抓“教学质量月”活动，促医学院校办学水平

医学院校可以通过开展“本科教学质量月”系列活动，强化全校师生的“质量立校”意识，促进医学院校教学工作的科学化、规范化、标准化，全面提高教学质量。

判断乳癌预后的生化指标

乳癌是妇女常见的恶性肿瘤,一旦确诊,其预后就成为医生与患者所关注的首要问题。传统的预后指标主要是组织学的变化,如肿瘤大小、级别、腋下淋巴结状态以及患者年龄等,存在一定的局限性。近年,随着各种生化技术和检测手段的发展,已有许多新的乳癌预后的生化指标相继报道,其中包括蛋白酶,类固醇激素受体,生长因子受体,活化原癌基因。本文综述了这些生化指标在乳癌预后中的应用。一、蛋白酶来自动物癌肿的大量证据表明,某些蛋白酶与癌肿的浸润和转移有关,与这些过程有关的蛋白酶包括纤溶酶原激活剂,组织蛋白酶 D(cathD)和胶原酶 IV。如果蛋白酶也与人类癌肿的转移有关,那么,它们在这些肿瘤中的量可能决定其转移能力。初步结果表明,至少两种蛋白酶的高浓度与乳癌的不良预后有关。其中一个是纤溶酶原激活剂中的尿激酶,

基础生化实验与临床实际运用的教学改革初探

基础生物化学实验是一门以实验为主的学科,以实验技能培训为主要目的。当前医学院校基础生化实验教学中问题比较突出。本文结合我校的实际情况,对当前生化实验教学中的问题进行梳理,并提出相关对策。

散发性乳腺癌患者血浆BRCA1基因启动子异常甲基化的检测

目的:探讨散发性乳腺癌组织及外周血浆中BRCA1基因启动子异常甲基化状况及其在散发性乳腺癌诊断中的价值。方法:用甲基化特异PCR方法对散发性乳腺癌患者癌组织、癌旁组织及相应血浆进行BRCA1异常甲基化检测。结果:93例散发性乳腺癌组织中,BRCA1基因启动子异常甲基化率为29%(27/93),相应血浆中BRCA1的甲基化检出率为24.7%(23/93),而癌旁组织、正常对照血浆未检出甲基化,只检出未甲基化的BRCA1。血浆中甲基化改变与肿瘤组织甲基化状况显著相关(P<0.05);BRCA1异常甲基化与髓样癌和粘液腺癌的组织分型显著相关(P<0.05),也与肿瘤淋巴结转移显著相关(P<0.005);但与散发性乳腺癌患者年龄(绝经与否)及肿瘤分级无显著的相关性(P>0.05)。结论:血浆BRCA1基因异常甲基化改变的检测在散发性乳腺癌的特异诊断、组织分型和淋巴结恶性转移等方面有一定的应用价值。

地塞米松对大鼠心肌缺血再灌注后细胞凋亡及金属硫蛋白表达的影响

目的观察地塞米松预处理对大鼠心肌缺血再灌注损伤的影响并探讨其作用机制。方法32只SD大鼠随机分成地塞米松组(16只)和对照组(16只),分别给予地塞米松(0.8mg/kg)和蒸馏水腹腔注射。预处理24h后,构建体外心脏缺血再灌注动物模型,动态观测缺血前期及再灌注期左心室发展压(LVDP)、左心室压力最大上升和下降速率(±dp/dtmax)、冠状动脉流出量(CF);测定冠状动脉流出液肌酸激酶同工酶(CK-MB)的漏出率;TUNEL法检测心肌细胞凋亡;Westernblot法检测金属硫蛋白(MT)、Bcl-2及Bcl-xl蛋白的表达;免疫组织化学法测定半胱天冬酶-3(caspase-3)的水平。结果与对照组比较,地塞米松组大鼠再灌注期LVDP、±dp/dtmax及CF得到改善(P<0.05);CK-MB的漏出率明显降低[(8.69±4.16)U/gvs(18.15±5.59)U/g,P<0.01];心肌细胞凋亡指数(10.18±1.99)%vs(14.66±2.97)%和caspase-3水平明显减少[(18.66±5.15)%vs(27.93±6.23)%,P<0.01],Bcl-xl(4.74±0.66)vs(1.69±0.73)和MT的表达明显增加[(3.09±1.07)vs(1.03±0.02),P<0.05],Bcl-2无明显变化(P>0.05)。结论地塞米松预处理对大鼠缺血再灌注的心肌具有保护作用,上调MT表达及抑制细胞凋亡可能是其机制之一。

BRCA1基因启动子异常甲基化与散发性乳腺癌的关系

目的探讨散发性乳腺癌BRCA1基因启动子异常甲基化状况及其与散发性乳腺癌关系。方法用甲基化特异PCR(MSP)法对散发性乳腺癌病人癌组织、癌旁组织及乳腺纤维腺瘤组织进行BRCA1异常甲基化检测。结果在58例散发性乳腺癌中有17例癌组织检出了BRCA1基因启动子异常甲基化,甲基化频率为29.3%(17/58),相应的癌旁组织及乳腺纤维腺瘤组织均只检出未甲基化的BRCA1。在组织分型中,浸润性导管癌与浸润性小叶癌无显著差异(P>0.05),二者各自与髓样癌+黏液腺癌有显著差异(P<0.05)。有淋巴结转移的BRCA1基因启动子甲基化率高于无淋巴结转移组(P<0.005)。BRCA1甲基化与散发性乳腺癌的肿瘤分级及病人绝经与否均无显著差异(P>0.05)。结论在散发性乳腺癌中,BRCA1基因启动子具有很高的甲基化率,并与散发性乳腺癌的组织分型、恶性转移等方面有一定的关系。

诱导金属硫蛋白表达对大鼠体外心脏再灌注性心律失常的影响

目的探讨金属硫蛋白表达对大鼠体外心脏再灌注性心律失常的影响。方法将32只SD大鼠随机分成实验组、对照组,每组16只。Western blot法检测金属硫蛋白的表达;测定心肌丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化酶(GSH-Px)水平,心肌细胞膜Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性及冠状动脉流出液肌酸激酶同工酶(CK-MB)的漏出率。结果与对照组比较,实验组金属硫蛋白的表达增加;心室颤动及室性心动过速持续时间缩短,心律失常的积分减少;MDA降低,SOD、CAT、GSH-Px升高;Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶增加,CK-MB的漏出率减少(P<0.01)。结论金属硫蛋白表达增加可减少大鼠再灌注性心律失常,其机制可能与金属硫蛋白稳定细胞膜、抑制脂质过氧化及钙超载有关。

地塞米松预处理减轻大鼠再灌注性心律失常的实验研究

目的:探讨地塞米松预处理对大鼠再灌注性心律失常的作用及机制。方法:SD大鼠随机分成地塞米松组、对照组,分别予地塞米松和生理盐水预处理。预处理后构建缺血再灌注损伤动物模型,观察再灌注期间心律失常的发生;Western blotting法和免疫组化法观察心肌HSP72表达变化;测定心肌MDA、SOD、CAT、GSH-Px水平及心肌细胞膜Na+-K+-ATP酶、Ca2+-Mg2+-ATP酶活性。结果:与对照组相比,地塞米松组室性心律失常的积分减少(P<0.01)、持续时间缩短(P<0.05);HSP72的表达增加(P<0.05);MDA降低(P<0.01),SOD、CAT、GSH-Px均升高(P<0.05);Na+-K+-ATP酶增加(P<0.01),Ca2+-Mg2+-ATP酶无明显变化(P>0.05)。结论:地塞米松预处理减少再灌注室性心律失常,其机制可能与其上调HSP72、Na+-K+-ATP酶、抗氧化酶的表达及抑制脂质过氧化反应有关。

人抑癌因子在荷癌小鼠体内抑癌活性的观察

从人癌性胸腹水中提取出抑癌因子．注射入腹水型肝癌和S180小鼠腹腔内．以观察其对活体的抑癌活性。结果：人抑癌因子可使癌鼠的腹水量和癌细胞数明显减少。表明人抑癌因子在荷癌小鼠活体内也有较强的抑制癌细胞生长的作用。

一种新的全酶法测定1,5-脱水葡萄糖醇

目的建立一种测定血清中1,5-脱水葡萄糖醇(1,5-AG)的方法,辅助诊断糖尿病.方法经葡萄糖激酶(GK)和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PD)偶联系统使血清中葡萄糖彻底转化为不与呋喃糖氧化酶(PROD)反应的6-磷酸葡萄糖酸内酯,以PROD氧化1,5-AG,生成1,5-脱水果糖和H2O2,后者用Trinders反应进行比色测定.结果该方法在550 μmol/L以内线性良好.高值(455.5 μmol/L)、中值(215.8 μmol/L)和低值(15.1 μmol/L)批内变异系数(CV)分别为0.61%、0.84%和1.70%,批间CV分别为1.12%、2.00%和2.70%.平均回收率为101.6%.本法与微柱法相关性良好(r=0.999 8).用本法对100名健康者测定1,5-AG水平为(161.9±40.2) μmol/L,呈正态分布.参考值范围((-x)±1.96s)为83.1～240.7 μmol/L,无性别、年龄差异.结论该法简便、快速、灵敏、准确和稳定,可用于糖尿病的及时诊断与监控,适合于各类实验室常规应用.

蕨粉的实验研究 Ⅱ.蕨粉的其他药效学

用蕨粉喂养大鼠１２月后进行血液生化测定，高剂量组动物的甘油三酯含量下降（Ｐ＜００５），低剂量和高剂量组血浆过氧化脂质（ＬＰＯ）含量也显著下降（Ｐ＜００５），而红细胞超氧化物歧化酶（ＳＯＤ）值有所升高，其升高率分别为５９９％及１０７５％。另外，用蕨粉糊状液给小鼠灌服，能使饥饿小鼠肝糖原含量增加，而对饥饿小鼠的血糖无明显影响；灌肠蕨粉糊状液还能促进幼年小鼠的生长发育，表现为体重增加以及胸腺、脾脏、肾上腺组织重量显著增加（Ｐ＜００５）。

苗药方四大血对佐剂性类风湿关节炎大鼠TNF-α及IL-1β表达的影响

目的:研究苗药方四大血对佐剂型类风湿关节炎大鼠(AA)的作用及其机制。方法:建立类风湿性关节炎的动物模型——AA;将大鼠分成空白对照组及AA模型对照组(均采用生理盐水灌胃治疗)、四大血高、中、低剂量治疗组(生药浓度:40 g/kg、20 g/kg、10 g/kg)和阳性治疗对照组(40 mg/kg雷公藤多甙片)。观察各组大鼠左、右足跖外观变化,测量各组原发侧足跖肿胀度,ELISA检测各组血清中炎性因子白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达水平。结果:与AA模型对照组相比,四大血高、中剂量治疗组及阳性治疗对照组大鼠足肿消散;与AA模型对照组比较,四大血下调了IL-1β、TNF-α的表达。结论:四大血能拮抗AA病情发展,其机制可能其与下调相关炎性因子表达有关。

耳针、中药对糖尿病大鼠CGRP、ET、TXB_2及6-Keto-PGF_(1α)影响的实验研究

目的:研究耳针、中药对糖尿病大鼠血浆降钙素基因相关肽(Calcitonin gene relatedpeptide,CGRP)、内皮素(Endothelin,ET)、血栓素B_2(Thromboxand B_2,TXB_2)及6-酮-前列腺素F_(1α)(6-Keto-PGF_(1α))等的影响。方法:利用链脲佐菌素(STZ)诱发的糖尿病大鼠接受耳针、中药治疗14周后,放免法测定血浆CGRP、ET、TXB_2及6-Keto-PGF_(1α)等指标。结果:与正常组相比糖尿病大鼠血浆CGRP、ET及TXB_2水平明显升高,6-Keto-PGF_(1α)水平稍有降低,E/C及T/P明显升高,而耳针、中药治疗后均明显改善。提示:耳针、中药防治糖尿病微血管病变的一种可能机制是良性调整血浆ET与CGRP及TXB_2与6-Keto-PGF_(1α)水平。

散发性乳腺癌中BRCAl基因甲基化状况及其与蛋白表达的关系

目的探讨散发性乳腺癌中BRCA l基因异常甲基化状况及其与蛋白表达的关系,进而研究散发性乳腺癌中BRCA l基因异常的表遗传学作用。方法用甲基特异性聚合酶链反应(PCR)和免疫组织化学(SP)法研究乳腺癌组织、癌旁正常组织中BRCA l基因启动子甲基化状况及蛋白表达情况。结果在52例散发性乳腺癌中,BRCA l甲基化率为29%,BRCA l蛋白表达下降率为33%;15例BRCA l发生甲基化的癌组织标本中BRCA l的表达下降率为87%,而37例BRCA l未发生甲基化的癌组织中BRCA l蛋白表达下降率11%。在肿瘤分级中,T3分级患者的肿瘤组织中BRCA l甲基化率(45%)及表达下降率(60%)均分别高于T1+T2分级患者肿瘤组织的BRCA l甲基化率(19%)和表达下降率(16%);有淋巴结转移患者的肿瘤组织中BRCA l甲基化率(46%)及蛋白表达下降率(50%)均分别高于无淋巴结转移的甲基化率(14%)和表达下降率(18%)。结论BRCA l基因表遗传学改变是其蛋白表达下降乃至失活的重要原因,并且与散发性乳腺癌的恶性进程和淋巴结转移密切相关。

不同剂量的地塞米松对大鼠缺血再灌注心肌细胞凋亡及核因子кB表达的影响

目的探讨不同剂量地塞米松预处理对大鼠缺血再灌注(I/R)心肌细胞凋亡及NF-κB表达的影响。方法 64只SD大鼠,随机分为大剂量组、中剂量组、小剂量组及对照组,每组1 6只,分别予2.5、0.8和0.4 mg/kg的地塞米松及蒸馏水预处理。预处理24 h后,构建体外心脏I/R模型,观测缺血前期及再灌注期左心室发展压(LVDP)、左心室压力最大上升和下降速率(±dp/dt_(max))、冠状动脉流出量(CF);测冠状动脉流出液肌酸磷酸激酶同工酶(CK MB)漏出率;TUNEL法检测心肌细胞凋亡;免疫组织化学法检测NF-κB活化水平。结果与对照组比较,大、中剂量组LVDP、±dp/dt_(max)及CF明显改善(P<0.05),CK-MB漏出率明显降低(P<0.05),心肌细胞凋亡指数及NF-κB表达明显减少(P<0.01);小剂量组上述指标虽有改善,但差异无统计学意义(P>0.05)。结论地塞米松预处理对大鼠I/R的心肌保护作用可能与抑制NF-κB活性,减少心肌细胞凋亡有关,且有一定的剂量依赖性。

人和小鼠抑癌因子的氨基酸组成分析

用System6300（BakmanU．S.A）氨基酸自动分析仪，对四种人癌的抑癌因子和小鼠肉瘤180抑癌因子进行了氨基酸组成分析。结果显示：四种人癌抑癌因子的氨基酸残基数均约100；小鼠肉瘤180抑癌因子氨基酸残基总数约34，人与小鼠抑癌因子都含较多的Pro、Asp、Glu、Lys。这提示人与小鼠抑癌因子的氨基酸残基数既有明显的种属差异，但两者又具有共同的氨基酸组成特点，这可能是维持抑癌因子的构象及其抑癌活性所必需的。

地塞米松诱导热休克蛋白72减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤

目的探讨地塞米松预处理诱导SD大鼠心肌热休克蛋白72(HSP72)表达对大鼠心肌缺血再灌注损伤的作用。方法将SD大鼠予地塞米松预处理,生理盐水预处理设为对照。预处理后构建缺血再灌注损伤动物模型。Westernblot法观察HSP72表达;动态观测缺血前及再灌注期间心功能、心律失常的变化;测定心肌梗塞面积及冠状动脉流出液肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)的总量。结果与对照组相比,地塞米松预处理诱导大鼠心肌HSP72的表达显著增加(P<0.05);改善再灌注期间心功能(P<0.01);减少室性心律失常的积分(P<0.01);缩小心肌梗塞面积(P<0.01);降低冠状动脉流出液CK-MB的总量(P<0.05)。结论地塞米松作为新型HSP72诱导剂,上调HSP72表达,可减轻大鼠心肌缺血再灌注损伤。

基于ITS区和AFLP的吴茱萸分子鉴定方法(英文)

吴茱萸作为一种重要的中药具有不同的变种,疏毛吴茱萸和石虎。AFLP技术和ITS区测序技术被用于鉴定14株吴茱萸、疏毛吴茱萸和石虎样品。ITS测序发现吴茱萸及其变种具有高度相似性,一致性达97%。在吴茱萸与其变种之间发现有一个SNP位点差异。扩增性片段长度多态性在它们之间具有差异条带。根据上述结果,分子鉴定方法能够用于鉴别吴茱萸及其变种。

贵州省汉族人群载脂蛋白M启动子T-778C基因多态性与冠心病的相关性研究

目的:探讨贵州省汉族人群载脂蛋白M(apoM)基因启动子区域-778位点T→C置换与冠心病的关系。方法:用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)对220例冠心病患者和195例健康对照者的apoM启动子-778位点进行基因筛查。结果:冠心病病例组中apoM启动子基因-778位点C等位基因的频率显著高于健康对照组(19.1%和12.6%,P=0.011)。结论:apoM启动子基因-778位点携带C等位基因可能是冠心病的一个危险的遗传易感因子。