土家族检出率分别为7.85%、2.68%;经β珠蛋白突变基因分析,在这两个民族中检出中国人常见3种突变类型:CD17(A→T)无义突变(39例,75.00%),CD41-42(TCTT)移码突变(12例,23.07%)和βE(Codon26)(1例,1.92%)。结论在贵州省少数民族中β-地中海贫血有很高的发病率,基因突变类型具有显著的民族特征,β珠蛋白基因变异情况很独特,可能与族内婚配、家族发病聚集性和通婚地域半径狭小有关。

贵州西江苗族β地中海贫血筛查及基因分析

目的 对贵州省西江苗族进行了一次大样本的 β地中海贫血筛查及基因分析。方法 采用 Hb F和Hb A2 定量测定对人群进行 β地中海贫血初筛 ,然后用常规酚—氯仿抽提法提取 β地中海贫血携带者 DNA,再经PCR—反向点杂交法对β珠蛋白进行突变基因分析。结果 在受检的 890人中 ,共检出β地中海贫血携带者 37例 ,发生率为 4.16 %。经基因分析该地人群的β地中海贫血基因突变类型主要为 CD41 - 4 2 (TCTT)移码突变(5 4.1% )和 CD1 7(A→ T)无义突变 (4 5 .9% )。结论 完成对贵州西江苗族进行的β地中海贫血调查 ,获取其流行病学资料及其基因类型特征 ,对该地人群进行婚姻指导、产前诊断。

贵州省三都水族人群β-地中海贫血发病情况调查

目的了解贵州省水族人群β鄄地中海贫血的发病情况。方法采用“红细胞休克一管定量法”测定红细胞脆性,醋酸纤维素薄膜电泳分离测定,一分钟碱变性法测定HbF。结果在受检的1090人中,共检出β鄄地中海贫血携带者66例,检出率为6.06%,其中男性36例,女性30例,男女比例为1.2∶1。结论在贵州省三都地区水族人群中β鄄地中海贫血有较高的发生率,通过此次调查可使该人群对β鄄地中海贫血的严重危害性有所认识和引起有效的重视,这对开展优生优育,提高人口素质具有重要意义。

肉苁蓉对抗β-淀粉样肽神经细胞的毒性作用研究

目的:研究中药肉苁蓉对神经母细胞瘤细胞烟碱型乙酰胆碱受体表达的影响及其对抗β淀粉样蛋白(Aβ)神经毒性作用机制,以探讨其在阿尔茨海默病(alzheimer’s disease,AD)治疗中的作用。方法:比色法测定细胞MTT还原率筛选肉苁蓉安全浓度范围,并用Aβ25-35处理细胞后,测定MTT还原率,蛋白质印迹法(Western blotting)测定烟碱型乙酰胆碱受体α3、α7蛋白表达的变化;TBA比色法测定脂质过氧化产物(丙二醛)的水平。结果:肉苁蓉能提高细胞α3及α7烟碱型乙酰胆碱受体亚单位蛋白质表达水平;并能对抗Aβ25-35引起的α3和α7受体亚单位蛋白质水平降低;同时能减弱Aβ25-35引起的细胞损伤和脂质过氧化水平升高。这些作用随浓度的增加而增强。结论:肉苁蓉能上调烟碱型乙酰胆碱受体亚单位蛋白表达水平,且能对抗Aβ25-35的神经毒性作用,在AD的治疗中可能起到一定作用。

少数民族葡萄糖-6-磷酸脱氢酶基因突变检测

目的 了解贵州省少数民族葡萄糖 - 6 -磷酸脱氢酶 (Glucose - 6 - phosphatodehydrogenase,G6PD)缺乏症的发生率、基因突变类型特点及分布特征。方法 对贵州省苗族、水族、瑶族 2 5 6 6人采用四氮唑蓝定性法初筛、G6PD/6PGD比值法验证 ,再经错配引物介导的聚合酶链反应 /限制性酶切分析法检测中国人常见的基因突变型。结果 检出G6PD缺乏症 175例 ,其中苗族检出G1388A突变 7例、G1376T突变 1例、A95G突变 6例、C10 2 4T突变 8例 ;水族检出G1388A突变 12例、G1376T突变 2 4例、A95G突变 9例、C10 2 4T突变 2例 ;瑶族检出G1388A突变 15例、G1376T突变 7例。结论 贵州省是G6PD缺乏症的高发区 ,贵州省苗族、水族、瑶族中都存在G1388A、G1376T这两种中国人常见G6PD突变型。

AFLP技术在天麻遗传变异研究中的初步应用

为探讨AFLP技术在天麻遗传变异研究的应用，选取11对脚引物对11份不同来源天麻品种之间遗传关系进行AFLP分析的结果表明，11对引物共扩增出543条扩增带，每个引物组合在个体间扩增条带的数目有33-83条，平均为49．5．采用UPGMA法聚类分析得到的天麻各品种之间遗传距离为0．0792-0．6004。UPGMA聚类图显示，11份样品分为两大组群，其中的贵州天麻一群又分为2个组群．

贵州三都水族Y染色体上7个STR基因座的遗传多态性分析

采用多重PCR技术，结合ABIPRISM^TM 377 DNA Sequencer四色荧光标记进行基因扫描分型，对中国贵州三都水族群体进行7个Y—STR基因座的多态性分析，计算其基因频率、遗传多样性及单倍型多样性，获取相应的遗传多态信息。结果显示：在94个无关男性样本中，DYS19、DYS389Ⅰ、DYS389Ⅱ、DYS390、DYS391、DYS392、DYS393等基因座分别检出6，4，6，2，3，5，4种等位基因，遗传多样性在0．124（DYS389I）-0．630（DYS19）之间；由此组成的单倍型为27种，单倍型多样性0．868。此7个Y—STR基因座在贵州三都水族群体中具有较好的多态性，单倍型具有较高的遗传多态。