灯盏乙素对痴呆大鼠脑组织乙酰胆碱尼古丁受体蛋白及mRNA表达的作用

目的观察灯盏乙素对痴呆模型大鼠乙酰胆碱尼古丁受体(nAChR)亚单位蛋白质和mRNA水平表达的影响,探讨其可能的作用机制。方法 Wistar大鼠42只,随机分为5组,正常对照组(6只)、假手术组(6只)、学习记忆损伤模型组(6只)、灯盏乙素处理组(10只)和脑复康处理组(10只)。用双侧脑室注射β淀粉样蛋白(Aβ25-35)联合腹腔注射D-半乳糖方法建立痴呆大鼠模型;用灌胃方法分别进行灯盏乙素和脑复康给药处理;用Morris水迷宫方法检测大鼠学习记忆能力;用蛋白质印迹法和实时定量聚合酶链法分别从蛋白质水平和mRNA水平测定大鼠海马组织nAChR亚单位α4、α7及β2表达的变化。结果与正常对照组和假手术组比较,模型组大鼠学习记忆能力下降(P<0.05),α4及α7 nAChR蛋白表达水平明显降低(P<0.05),而β2亚单位改变不明显,3种亚单位nAChR的mRNA表达水平未见改变(P>0.05);用灯盏乙素处理后痴呆大鼠学习记忆能力有较大改善(P<0.05),α4、α7 nAChR蛋白表达水平有所回升(P<0.05);各组大鼠3种亚型nAChR的mRNA表达水平未见改变(P>0.05),灯盏乙素处理组与脑复康处理组比较各检测指标未见明显差异(P>0.05)。结论灯盏乙素可改善痴呆大鼠学习记忆能力,其机制可能与其上调nAChR表达有关。

血管性痴呆和阿尔茨海默病患者并发肺部感染的危险因素分析

目的探讨血管性痴呆(VD)和阿尔茨海默病(AD)患者并发肺部感染的危险因素,为防治不同痴呆伴发的肺炎提供参考。方法选取26例VD和18例AD住院患者进行前瞻性研究,对发生肺部感染的危险因素进行单因素回归分析和χ2检验。结果 26例VD中6例伴发肺部感染,18例AD中4例伴发肺部感染,AD与VD患者伴发肺部感染概率比较差异无统计学意义。单因素回归分析显示,长期卧床、合并糖尿病、进食困难、吸烟史是VD患者发生肺部感染的危险因素,而长期卧床、吸烟史、病程较长是VD患者发生肺部感染的危险因素。从并发肺炎患者的痰液中共培养出病原菌19株,其中革兰阴性菌12株,以铜绿假单胞菌和大肠埃希菌为主;革兰阳性菌7株,以葡萄球菌为主,两组患者感染的菌种类似。结论长期卧床和吸烟史是引起AD和VD患者肺部感染的共同危险因素,对不同痴呆患者并发肺部感染可采取基本相同的防治措施。

HRP标记DNA探针的制备及杂交条件探讨

目的 :用辣根过氧化物酶 (HRP)直接标记DNA探针 ,并对其斑点杂交条件进行探讨。方法 :以对苯醌 (PBQ)氧化HRP使其产生活化位点 ,并与聚乙烯亚胺PEI缩合形成HRP -PBQ -PEI复合物 ,再以戊二醛连接DNA ,共价结合构建直接酶标探针进行斑点杂交 ,利用HRP可与底物发生颜色反应的特点观察结果 ,并对不同杂交条件进行研究。结果 :成功构建了HRP标记的DNA探针 ,并进行了斑点杂交反应 ,归纳出较好的杂交条件。结论 :直接酶标DNA探针有较高的特异性及敏感性 ,操作简便快速 。

灯盏乙素对痴呆大鼠脑组织神经炎性反应的干预作用

目的:观察灯盏乙素对痴呆模型大鼠脑组织中几种炎性因子表达的影响,探讨其可能的抗炎治疗机制。方法:Wistar大鼠42只,随机分为5组,正常对照组、假手术组、学习记忆损伤模型组、灯盏乙素处理组和脑复康处理组。用双侧脑室注射β淀粉样蛋白(Aβ25-35)联合ip D-半乳糖方法建立痴呆大鼠模型;造模后次日分别用28 mg.kg-1灯盏乙素和365 mg.kg-1脑复康连续ig 20 d;实时定量聚合酶链法(RT-PCR)测定大鼠脑组织核因子(nuclear factor,NF)-κB p65表达的变化;免疫组织化学方法检测大鼠脑组织白介素-1β(IL-1β),白介素-6(IL-6)及肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的表达。结果:与正常组和假手术组相比,模型组大鼠脑组织中NF-κB p65 mRNA表达水平上升了27%和31%(P<0.05),IL-1β,IL-6,TNF-α表达的阳性细胞分值正常组(1.3±0.5,1.6±0.5,1.6±0.69)和假手术组(1.5±0.5,1.6±0.7,2.0±0.7)。模型组明显上升(2.9±0.7,3.2±0.8,3.0±0.82),P<0.05。灯盏乙素处理后NF-κB p65的mRNA表达水平下调了20%(P<0.05),IL-1β,IL-6和TNF-α表达的阳性细胞分值明显下降(2.1±0.67,2.3±0.70,2.2±0.53),P<0.05。结论:灯盏乙素可阻断痴呆大鼠脑组织中NF-κB p65的活化,抑制炎性因子释放,改善学习记忆能力,通过减轻神经炎症损伤起到神经保护的作用。