宫内死亡胎儿法医学鉴定10例分析

胎儿宫内死亡是指孕期超过20周,或胎儿重量大于500g在宫腔内死亡,可发生于产前或分娩过程中[1]。据相关文献报道[2-4],宫内死胎占围产儿死亡病例的50%-60%,高居首位,对母亲及家庭均造成极大影响。为了有效降低宫内胎儿死亡率,明确胎儿宫内死亡的原因非常重要,尸体检验为一种行之有效的方法。

大头金蝇卵不同发育时间形态变化及基因表达差异研究

目的 研究大头金蝇（Chrysomya megacephala）卵不同发育时间的形态变化和基因表达差异规律。方法 从大头金蝇成虫产完卵后,取出卵块,记时为0 h,每隔2 h取卵10枚,直至有幼虫孵出,分别用体视显微镜和扫描电镜观察其不同发育时间的形态学变化。提取0、2、4、6和8 h等5个发育时间点的蝇卵RNA,应用RT-PCR比较循环阈值（threshold cycle,CT值）法测定bicoid、slalom和几丁质合成酶（chitin synthase）基因相对表达水平,SPSS19.0统计学软件对CT值及时间进行拟合直线方程、等比级数曲线方程和指数方程分析。结果 体视显微镜下观察,大头金蝇卵产后0～4h形态学变化不明显,6h有体节形成,8 h开始出现皱缩,9 h有幼虫孵出;扫描电镜下观察,卵产后0～4 h时变化不明显,卵孔一端略向外突出,卵孔周围光滑,6 h后卵孔一端向内凹陷,卵孔周围有不规则突起形成,8 h时凹陷明显,9 h已发育为幼虫。大头金蝇卵在不同发育时间bicoid、slalom和chitin synthase等3个基因的相对表达水平随着时间变化呈一定的规律变化,相关回归方程式3个基因CT值的差异均有统计学意义（P〈0.05）。结论 体视显微镜和扫描电镜下大头金蝇卵形态结构随时间改变而发生变化。大头金蝇卵不同发育时间的bicoid、slalom和chitin synthase基因表达水平有差异。

贵阳地区常见尸食性蝇类mtDNA分子标记的检测

目的应用mt DNA中COI（348bp）、COII（637bp）及16Sr DNA（513bp）基因序列鉴定贵阳地区常见尸食性蝇类的种属。方法收集贵阳地区常见尸食性蝇类标本,经形态学分类鉴定后提取胸肌DNA,扩增COI（348bp）、COII（637bp）及16Sr DNA（513bp）基因片段,测序后用DNAMAN 4.0序列分析软件进行序列拼接,NCBI中的BLAST、MEGA 5.2软件包对所得序列分析建立种内及种间进化分歧率,并构建系统发育树。结果 COI种间平均进化分歧率为12.55%,种间范围在3.0%-18.6%,种内范围在0%-0.7%;COII种间平均进化分歧率为13.73%,种间范围在5.3%-21.6%,种内范围在0%-0.6%;16Sr DNA种间平均进化分歧率为4.54%,种间范围在0.4%-7.6%,种内范围在0%-0.4%。结论 COI、COII及16Sr DNA可用于尸食性蝇类的种属鉴定,该方法可作为传统分类方法的补充手段。

巨尾阿丽蝇卵不同发育时间形态变化及基因表达

目的探讨巨尾阿丽蝇（Aldrichina grahami）卵不同发育时间的形态变化与基因表达差异规律。方法从巨尾阿丽蝇成虫产完卵开始记为0 h,每隔4 h取1次卵,直至幼虫孵出,用扫描电镜观察不同发育时期形态学变化特点;提取0、4、8、12、16 h的蝇卵RNA,应用Real-time PCR比较循环阈值（CT值）法测定bicoid、slalom、几丁质合成酶（chitin synthase）基因相对表达量,用SPSS 19.0软件对CT值及时间进行曲线拟合。结果扫描电镜结果显示,发育0～4 h时,巨尾阿丽蝇卵变化不明显,卵孔周围有突起,8 h卵孔周围变光滑,卵孔可见,12 h卵孔消失,周围皱缩,16 h卵孔周围皱缩明显,18 h发育为幼虫;RT-PCR结果显示,bicoid基因在发育0～8 h表达变化不明显、12h表达水平最高,CT值为（4.19±0.04）;slalom基因4 h表达水平最低、12 h表达最高,CT值分别为（4.05±0.01）、（6.20±0.03）;chitin synthase基因8 h表达量最高、12 h最低,CT值分别为（5.80±0.01）、（4.38±0.02）;不同发育阶段各基因CT值不同,差异均有统计学意义（均P〈0.05）。结论巨尾阿丽蝇卵形态结构随发育时间而发生变化,不同发育时期bicoid、slalom、chitin synthase基因表达量存在差异。