贴壁和缩短胰酶消化时间培养大鼠骨髓间充质干细胞

背景:对于骨髓间充质干细胞的分离纯化、培养扩增目前已有几种方法,各自均有不同的优劣性。目的:观察贴壁法和缩短胰酶消化时间的方法体外分离和培养大鼠骨髓间充质干细胞的特点。方法:培养初期频繁换液,去除混杂细胞;传代后加入不同诱导剂定向诱导分化,使之分别向脂肪细胞,成骨细胞和软骨细胞方向分化。结果与结论:该分离培养方法在第3代可以得到纯化的骨髓间充质干细胞。分离培养的细胞纯度高,有良好的增殖和分化潜能。定向诱导培养的细胞能向成脂细胞、成骨细胞和成软骨细胞方向分化。

基于DcR3的树突细胞疫苗对CD8^+ T细胞的免疫抑制效应

目的研究诱骗受体3(decoy receptor3,DcR3)修饰的树突细胞(DC)疫苗对CD8+T细胞的免疫抑制效应。方法将含有DcR3全长cDNA的重组腺病毒转染小鼠DC,制备DcR3基因修饰的DC疫苗,并与同种异体的CD8+T细胞共培养,分析CD8+T细胞的增殖和细胞因子分泌情况。结果重组DcR3腺病毒能成功转染DC,并能抑制同种异体的CD8+T细胞的增殖和细胞因子的分泌。结论重组DcR3腺病毒转染的DC对CD8+T细胞具有免疫抑制效应,为自身免疫性疾病的治疗提供了理论基础。

诱骗受体3和谷氨酸脱羧酶65重组腺病毒对糖尿病小鼠的作用研究

构建诱骗受体3（DcR3）和谷氨酸脱羧酶65（ GAD65）重组腺病毒载体,转染树突状细胞,干预1型糖尿病小鼠,观察小鼠体内CD＋8T细胞的活化抑制情况和血糖水平.结果显示转染重组腺病毒的树突状细胞能有效抑制GAD65特异性T细胞的增殖和细胞因子的分泌,γ-干扰素[（50.5±7.2）对（95.4±6.9）、（91.2±6.5）pg/ml]和白细胞介素2[（46.3±5.1）对（86.1±5.2）、（80.3±7.3） pg/ml]低于阴性和空白对照组（均P＜0.05）,同时延缓1型糖尿病的发生.提示DcR3和GAD65重组腺病毒可用于1型糖尿病的基因治疗.