蜡梅热激蛋白基因CpHSP70-1的克隆、亚细胞定位与表达分析

在已构建的蜡梅花转录组数据库EST序列分析的基础上,采用RACE技术克隆获得蜡梅热激蛋白HSP70的cDNA序列,命名为CpHSP70-1(GenBank登录号:KR071130).该序列全长2 520bp,包括1 962bp的完整开放阅读框,编码653个氨基酸蛋白序列,含有3个HSP70家族典型基序.CpHSP70-1蛋白与其他真核生物的HSP70蛋白具有较高的同源性,聚类分析显示其属于定位于细胞核/细胞质的蛋白.亚细胞定位结果支持该蛋白分布于细胞核的预测.利用实时荧光定量PCR对CpHSP70-1基因的表达特性进行分析,其在各组织中均有不同程度的表达,其中在成熟叶片中表达量最高;在不同花发育阶段呈现持续稳定的表达模式;该基因在低温和高温诱导下表达量提高,而且对高温的响应更为敏感.