局部解剖学中穿插绘图式教学的试点教学

目的为了提高局部解剖学教学质量,尝试在多媒体教学过程中重新引入绘图式教学方法。方法对照组采用单纯多媒体的教学方法;试验组采用多媒体穿插传统绘图相结合的教学方法,绘制的图形,参考斯坦福公开课程——临床解剖学绘图。考核方法:学生参与的积极性(反对、无所谓、接受、积极参与),期末标本考试统一标准,随机实物考核;期末理论考试统一标准阅卷。结果试验组在平时学习积极性、期末标本考试、期末理论考试成绩等方面均明显优于对照组,两组比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论在局部解剖学教学中将传统绘图教学方式穿插整个教学过程,可以使局部解剖教学内容具有更直观、生动的特点,从而提高局部解剖学教学质量。

小鼠缺血再灌注损伤后海马齿状回Wnt1、Wnt3a的表达变化

目的探讨Wnt/β-catenin相关因子在缺血再灌注小鼠海马中的表达变化。方法将80只1月龄健康雄性昆明小鼠随机分为正常组、假手术组、缺血再灌注1、3、7、14、21、28 d组,通过夹闭小鼠双侧颈总动脉0.5 h再通的方法建立小鼠脑缺血再灌注损伤模型,采用腹腔注射5-溴脱氧尿嘧啶核甘(BrdU)检测海马齿状回区神经干细胞(NSCs)增殖规律及通过原位杂交法和免疫组织化学染色方法检测Wnt/β-catenin信号通路重要信号分子Wnt1、Wnt3a的表达变化。结果 BrdU检测显示正常组和假手术组小鼠海马齿状回区可见少量BrdU阳性细胞,缺血再灌注后3 d BrdU阳性细胞开始增高(P<0.01),缺血再灌注后7 d达高峰(P<0.01),随着灌注时间的延长呈下降趋势,缺血再灌注后28 d,BrdU阳性细胞数降至正常水平(P>0.05)。原位杂交法结果显示正常组、假手术组海马齿状回颗粒细胞下层均无明显Wnt1、Wnt3a阳性表达。缺血再灌注各组均可见Wnt1、Wnt3a阳性细胞,再灌注后1 d表达开始增加,14 d达高峰,28 d减少至正常水平。与正常组和假手术组比较,缺血再灌注各组Wnt1、Wnt3a阳性细胞数明显增多(P<0.05)。结论小鼠脑缺血再灌注损伤可激发内源性NSCs的增殖。当Wnt/β-catenin途径被激活时,Wnt1、Wnt3a在海马齿状回颗粒细胞下层的表达,为进一步研究Wnt信号通路在脑缺血再灌注损伤中的作用及其机制奠定了基础。

慢性镉中毒对小鼠海马齿状回结构的影响

目的观察慢性镉中毒对小鼠海马齿状回颗粒层细胞结构的影响。方法将清洁级4~5月龄昆明种小鼠40只随机分为对照组与镉中毒组,每组20只,雌雄各半。适应性饲养1周后,镉中毒组采用皮下注射氯化镉（2 mg/kg）,每周2次,连续染毒3个月,对照组同时注射等体积生理盐水。连续喂养3个月后取大脑海马组织分别进行尼氏染色、胶质纤维酸性蛋白（GFAP）、神经元特异性烯醇酶（NSE）免疫组化染色和透射电镜观察。结果光镜下,尼氏染色与免疫组化染色结果显示,对照组小鼠海马齿状回颗粒层神经元排列整齐、规则,结构完整,胞体较大,细胞轮廓清楚,胞核居中、核仁明显、胞浆尼氏体丰富,均匀分布于核周;胶质细胞分散在海马神经元之间,呈星形或梭形,体积小、核圆形或卵圆形;镉中毒组小鼠海马齿状回颗粒层神经元胞体变小、胞核固缩、胞浆减少,尼氏体明显减少或消失、着色浅,胶质细胞分散在海马神经元之间,体积增大;与对照组相比,镉中毒组海马齿状回颗粒层胶质细胞与NSE阳性神经元的数量增多（P〈0.05）。电镜下,对照组海马齿状回颗粒层神经元形态规则,胞膜清晰,细胞器丰富,结构完整;镉中毒组神经元胞体轻度水肿,核膜皱褶,核染色质皱缩,胞浆密度降低,细胞器减少,线粒体肿胀,部分透明成空泡。结论慢性镉中毒可导致小鼠海马齿状回颗粒层神经元减少、星型胶质细胞增多,这些变化可能是镉的神经毒性作用之一。

孕鼠染铝对仔鼠脑皮质神经元的影响

目的探讨母体孕期染铝对子代脑神经发育的毒性作用。方法 4~5月龄SD大鼠,雌雄各30只,1∶1合笼喂养,每日早晨查雌鼠阴栓,发现阴栓即进入实验（E0）,将孕鼠随机平分为2组。染铝组E0~E18期间以三氯化铝100 mg.kg-1.d-1灌胃;正常对照组以等量蒸馏水灌胃。分别取孕鼠两个年龄段子代即生后继续喂养的1月子代及3月子代鼠脑组织,每只孕鼠任取其子代2只,每小组子代30只。常规石蜡切片,经神经元特异烯醇酶（NSE）免疫组化染色,分别对大脑皮质Par1区内锥体细胞层NSE免疫组化染色阳性反应细胞进行计数,并用细胞形态学计量方法测量阳性反应产物的平均光密度。结果染铝组子代NSE免疫组化染色阳性细胞均明显少于对照组子代（P〈0.05）,阳性反应产物平均光密度均低于对照组子代（P〈0.05）。结论大鼠孕期染铝可导致子代鼠脑神经元数量减少,从而导致子代鼠神经发育障碍。

慢性砷中毒对小鼠海马CA1区星形胶质细胞的影响

目的观察慢性砷中毒对成年小鼠海马CA1区星形胶质细胞的影响,探讨慢性砷中毒对成年小鼠脑部的神经毒性。方法选取健康成年昆明小鼠60只,雌雄各半,分为对照组、慢性砷中毒组,每组30只,分别以蒸馏水、1/10 LD50As2O3即As2O34.5 mg·kg-1.d-1灌胃,连续3个月,根据其体重变化随时调整用药剂量。灌胃结束后,采用Y型电迷宫检测各组小鼠学习与记忆的功能,其后取小鼠海马组织,利用免疫组织化学技术检测砷中毒对小鼠海马CA1区胶质原纤维酸性蛋白(GFAP)表达的影响。结果与正常对照组比较,砷中毒组小鼠的学习、记忆能力明显低于对照组(P<0.05);免疫组化染色显示小鼠海马CA1区GFAP阳性细胞明显增多(P<0.05),阳性反应产物平均光密度增高(P<0.05)。结论慢性砷中毒可引起小鼠海马CA1区星形胶质细胞反应性增生。

松树皮原花青素对小鼠脑缺血再灌注损伤的保护作用

目的:探讨松树皮提取物原花青素对缺血再灌注小鼠脑损伤海马神经元的保护作用。方法:120只雄性昆明小鼠随机分成正常对照组、假手术组、14 d模型组、28 d模型组、14 d治疗组、28 d治疗组,采取小鼠双侧颈总动脉结扎缺血15 min,再灌注15 min构建脑缺血再灌注损伤模型,治疗组给予松树皮提取物原花青素灌胃治疗,Morris水迷宫实验观察小鼠学习记忆能力的变化,造模后第14、28天处死小鼠,HE染色法观察小鼠脑组织病理形态学改变,透射电子显微镜观察海马神经元超微结构的改变。结果:Morris水迷宫结果显示模型组小鼠学习记忆能力降低,与模型组相比,治疗组小鼠学习记忆能力有所提升;14 d模型组脑细胞数量较假手术组明显减少,胞浆着色浅,胞核移位,治疗组尼氏体排列欠规律,部分细胞形态不规则,胞浆着色相对较浅,但比模型组好;电镜下,小鼠海马CA3区神经元在14 d模型组损伤严重,神经元胞体水肿、出现核固缩溶解现象,存在细胞器溶解后形成的空泡,线粒体嵴可见有断裂,细胞出现凋亡小体,28 d模型组有所恢复,14 d和28 d治疗组神经元较同期模型组轻。结论:松树皮提取物原花青素对脑缺血再灌注损伤小鼠具有保护作用。

小鼠缺血再灌注损伤后海马齿状回β-catenin、CyclinD1的表达变化

目的:初步探讨Wnt/β-catenin及相关因子在缺血再灌注小鼠海马中的表达规律。方法:将70只1月龄健康雄性昆明小鼠随机分为假手术组、缺血再灌注1 d、3 d、7 d、14 d、21 d、28d组,采用夹闭双侧颈总动脉制作小鼠缺血再灌注脑损伤模型。通过Nissl法观察海马形态结构,免疫组织化学染色方法检测Wnt/β-catenin信号通路重要信号分子β-catenin、CyclinD1的表达变化。结果:正常组海马区神经元形态及分布未见异常;缺血再灌注组随着灌注时间的增加,神经细胞排列紊乱,核固缩,核溶解,颗粒细胞呈空泡样变性,尼氏小体溶解、消失,以14 d组最为严重。正常脑组织中β-catenin、CyclinD1表达均为阴性或弱阳性;缺血再灌注组中β-catenin、CyclinD1阳性表达均显著高于正常组(P<0.05),7～14 d阳性达高峰,二者成正相关关系。结论:初步证实夹闭小鼠双侧颈总动脉的方法成功建立了脑缺血再灌注损伤的动物模型,小鼠脑缺血再灌注损伤可激发Wnt信号通路,同时增加了β-catenin、CyclinD1在海马齿状回颗粒细胞下层的表达,为进一步研究Wnt信号通路在脑缺血再灌注损伤中的作用及其机制奠定了基础。

体外诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的研究进展

骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）具有自我复制和跨胚层多向分化的潜能，可以被诱导分化为神经细胞、骨骼肌细胞、心肌细胞、肝细胞等，同时它的来源方便，易于分离、培养、扩增和纯化，免疫原性弱，免疫耐受性强，体外基因转染率高，并能稳定高效表达外源基因等优点，是目前较为理想的种子细胞，在临床应用方面特别是在治疗中枢神经系统疾病中有着广阔的应用前景。BMSCs用于治疗中枢神经系统疾病的前提是能大量诱导分化为神经细胞，本文就体外诱导骨髓间充质干细胞向神经细胞分化的研究进展作一综述。

高效液相色谱法测定独角莲膏中连翘苷的含量

目的建立用高效液相色谱(HPLC)测定独角莲膏中连翘苷的含量的方法。方法采用HypersilODS2(5.0×200mm)色谱柱,乙腈与水(24:76)的混合液为流动相;流速为1.0 ml/min,柱温为30℃,检测波长227nm。结果连翘苷进样量在0.1424μg^0.712μg时线性良好(r=0.99998),平均回收率为99.22%,RSD为2.16%。结论该方法准确、简便、重现性好、专属性强,可用于该产品中连翘苷含量的测定。

电针与骨髓间充质干细胞移植在脊髓损伤修复及再生中的作用

脊髓损伤（spinal cord injury，SCI）后可引起损伤平面以下感觉运动功能丧失，导致患者日常生活不能自理，给家庭和社会带来极大负担。脊髓损伤后的主要病理变化包括大量的神经细胞死亡，轴突退变，弥漫性脱髓鞘，脊髓空洞及胶质瘢痕形成，胶质瘢痕在脊髓损伤后形成并逐渐加剧，抑制脊髓损伤的修复。这些不可逆的病理过程成为临床治疗脊髓损伤中最棘手的问题。随着干细胞科学的飞速发展，研究发现干细胞移植治疗脊髓损伤具有广阔的应用前景。

室管膜前下区NSC向神经元分化相关因素的作用

NSC（neural stem cells，NSCs）是来源于神经组织的具有增值分化成其他神经组织细胞具有干细胞特性的一类细胞^[1]。室管膜前下区（SVZa）是NSC集聚地，此区NSC产生的神经元祖细胞沿着一非常局限化的通道一吻侧迁移流（RMS）迁移至嗅脑，最后在嗅球分化成特定的γ-氨基丁酸能（GABA）神经元和多巴胺（DA）能神经元^[2-3]。

大鼠脊髓全横断损伤后不同时间的组织改变

目的观察大鼠脊髓全横断损伤后不同时间的神经元、神经胶质及髓鞘结构的改变。方法将60只大鼠随机分为假手术组(sham组)和脊髓损伤组(SCI组),SCI组又分为术后1d、3d、7d、14d、21d组,每组10只。SCI组行脊髓T9段全横断损伤,sham组仅行椎板切除术,分别在各时间点灌注固定后取材、制片,对脊髓损伤后不同时间的神经元、神经胶质及髓鞘进行光电镜观察。结果肉眼观察,假手术组各时间段脊髓外观形态均正常。SCI1d组脊髓断端间隙增大;3d组断端轻度水肿;7d组残端结构形成液化坏死区;14d组横断区残端空洞形成;21d组断端萎缩变细。光镜下:1d组灰质部分神经元尼氏体溶解、消失,白质结构紊乱;3d组灰质神经元水肿,灰白质交界消失,胶质细胞增生;7d组灰白质结构完全破坏,灰质中出现大小不等空泡,大量胶质细胞增生;14d组神经元水肿减轻;21d组部分神经元与胶质细胞形态接近正常。电镜下:1d组部分神经元水肿,线粒体变形空泡化,髓鞘板层出现紊乱;3d组神经元、神经胶质及髓鞘的损伤逐渐加重,胶质细胞体积增大、增多;7d组神经元胞核固缩,核膜破裂、核孔增大,染色质聚集成块,胞质内细胞器崩解,髓鞘变形、扭曲,板层分离,见成堆增生的胶质细胞;14d组神经元、神经胶质及髓鞘的损伤逐渐减轻;21d组神经元核膜、核仁清楚,胞质内细胞器清晰可见。结论脊髓损伤后不同时间的神经元、神经胶质和髓鞘结构随时间变化呈多样性,这种多样性结构改变为临床SCI提供了可靠的实验依据。

Noggin蛋白对D-半乳糖致衰老小鼠学习记忆及海马齿状回神经发生的影响

目的观察侧脑室注射Noggin蛋白后对D-半乳糖致衰老模型小鼠学习记忆行为能力与海马齿状回神经发生的影响。方法采用皮下注射D-半乳糖构建衰老小鼠模型后,连续7 d侧脑室注射Noggin蛋白,对照组同时注射等量生理盐水,造模42 d后对各组小鼠进行Y迷宫学习记忆能力测试,用BrdU标记海马齿状回增殖细胞。结果Y迷宫检测结果表明,模型组小鼠学习记忆能力较正常对照组明显降低(P<0.05),而模型治疗组小鼠学习记忆能力较模型对照组明显改善(P<0.05);模型组与模型对照组小鼠海马齿状回BrdU阳性细胞数较正常对照组减少(P<0.05),而模型治疗组BrdU阳性细胞数较模型组、模型对照组显著增多(P<0.05)。结论侧脑室给予Noggin蛋白可改善衰老模型小鼠的空间学习及记忆能力,可能与Noggin能保护海马神经元并促使齿状回神经干细胞增殖有关。

noggin对帕金森病大鼠黑质神经元的保护作用

目的观察noggin对6-羟基多巴胺(6-OHDA)致帕金森病模型大鼠神经行为的影响及其对黑质神经元的保护作用。方法随机将60只雄性SD大鼠,分为正常对照组、模型组和模型治疗组。采用脑立体定位右侧纹状体内注射6-OHDA构建帕金森病(PD)模型,模型治疗组纹状体内注射noggin,正常对照组与模型组同时给予等量生理盐水,术后7 d于行为检测完毕后行尼氏染色、TH、TUNEL与GFAP免疫组化染色,光镜下观察3组大鼠黑质多巴胺能神经元、凋亡神经元与星形胶质细胞的形态变化并进行计量分析,电镜下观察黑质神经元超微结构变化。结果模型治疗组大鼠的旋转次数较模型组明显改善(P<0.05),TH阳性神经元较模型组增多,凋亡神经元显著减少(P<0.05),GFAP阳性神经元较模型组减少,胞浆内GFAP阳性产物的平均光密度值亦明显降低(P<0.05);TH、TUNEL与GFAP阳性神经元主要位于黑质致密部;电镜下对照组黑质神经元结构清晰,胞核形态规则,核膜光滑、完整,染色质分布均匀;胞浆电子密度中等,细胞器丰富;模型组黑质神经元胞核皱缩,核膜凸凹不整、异染色质减少,胞浆内大量线粒体嵴断裂消失,粗面内质网扩张;模型治疗组黑质神经元细胞核形态规则,部分线粒体肿胀,细胞器丰富。结论noggin可改善PD模型大鼠的行为能力、使凋亡神经元及反应性星形胶质细胞数目减少,这些变化可能与noggin能促进黑质内部分神经元再生有关。