贵阳地区哮喘儿童IL-4-590C/T、IL-13-1112C/T、IL-4RαQ576R基因多态性分析

目的:探讨贵阳地区哮喘儿童IL-4基因-590C/T、IL-13基因-1112C/T及IL-4受体(IL-4R)基因α链Q576R位点的单核苷酸多态性(SNPs)。方法:收集2010年9月至2012年2月贵阳医学院附属医院儿科哮喘门诊随机诊治的及2010年第三次全国哮喘流行病学调查的共300例贵阳地区哮喘儿童,男189例,女111例,同时收集200例贵阳地区非哮喘及非过敏性疾病儿童作为对照,男136例,女64例。应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性(PCR-RFLP)方法检测哮喘组儿童和对照组儿童IL-4-590C/T、IL-13-1112C/T及IL-4RαQ576R位点的多态性。结果:IL-4-590C/T、IL-13-1112C/T及IL-4RαQ576R位点的基因型频率及等位基因频率在哮喘组和对照组间的差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:IL-4基因-590C/T、IL-13基因-1112C/T及IL-4R基因α链Q576R位点的多态性可能与贵阳地区儿童哮喘有一定相关性。

2000年贵阳市3～14岁儿童哮喘患病情况调查及分析

目的 了解贵阳市两城区 3a以上儿童哮喘患病率。方法 用随机抽样 ,回顾性询问填表法对贵阳市两城区10 2 85名 3～ 14a儿童进行哮喘发病情况的调查。结果 总患病率为 2 39%、男孩患病率为 2 85 %、女孩患病率为 1 92 % ,两者有显著差异。好发于冬、春季节 ,发病诱因主要有呼吸道感染及气候变化、运动。 6 3 5 2 %有个人过敏史 ,治疗中有 97 5 8%应用抗生素 ,有 72 5 1%使用全身激素 ,使用吸入激素治疗的仅为 3 6 6 %。结论 贵阳市 3～ 14a儿童哮喘患病率较 10年前明显增高 ,与多种原因有关 ,应加强对儿童哮喘的防治 。

儿科护理工作的风险意识和护理纠纷的预防

随着我国医疗制度改革的不断深化,人们自我保护意识和法律意识不断增强,越来越多的人开始意识到在就医过程中维护自身的权益,使整个医疗行业呈现高风险态势,而儿科护理的风险性尤其突出,因此儿科护士在工作中应建立起较强的风险意识和法律意识,提高预见问题的能力,避免护理纠纷的发生。

反复呼吸道感染患儿血清免疫球蛋白、IgG亚类及细胞免疫水平

目的探讨反复呼吸道感染(RRTI)与免疫球蛋白、IgG亚类及细胞免疫的关系,为临床治疗反复呼吸道感染提供一定的理论依据。方法RRTI患儿28例,男18例,女10例,平均年龄(3.70±1.44)岁;对照组30例,男15例,女15例,平均年龄(3.98±1.18)岁。采用免疫散射比浊法检测血清IgG﹑IgA、IgM及IgG亚类水平;采用流式细胞术检测CD3、CD4、CD8、CD19及CD16+56的表达。结果RRTI患儿血清IgG﹑IgA水平与对照组相比差异均无统计学意义(P均>0.05);IgM水平低于对照组(Z=3.149,P<0.01);RRTI患儿血清IgG2和IgG4水平较对照组明显降低(t=2.107,Z=2.916;P均<0.05);RRTI患儿淋巴细胞CD3﹑CD4较对照组明显降低(t=2.319,2.44,P均<0.05),余CD分子与对照组相比差异无统计学意义(P均>0.05)。结论RRTI患儿存在一定程度的体液免疫和(或)细胞免疫功能紊乱;对RRTI患儿同时检测总IgG、IgG亚类及细胞免疫功能具有重要的临床意义。

4种肺动脉高压动物模型肺血管重构模式的差异研究

目的:探讨4种肺动脉高压(PH)动物模型肺血管重构模式的差异。方法:雄性SD大鼠(350-400g),分别通过腹主动脉-腔静脉分流(A-VF,n=10)、左肺切除(PE,n=10)、野百合碱注射(MCT,n=10)、左肺切除+MCT(PE+MCT,n=12)4种方法建立PH模型。检测平均肺动脉压力(mPAP)、RV/(LV+S)重量比值、肺小动脉中膜厚度百分比(WT%)、无肌性动脉肌化程度和新生内膜(neointima)形成、新生内膜增殖度和血管阻塞计分(VOS)。结果:在PE+MCT组(肺切除术后5周,MCT注射后4周)右肺腺泡内血管出现了新生内膜病变,其它组均没有新生内膜病变形成。PE+MCT组的动物出现了严重的右心室肥大,动脉中膜明显增厚,平均肺动脉压(mPAP)和无肌性血管肌化程度显著增加;A-VF、PE和MCT组仅形成轻-中度的右心室肥大、mPAP升高和小动脉肌化。结论:左肺切除联合应用MCT能成功诱导大鼠PH新生内膜模型,该模型能更好地模拟人类严重PH的病理改变,是研究梗阻性PH更为适用的动物模型。

骨髓间充质干细胞治疗实验性肺动脉高压后肺组织结构的变化

目的:探讨骨髓间充质干细胞(MMSCs)移植治疗肺动脉高压(PAH)后肺组织超微结构的变化。方法:取SD大鼠的骨髓,经贴壁筛选法体外培养并纯化MMSCs,用Hoechst33342荧光染料标记。实验动物随机分为3组:MMSCs移植治疗组(M组)、肺动脉高压模型组(H组)和正常对照组(C组)。M组采用野百合碱(50mg·kg-1)注射复制PAH模型成功后3周经舌下静脉移植5×109cells/LMMSCs细胞悬液1mL;H组复制PAH模型后3周移植1mLL-DMEM细胞培养液,C组在同时间注射等量L-DMEM液。饲养4周,观察各组动物一般情况、生存率、右心室收缩压、右心指数及肺小动脉的微观结构和超微结构的改变。结果:实验动物移植MMSCs后,生存状况明显改善,食欲及活动增加,毛色顺滑、光亮,动物存活率为100%;而模型组动物活动明显减少、食欲下降,消瘦,体重下降或不增,在1月内相继死亡,死亡率为100%。各项指标检测结果显示,MMSCs移植组(M组)大鼠较单纯肺动脉高压组(H组)右心室收缩压明显降低[移植组为(32.20±2.32)mmHg,而模型组为(48.30±1.56)mmHg,两者相比差异显著,P<0.05],右心指数下降[移植组为(38.80±3.24)%,模型组为(45.10±3.43)%,二者相比差异显著,P<0.05],肺小动脉的重建和超微结构的血气屏障、线粒体、板层小体等改变均有明显改善,其结果接近正常对照组。结论:MMSCs移植后可通过形成新生血管建立侧枝循环,有效减轻野百合碱诱导的肺动脉高压和肺组织病变程度。

骨髓间充质干细胞移植治疗肺动脉高压大鼠肺血管病变的研究

目的探讨骨髓来源的间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)移植对野百合碱诱导的实验性肺动脉高压大鼠肺血管病变的干预作用。方法体外分离、培养并纯化SD大鼠骨髓MSCs。健康雄性SD大鼠随机分为3组,肺动脉高压组(n=20)、MSCs移植组(n=20):2组大鼠均一次性向背部皮下注射野百合碱50 mg/kg,诱导肺动脉高压动物模型;正常对照组(n=15):注射同体积的生理盐水。同等条件饲养3周后,MSCs移植组大鼠经舌下静脉注射5×106/ml的经Hoechst33342荧光染料标记的MSCs细胞悬液1 ml,肺动脉高压组和正常对照组大鼠注射等量L-DMEM液。移植后观察4周,测定3组大鼠生存率、肺动脉平均压、肺小动脉的微观结构的改变。结果肺动脉高压大鼠移植MSCs 4周后,生存率由30%上升到90%,肺动脉平均压由(42.7±2.3)mmHg下降到(24.7±2.3)mmHg,下降了50%;右心指数由(45.30±3.13)%下降到(37.90±3.18)%(q=29.86,P<0.01),肺小动脉病变得到有效改善。荧光显微镜观察到Hoechst 33342标记的MSCs在肺内定植且分化成大量新生血管并形成侧枝循环,肺动脉重构得到有效逆转。结论MSCs移植可有效减轻并逆转肺动脉重构的进程,其作用机制是MSCs分化形成新生血管,建立了侧枝循环,从而修复野百合碱诱导的肺血管损伤。

哮喘发作患儿CD_(30)分子表达及与Th2源细胞因子和血浆免疫球蛋白E水平的相关性研究

目的 探讨CD3 0 在哮喘发病中的作用。方法 随机选择哮喘急性发作期患儿 2 7例 ,急性上呼吸道感染 (上感 )患儿 16例 ,对照组 19例。采用直接免疫荧光流式细胞术检测外周血单核细胞 (PBMC)中CD4+ 细胞表达CD3 0 百分率 ,采用ELISA法检测培养上清IL 4、IL 13及血浆IgE水平。 结果 1.哮喘患儿PBMC中CD4+细胞表达CD3 0 百分率较对照组和上感组明显增高 ,差异有显著性 (P均 <0 .0 5) ;2 .哮喘患儿PBMC培养上清IL 4、IL 13和血浆总IgE水平均较对照组和上感组增高 ,上感组血浆IgE水平亦较对照组增高 ,差异均有显著性 ;3 .哮喘组CD4+ 细胞表达CD3 0 百分率与培养上清IL 4、IL 13和血浆IgE水平呈显著正相关。 结论 分泌IL 4和IL 13的Th2类细胞活化、增殖的克隆可能主要是由CD3 0 阳性细胞克隆组成 ,Th2细胞表面CD3 0 与CD3 0 L结合后导致Th2细胞分化成熟及释放Th2源细胞因子 ,IL 4和IL 13增加可诱导B细胞分泌较多的IgE。说明CD3 0

82例反复呼吸道感染患儿细胞免疫功能探讨

反复呼吸道感染(RRTI)是小儿时期常见病,其病因及发病机理尚不清楚。据报告RRTI与IgG亚类缺陷有关。大量文献表明机体免疫功能异常是RRTI的重要原因之一。本文观察了82例RRTI患儿的总T淋巴细胞(CD3)、辅助性T淋巴细胞(CD4)、抑制性T淋巴细胞(CD8)及淋巴母细胞转化率(LTT)的变化,同时检测了B淋巴细胞,以探讨细胞免疫功能与RRTI的关系。

1例Wiskott-Aldrich综合征临床特征和致病基因突变分析

目的:分析1例Wiskott-Aldrich综合征患者的临床特征及分子遗传特征。方法:分析患者的临床特征,收集患者及其父母外周血,提取基因组DNA,针对WASP基因所有编码外显子及外显子和内含子交界处进行PCR扩增测序。结果:我们报道的患者具有典型的WAS表型,临床得分为5分;患儿Coomb's试验,自身抗体中ANA及类风湿因子均阳性,伴有自身免疫性疾病。患儿为WASP基因第7外显子中第665位核苷酸C突变为T(c.665C>T),导致211位密码子发生无义突变,该位置提前出现终止密码(p.R211X);其母亲为此突变基因携带者。结论:这例男性中国Wiskott-Aldrich综合征患儿由于WASP基因突变致病,此基因型患儿(p.R211X)拥有典型的WAS表型且伴有自身免疫性疾病的临床型为国内首次报道。

小儿咳嗽变异性哮喘护理体会

咳嗽变异性哮喘（coughariationasthma，CVA）是以咳嗽为主要表现而无喘息的气道变态反应性炎症疾病，是支气管哮喘的一种特殊形式。目前对小儿咳嗽变异性哮喘护理报道不多，现将我院哮喘专科门诊收治病例护理的体会介绍如下。

46例新生儿呼吸窘迫综合征临床分析

目的:探讨新生儿呼吸窘迫综合征的治疗方法及疗效。方法:50例新生儿呼吸窘迫综合征患儿在常规治疗的基础上静脉注射盐酸氨溴索、多巴胺、酚妥拉明,45例给予鼻塞式持续气道正压(CPAP)吸氧,1例经气管插管机械通气。结果:50例患儿经治疗46例治愈,4例死亡。结论:采用盐酸氨溴索和多巴胺、酚妥拉明联合CPAP治疗轻、中度新生儿呼吸窘迫综合征效果较好。

哮喘儿童行为问题及其主观生活质量研究

Objective:To explore differences in beha viors and quality of life between asthmatic and non-asthmatic children . Methods:Be haviors and quality of life were assessed in the 84 children with asthma and healthy children,4-11 years of age .Results :Behavioral problems were more prevalent in asthmatics than non-asthmatics.The major beha vior al problems in children with asthma were recession, physical complaints,anxiety/ de pression,and social intercourse.The children with asthma were less satisfact ory than healthy children with respect to quality of life especially on anxiety,depressi on and somatic feelings.Conclusion:Asthma contribut es to the developmen t of behavioral problem and adversely affects the children’s quality of life.

大鼠骨髓间充质干细胞多向分化潜能的研究

目的分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞(marrow mesenchymal stem cells,MSCs),并行多向分化潜能的鉴定。方法经Percoll梯度分离法获得大鼠骨髓单个核细胞。贴壁培养后,通过倒置显微镜进行细胞形态学观察,并采用流式细胞术进行分析。传至第3代后,分别进行成脂肪细胞、神经元样细胞、血管内皮样细胞的诱导,并行免疫组织化学鉴定。结果骨髓间充质干细胞大小较为均匀,基本上呈梭形或星形的上皮样细胞,传代培养后的细胞体积增大,成纤维样细胞逐渐增多。经反复传代纯化的MSCs检测CD71、CD29呈阳性表达并证实骨髓间充质干细胞经诱导后分化为脂肪细胞、神经元样细胞、血管内皮样细胞。结论在体外,大鼠骨髓间充质干细胞具有多向分化潜能,可作为组织工程的种子细胞。

Anti-CD86mAb干预哮喘患儿PBMC后对其产生Th源细胞因子影响的研究

目的 :探讨Th源细胞因子和CD86在哮喘发病中的作用及CD86mAb治疗哮喘的临床潜在价值。方法 :随机选择哮喘急性发作期患儿 2 8例 ,男 18例 ,女 10例 ,年龄 1岁～ 8 0 8岁 ,平均年龄 (4 83± 1 99)岁 ;对照组 15例 ,男 7例 ,女 8例 ,年龄 3 2 5岁～ 10岁 ,平均年龄 (6 6 3± 1 91)岁。ELISA检测PHA刺激并用小鼠抗人CD86mAb干预PBMC(peripheralbloodmononuclearcell,PBMC)后其培养上清IL 4、IL 13、IFN γ水平。结果 :小鼠抗人CD86mAb(5× 10 - 3μg ml)干预PBMC后 ,正常组和哮喘组IL 4、IL 13和IFN γ水平均降低 ,与相应小鼠IgG对照组相比差异有显著性 ,而哮喘组IL 4和IL 13降低更明显。结论 :CD86mAb的阻断是非特异性的 ,即对Th1和Th2细胞均有一定的抑制作用 ,但对Th2细胞的抑制作用尤甚 ,说明CD86信号传导在哮喘的发生和发展过程中起重要作用。

过敏性紫癜患儿PBMC表面粘附分子表达、血清抗中性粒细胞胞浆抗体检测情况研究

目的探讨过敏性紫癜(HSP)患儿外周血单个核细胞(PBMC)表面CD54、CD11a、CD11b、CD18表达和血清抗中性粒细胞胞浆抗体(ANCA)阳性率,以及两者在HSP发病中的关系。方法用标记的链霉卵白素-生物素免疫细胞化学染色法检测PBMC表面粘附分子(AMs)CD54、CD11a、CD11b、CD18的表达情况,用间接免疫荧光法(IIF)检测ANCA。结果HSP患儿PBMC表面表达CD54、CD11a、CD11b、CD18的阳性细胞百分率较对照组普遍上调,P<0.001;紫癜性肾炎(HSPN)患儿CD54表达较单纯HSP组升高;ANCA阳性检出率HSP组高于对照组,HSPN组高于单纯HSP无肾脏损害组,差异有显著性,P<0.01;ANCA阳性组的CD54、CD11a、CD11b较ANCA阴性组增高,差异有显著性,P<0.05或<0.01。结论AMs在HSP的发病中发挥一定的作用;HSP患儿血清ANCA阳性率升高,提示ANCA可能参与了HSP的致病过程;HSPN患儿ANCA阳性率明显升高,有助于诊断HSP是否伴肾脏受累;ANCA阳性者AMs高于ANCA阴性者,说明ANCA与AMs在HSP发病过程中可能起协同作用。

国内外特发性血小板减少性紫癜诊断标准的比较

特发性血小板减少性紫癜(ITP)是小儿最常见的血小板减少疾病,在儿童最常见的是急性ITP,国内外对ITP的诊断标准存在较大差别。国内诊断标准主要强调实验室检查和临床表现,而国外主要强调排他性诊断,国内对排他性诊断重视不足,国内应加强排他性诊断,以免扩大诊断范围,造成误诊。

孤独症大鼠海马自噬相关蛋白的表达

目的探讨细胞自噬在孤独症发病中的作用。方法健康繁殖期Wistar雌鼠20只（250—260g），雄鼠10只（280—290g），按2：1比例合笼过夜，次日早上阴道涂片发现精子计为孕1d。在其孕12．5d时，10只雌鼠腹腔注射丙戊酸钠，其子代为孤独症模型组；10只注射同等剂量生理盐水，其子代为正常组。通过比较自梳理实验、三箱实验验证孤独症模型是否成功；Western blotting方法对比正常组与孤独症模型组大鼠生后42d（P42）海马自噬相关蛋白LC3-II、Beclin1和P62表达的变化。结果1．成功建立孤独症动物模型，与正常组比较，自梳理实验显示，模型组理毛时间较正常显著增加（P〈0．05），三箱实验结果显示，模型组大鼠交互能力障碍、缺乏对新鲜事物的偏好性；2．与正常组相比较，模型组大鼠P42d海马自噬相关蛋白LC3-II表达显著降低（P〈0．05），Beclin1表达显著降低（P〈0．05），P62表达显著升高（P〈0．05）。结论孤独症大鼠P42d海马自噬活性降低，提示增强自噬可能是一个潜在的治疗策略。