PEITC诱导人AML-M2白血病细胞凋亡机制的初步探讨

目的证实苯乙基异硫氰酸酯(phenethyl isothiocyanate,PEITC)诱导人急性髓系白血病(AML)M2白血病细胞系Kasumi-1细胞凋亡的效应,初步探讨PEITC诱导Kasumi-1细胞凋亡的机制。方法培养人M2白血病细胞株Kasumi-1细胞,CCK-8法检测不同浓度PEITC处理后Kasumi-1细胞的增殖抑制率;流式细胞术检测药物诱导细胞凋亡和活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成的情况;Real-time PCR及Western blot检测HO-1以及凋亡相关基因caspase3、caspase8、caspase9mRNA及蛋白水平的变化。结果 CCK-8结果显示PEITC作用Kasumi-1细胞24h、48h、72h后,细胞增殖抑制率呈现浓度-时间依赖性。流式细胞术显示PEITC能够诱导Kasumi-1细胞的凋亡。Real-time PCR及Western blot结果显示PEITC处理细胞后,HO-1表达下降,而凋亡相关基因Caspase3、Caspase8、Caspase9的表达上调。DCFH-DA探针法显示PEITC作用Kasumi-1细胞后,ROS生成增多。结论 PEITC能够促进Kasumi-1细胞凋亡,呈时间剂量梯度依赖关系;PEITC诱导Kasumi-1细胞凋亡可能通过的机制包括下调HO-1表达促进ROS生成及凋亡相关基因Caspase3、Caspase8、Caspase9的激活。

载脂蛋白M启动子基因多态性及其表达与冠心病的关系

目的:探讨载脂蛋白M(ApoM)基因启动子-778bp位点C→T置换与血浆ApoM含量及冠心病(CHD)的相关性。方法:PCR扩增ApoM基因启动子-1316^+73bp DNA片段,限制性内切酶RsaI酶切PCR产物,2%琼脂糖凝胶电泳分离酶切后的DNA,确定其基因型。并用Western blot技术检测血浆ApoM水平。结果:共检测CHD组患者220例,健康对照组195例。CHD患者组中ApoM启动子基因-778位点C等位基因的频率显著高于对照组。两组间携带CT+CC基因型人群的血浆Apo M水平显著低于TT基因型。结论:ApoM启动子-778T/C基因多态性与血浆TC、HDL和LDL具有相关性。ApoM-778C等位基因可能为CHD的危险因素。

烧伤渗出期血清乳酸脱氢酶同功酶图谱的变化

本文报道36例烧伤面积15%～97%病人渗出期血清乳酸脱氢酶(LDH)同功酶的特点。结果:LDH_1>LDH_2、LDH_5活性增高,并且死亡和大面积组病人LDH_1>LDH_2出现的机率增加。认为观察LDH同功酶的变化有助于对心、肝脏损害的监护和病情及预后的判断。

癌基因p21^(ras)、raf和细胞外信号调节蛋白激酶参与刺激Jurkat细胞产生TNF-β和IL-2

目的 明确p2 1ras 细胞外信号调节蛋白激酶 (theextracellularsignal regulatedproteinki nase,ERK)系列是否参与调节Jurkat细胞产生TNF β和IL 2。方法 用负向突变基因p2 1ras(ras17N或ras15A) ,raf 1(raf1～ 130 )及ERK1(erk1K71R)或活性结构p2 1ras(H ras6 1L)和raf(raf2 2W)转染细胞 ,以PMA PHA刺激细胞 ,ELISA法检测细胞因子。结果 PMA PHA刺激细胞产生较正常对照细胞约 2倍的TNF β和IL 2 (P <0 .0 0 1)。负向突变基因去除了PMA PHA增加细胞因子分泌的作用。活性突变基因本身不影响TNF β和IL 2产生 ,但明显增强细胞对PMA PHA的应答 (P <0 .0 5 )。结论 p2 1ras ERK系列在调节Jurkat细胞在PMA PHA刺激下产生TNF β和IL 2中起重要的作用。