青藤碱对人脑胶质瘤的抑制作用及肿瘤内药代动力学特征

目的:观察青藤碱(sinomenine)对人脑胶质瘤的抑制作用及在脑胶质瘤内的药代动力学特征。方法:构建稳定表达荧光素酶的脑胶质瘤U87细胞系,脑内接种建立同时用于药效学和药代动力学研究的小鼠胶质瘤模型。药效学部分:模型小鼠随机分为模型组和青藤碱低、中、高剂量组(50、100、150 mg·kg^(-1)),腹腔注射给药14 d,观察脑内肿瘤荧光值,分析其对脑胶质瘤增殖的抑制作用;取脑肿瘤及肿瘤周围脑组织,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测血管内皮生长因子A(VEGFA)、药物转运体P-糖蛋白(P-gp)和乳腺癌耐药蛋白(BCRP)及闭合蛋白(Occludin)的表达水平。药代动力学部分:小鼠分为正常给药组(50 mg·kg^(-1))和模型给药组(50、100、150 mg·kg^(-1)),青藤碱单次腹腔注射后,微透析技术活体采集脑肿瘤细胞外液,每15 min收集1次,共收集至给药后6 h。高效液相色谱-质谱联用法(HPLC-MS/MS)检测透析液中青藤碱浓度,计算药代动力学参数,分析青藤碱在脑和脑胶质瘤内的药代动力学特征。结果:与模型组比较,青藤碱给药14 d后脑内肿瘤荧光值明显降低(P<0.05),并呈一定的剂量依赖性。青藤碱可抑制肿瘤周围VEGF的升高和Occludin的降解,抑制胶质瘤VEGF、P-gp、BCRP蛋白表达。青藤碱单次给药后,在7.5 min即可到达脑组织和肿瘤组织。和正常组比较,肿瘤内Cmax、AUC均明显升高,Tmax缩短(从1.63 h缩短至0.71 h),CLz/F降低。在50~150 mg·kg^(-1)剂量范围内,脑胶质瘤内的青藤碱呈现一定的线性药代动力学过程。结论:青藤碱对于脑胶质瘤具有明显的抑制作用,抑制VEGF的增高和药物转运蛋白的外排,降低肿瘤侵袭,维持血脑屏障完整。青藤碱可以快速通过血肿瘤屏障并达峰,在肿瘤内具有线性药代动力学特征。