医学院校生物技术专业外语教学探讨

在认真分析医学院校生物技术专业外语教学现状的基础上,结合本校实际,建立了我校基础医学(生物技术方向)专业的专业外语教学体系,并组织教学。

文献阅读研讨课在医学生物物理教学中的应用

文献阅读研讨课是一种以学生为主、教师引导的课堂讨论教学模式,注重学生的学习过程和科研能力培养。在此主要介绍该教学模式的特点及其在医学生物物理学教学过程中的应用,并探索其教学效果的评价方法。

2-型猪链球菌保护性抗原RfeA的B细胞表位预测

以2-型猪链球菌（SS2）保护性抗原RfeA推定的氨基酸序列为基础,采用Kyte-Doolittle法分析蛋白的亲水性,Emini法预测蛋白的表面可能性,以及Jameson-Wolf法预测蛋白的抗原指数;辅以Garnier-Robson法、Chou-Fasman法和Karplus-Schulz法对蛋白二级结构中柔性区域的分析,预测SS2保护性抗原RfeA的B细胞表位。结果表明,推测RfeA的B细胞表位位于RfeA蛋白N-端第21~27、53-60、104~117、140~160区域。用多参数预测SS2保护性抗原RfeA的B细胞表位,为实验研究SS2的多表位疫苗奠定基础。

肝癌细胞对树突状细胞白介素-12表达的影响

目的研究肝癌细胞(hepatocellular carcinoma cells,HCCs)微环境对树突状细胞(dendritic cells,DCs)的白介素-12(interleukin-12,IL-12)表达的影响,以进一步理解肿瘤的免疫逃逸机制。方法免疫磁珠法从人外周血分离CD14+单核细胞,加入rhGM-CSF和rhIL-4将单核细胞诱导分化为imDCs,利用rhTNF-α将imDCs诱导为mDCs,imDCs和mDCs与HCCs在Transwell中共培养48h,ELISA法分别检测不同培养条件下上清液中IL-10、IL-12、转化生长因子β1(trasnformed growth factor-β1,TGF-β1)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)的表达量。结果与HCCs共培养后,imDCs和mDCs的IL-12的表达量分别从(115.076±8.129)pg/ml和(258.346±3.609)pg/ml下调至(17.599±1.757)pg/ml和(6.787±1.123)pg/ml(P<0.05,P<0.01),而且培养上清中的TGF-β1浓度分别从(133.172±3.053)pg/ml和(174.446±3.972)pg/ml上调至(633.025±9.527)pg/ml和(486.806±10.515)pg/ml(P<0.05,P<0.01),VEGF的浓度分别从0pg/ml上调至(830.892±7.564)pg/ml和(858.169±5.419)pg/ml(P<0.01)。结论 HCCs可抑制DCs的IL-12的表达,这可能是HCCs损伤DCs免疫调节功能的方式之一。

2型猪链球菌溶血素及其抗血清的免疫保护活性研究

目的探讨2型猪链球菌(SS2)溶血素(SLY)及其抗血清的免疫保护活性。方法以纯化的SLY重组蛋白作为免疫原免疫小鼠,收集抗血清,测定抗血清的效价及其中的IgG亚型,用致死剂量的SS2强毒株攻击小鼠,评价SLY的免疫保护活性。制备SLY抗血清并以其被动免疫小鼠,4h后用致死剂量的SS2强毒株攻击小鼠,评价抗血清的保护作用。结果用重组蛋白SLY免疫小鼠后收集抗血清,效价为1∶25 600,含IgG1和IgG2a两种亚型抗体,但IgG1与IgG2a的含量差异不显著。用致死剂量的SS2强毒株攻击小鼠14d后,SLY主动免疫组小鼠的存活率(60%)明显高于对照组(10%,P<0.05);SLY抗血清被动免疫组小鼠在SS2强毒株攻击7d后的存活率(90%)明显高于对照组(20%,P<0.05),攻击后14d,抗血清被动免疫组存活率(40%)与对照组(20%)差异不显著(P>0.05)。结论 SLY及其抗血清具有免疫保护活性。

2-型猪链球菌分泌性保护性抗原RfeA的确认

目的确认RTX家族胞外蛋白A(RTX family exoprotein A,RfeA)为2-型猪链球菌(Streptococcus suis serotype 2,SS2)的分泌蛋白。方法通过生物信息学软件分析RfeA的氨基酸序列,预测RfeA在SS2中的分布;以纯化的RfeA重组蛋白为免疫原免疫小鼠,制备RfeA鼠多抗血清,间接ELISA检测抗血清效价;以制备的RfeA抗血清为一抗,利用ELISA方法分析RfeA在05ZYH33株培养上清中的分布,通过实验证实生物信息学预测的结果。结果生物信息学软件分析RfeA氨基酸序列,预测RfeA为SS2分泌性蛋白;ELISA方法分析发现RfeA存在于05ZYH33株培养上清中,是SS2分泌性蛋白。结论实验研究结果与生物信息学预测一致,RfeA为SS2分泌性蛋白的确定为进一步研究RfeA的功能以及在SS2致病过程中扮演的角色奠定了基础。

2-型猪链球菌谷氨酸脱氢酶的表达和免疫学活性研究

目的表达2-型猪链球菌(Streptococcus suis serotype 2,SS2)的谷氨酸脱氢酶(glutamatedehydrogenase,GDH),研究其免疫学活性,探讨其作为疫苗候选分子的可能性。方法用聚合酶链反应(PCR)技术从SS2临床分离株05ZYH33的基因组DNA中扩增出gdh基因片段,插入表达载体pET-30b(+)中,构建重组表达载体pET30b-gdh。该载体经酶切鉴定和DNA测序鉴定后,转化E.coli Rosetta,IPTG诱导表达,镍离子亲和层析纯化重组蛋白。蛋白免疫印迹(western blot)证实目的蛋白的分子量和免疫反应原性。重组蛋白免疫小鼠后收集多抗血清,间接原位末端标记法(ELISA)检测其效价。结果 PCR扩增的gdh基因长度约为1300碱基对(bp),所构建重组表达载体酶切鉴定无误、测序证实碱基序列100%正确且保持正确读框。IPTG诱导表达,目的蛋白表达量约占菌体总蛋白的14.2%。亲和层析获得目的蛋白,纯度达80%以上。Western blot检测证实该蛋白能与感染SS2的患者血清发生阳性反应。重组蛋白免疫小鼠后血清效价达1∶25600以上。结论成功构建了表达载体pET30b-gdh,可在工程菌E.coli Rosetta中表达;表达蛋白具有良好的免疫学活性。