供者血经抗──HCV筛查后血液病患者的HCV感染情况分析

为研究对献血员作抗—HCV筛查后血液病患者的HCV感染情况，再次对住院的119例血液病患者进行了抗—HCV检测。结果显示：其抗—HCV总阳性率为9．2％（11／119），受血的90例中阳性率为11．1％（10／90），与筛查前130例血液病患者的总抗—HCV阳性率20．8％（27／130）及受血的110例中阳性率24.5％（27／110）比较均明显降低，后者尚有统计学意义（P＜0．05）；此结果均高于对照组的3．6％（77／2139），与之比较差异有非常显著意义（P均＜0．01），表明筛查后血液病患者HCV感染率下降，但仍明显高于对照，应进一步采取有效措施降低HCV感染率。

肝病患者血清酸性α-醋酸萘酯酶及其同工酶的变化

目的:探讨肝病患者血清酸性α-醋酸萘酯酶(acid alpha naphthyl aetate esterase,α-ANAE)及其同工酶的临床应用价值. 方法:通过比色法测定血清ANAE总活性.ANAE同工酶的检测采用琼脂糖凝胶电泳法及聚丙烯酰胺凝胶电泳法. 结果:肝病患者包括肝炎、肝硬化及肝癌血清ANAE含量均低于对照组,肝硬化组及肝癌组明显低于肝炎组.通过琼脂糖凝胶电泳法可以在肝病患者血清中检出两种ANAE同工酶异常谱形.聚丙烯酰胺凝胶电泳可分离出更多ANAE同工酶谱带. 结论:血清ANAE含量测定可作为评价肝细胞变性坏死、肝脏合成功能异常的一项血清学指标.肝病患者血清中检出的异常ANAE同工酶谱带性质、组成及在临床应用上的价值还有待于进一步探讨.

人类cyclophilin A基因cDNA的克隆和序列测定

目的:克隆人类环孢霉素A受体亚型cyclophilinA(CypA)基因,对该基因进行序列测定。方法:利用EST重叠序列拼排技术,设计特异性CypA引物,以人外周血白细胞总RNA为模板,进行RT-PCR扩增,纯化PCR产物,装pGEM-T载体,进行DNA序列测定。结果:成功克隆了人类Cyp A基因cDNA序列的开放阅读框,经DNA序列测定证实序列正确。结论:通过克隆人CypA基因,并克隆人pGEM-T载体,为下一步的基因表达和功能研究奠定了实验基础。

血小板表面相关IgG检测的临床评价——91例血小板减少症前瞻性研究

本文报道应用竞争性酶联免疫吸附试验(ELISA)对91例血小板减少症患者的血小板表面相关IgG(PAIgG)进行定量检测,以评价PAIgG对特发性血小板减少性紫癜(ITP)及其他血小板减少症的诊断、鉴别以及ITP发病机理的探讨、治疗选择及疗效判断等的价值。结果发现52例ITP中47例PAIgG显著高于正常(占90.4％),而39例其他血小板减少症仅10例PAIgG高于正常。两者均值比较有显著性差异(P<0.01),表明PAIgG对ITP的诊断有价值,并有助于阐明ITP的免疫机理,13例PAIgG动态测定与同日血小板计数相比较,显示有显著的负相关(P<0.01),提示动态测定PAIgG及血小板计数对ITP的疗效判断有实用价值。

凝血酶原片段F_(1+2)的检测及其临床意义

本文目的旨在探讨凝血酶原片段F1+2的检测及其在高凝、低凝中的变化。40例血栓形成性疾病（下肢深部静脉血栓24例，急性心肌梗塞16例）及50例口服抗凝治疗患者用于该研究，并以40例正常健康人作对照。结果显示：F1+2正常值0．40±0.23nmol／L（范围0．11～1．19nmol/L），下肢深部静脉血栓F1＋2值2．99±1．47nmol／L（范围1．01～6．03nmol／L），急性心肌梗塞F1+2值3．77±2.38nmol／L（范围1.13～7．81nmol／L），均非常明显高于正常值（P<0．001）。口服抗凝治疗患者F1+2值0．24±0．22nmol／L（范围0．1～0．75nmol／L），显著低于正常值（P<0．05），提示两种血栓形成性疾病及口服抗凝治疗分别表现为高凝及低凝倾向。因此，F1＋2的检测可作为高凝状态及对抗凝治疗进行监测的分子标志。

pPRMETb-TRAIL原核表达载体的构建和表达及纯化

目的 :为获取较高纯度的肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 (TNF relatedapoptosis inducingligand ,TRAIL)工程蛋白。方法 :将TRAIL基因构建于原核表达载体pPRMETb中 ,在大肠杆菌中由异丙基硫代 β D 半乳糖苷 (IPTG)诱导表达 ,对包涵体进行洗涤、尿素裂解、复性后过镍柱层析纯化。结果 :经酶切、测序鉴定证实 pPRMETb TRAIL构建完全正确 ,在大肠杆菌xl1 blue中经IPTG诱导表达量较高 ,包涵体经尿素裂解后行镍柱纯化得到了较高纯度的TRAIL蛋白。结论

肝硬化患者血清和腹水中酸性α-醋酸萘酯酶的含量

目的 :探讨肝硬化患者血清、腹水酸性α 醋酸萘酯酶 (ANAE)的含量与肝硬化肝功能Child pugh分级的关系。方法 :比色法测定肝硬化患者血清、腹水ANAE含量。结果 :肝硬化患者血清、腹水ANAE含量较对照组明显降低 ,其中肝硬化肝功能ChildB级以后血清、腹水ANAE含量下降明显。血清、腹水ANAE含量相关性显著。结论 :肝硬化患者血清、腹水ANAE含量 。

慢性粒细胞白血病MGMT基因的克隆及逆转录病毒表达载体的构建

目的 :从慢性粒细胞白血病病人外周血中克隆人MGMT基因 ,并进行逆转录病毒表达载体的构建。方法 :用RT PCR方法从慢性粒细胞白血病病人外周血白细胞中克隆得到长为 6 84bpMGMTcDNA。将该片段与 pGEM T载体连接 ,转化大肠杆菌DH5后得到重组质粒 pGEM T MGMT ,进行限制性内切酶酶切分析、PCR及测序鉴定。再将MGMTcDNA亚克隆到G1Na逆转录病毒载体EcoRⅠ和xhoⅠ位点之间 ,并进行酶切、PCR鉴定。结果 :成功克隆了人MGMT基因 ,经酶切分析、PCR初步筛选及测序鉴定证实序列正确 ,并成功构建到逆转录病毒载体上。结论 :通过克隆人MGMT基因 ,并构建逆转录病毒载体G1Na MGMT ,为探讨将耐药基因导入造血干细胞对烷化剂类化疗药物抗性的研究奠定了基础。

慢性粒细胞性白血病bcr/abl融合基因的表达

目的:研究慢性粒细胞性白血病患者bcr/abl融合基因阳性率及其临床意义。方法:取慢性粒细胞性白血病(CML)患者骨髓或外周血,提取单核细胞的总RNA,用逆转录多聚酶链反应(RT-PCR),观察其bcr/abl基因的表达。结果:9例CML患者中,8例bcr/abl基因阳性,占88.9％。结论:bcr/abl基因检测可以用来辅助CML的临床诊断。