中医药院校大型仪器设备用于实验教学的探索

大型仪器设备在中医院校的普及率越来越高,并逐步被应用到实验教学环节。本文列举了大型仪器在中医药院校实践教学中的一些举措,总结出大型仪器用于实践教学的同时,显著提升了大学生的科技创新能力,提高了大型仪器的使用率。更重要的是使科研与教学有机融合,完善了中医药本科人才培养方式与创新教育模式,提高了教学质量。

中医类院校实验室安全微课体系构建与探索

“微课”是针对传统单一资源类型的局限性而发展起来的一种新型教学资源建设与应用模式。随着中医药现代化的深入和中医药院校科研水平的不断提高,中医药院校师生在开放实验平台开展的科研活动也在不断增加,实验室安全保障和安全教育面临极大挑战。而中医类院校实验室生物安全与实验室教师、工作人员与学生健康密切相关,一旦发生事故,会造成不可预计的危害。“微课”这一新型教学模式有助于实验室安全教学的顺利开展。我校重大科研平台依托现有的实验室安全数字化教学资源和开放服务系统的建设基础,构建了基于“微课”的医药类高校优质教学资源共享平台。利用“微课”这一新型的教学模式,探索新型实验室安全教学方法。通过新型教学资源库建设,构建了中医类院校实验室安全微课体系,对培养新型中医药科研人才及对中医药大学实验室安全的传承与发展具有重要的意义。

依托大型仪器共享平台培养中医药本科生创新能力的探索

大型仪器是高校进行科研创新的重要载体,是本科教学实验的来源。如何开放共享大型仪器设备,转化大型仪器的教学功能,使大型仪器平台向本科生充分开放,让大型仪器在学校的教学、科研和社会服务中充分发挥作用,是高等学校急需面对的重要课题。辽宁中医药大学先后通过“中央与地方共建高等学校共建专项资金”“中西部高校基础能力建设工程”等项目的支持,为学生购置了大批大型高端仪器,组建了大型仪器共享平台,这些大型仪器在培养探索型、创新型人才的过程中意义重大,同时也使学校办学水平得到了显著提升。

基于“互联网+”的实验室开放对大学生创新创业能力培养的探索

大学生是创新创业的主力军。"大学生创新创业训练计划"是培养学生创新能力的重要载体,实验室开放为"大创计划"提供便利条件。随着"互联网+"上升到国家战略高度,高校实验室工作人员应该利用互联网思维优化实验室资源配置,通过互联网与实验室的跨界合作,将实验室开放工作落到实处,为学生创新创业能力的培养提供支撑与保障。

“逆针灸”理论治疗高血压前期的应用

逆针灸理论早在东晋便有提及,并且已经被大量应用于各种疾病前期的治疗。而随着人们对于生活质量的要求越来越高,"绿色健康"的理念方兴未艾。高血压前期作为高血压病的欲病状态,也被越来越多的学者研究。将"逆针灸"的治疗思想与选穴原则运用于高血压前期的治疗,"欲病救萌,防微杜渐",为未来高血压前期的实验研究及临床治疗方面提供了一条新的思路。

枸杞多糖通过调控PI3K/Akt/eNOS信号通路对去卵巢大鼠心肌产生抗氧化作用

目的:观察枸杞多糖对去卵巢大鼠心肌PI3K/Akt/e NOS信号通路的影响。方法:将30只SD雌性大鼠随机分为假手术组、去卵巢组、补佳乐组、枸杞多糖高剂量组及枸杞多糖低剂量组,ELISA法比较各组血清雌激素、LDH及CK水平,检测心肌H_2S含量及氧化应激损伤相关指标,HE染色观察各组心肌的形态变化,Western blot法检测各组大鼠心肌e NOS蛋白及PI3K/Akt通路蛋白的表达。结果:与假手术组相比,去卵巢组大鼠血清雌二醇水平降低,心肌H_2S含量和GSH-Px活性下降,心肌e NOS蛋白及PI3K/Akt通路蛋白的表达均有所降低,心肌ROS活性和MDA含量升高(P<0.05),心肌细胞排列紊乱,细胞间隙增大,血清LDH和CK活性均增多;与去卵巢组比较,枸杞多糖高剂量组大鼠血清雌二醇含量增加(P<0.05),心肌H_2S含量、GSH-Px活性、e NOS蛋白及Akt磷酸化水平均提高,心肌ROS活性和MDA含量下降(P<0.05),血清LDH和CK活性均降低,并且改善大鼠心肌形态的变化。结论:枸杞多糖可以通过调控PI3K/Akt/e NOS通路改善去卵巢大鼠心脏变化防治绝经后心血管病变。

关于大鼠针刺、固定方法的研究与探讨

目的:在遵循实验动物福利原则的前提下,探讨大鼠针刺时采取何种固定方法使针刺达到良好的效果。方法:运用常见的道具如兔台、橡皮筋、袜子等简便经济的物品固定大鼠,限制大鼠的活动,从而更好地保护实验者,简化针刺流程,提高针刺效应。结果:大鼠得到了良好的固定,使针刺更加容易。结论:该固定方法取材简便,操作容易,可供有针刺大鼠需要的同仁参考。

高脂血症大鼠肝脏脂蛋白和胆固醇代谢信号通路相关基因表达的变化

目的利用PCR array技术观测高脂血症大鼠肝脏脂蛋白和胆固醇代谢信号通路相关基因表达。方法 SPF级健康雄性SD大鼠20只,随机分为空白对照组、高脂血症组。使用全自动生化分析仪检测血清胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;提取各组大鼠肝脏总RNA,应用脂蛋白和胆固醇代谢信号通路PCR芯片检测高脂血症大鼠肝脏脂蛋白和胆固醇代谢信号通路相关基因表达。结果与空白对照组相比,高脂血症大鼠血清HDL-C水平显著降低,TC、LDL-C水平显著升高,高脂血症大鼠上调≥2倍的基因6个,占7%,如Lrp1b、Stab2、Apol2、Abcg1、RGD1564999等基因;下调≥2倍的基因36个,占43%,如Ldlr、Lrp6、Pcsk9、Apoa4、Cdh13、Sorl1、Apoa1等,上述上调或者下调的基因,涉及脂蛋白信号通路的LDL受体、LDL受体相关蛋白、LDL相关蛋白及HDL相关蛋白相关基因;胆固醇转运途径的胆固醇转运、胆固醇流出、胆固醇逆向转运相关基因;以及胆固醇代谢途径的胆固醇吸收、分解代谢、胆固醇的平衡及生物合成等相关基因。结论高脂血症引起血清胆固醇水平异常,可能与调控肝脏的脂蛋白和胆固醇代谢信号通路相关基因表达改变密切相关。

丹参酮ⅡA对ApoE基因敲除小鼠肝脏脂质沉积的影响及机制

目的观察丹参酮ⅡA对ApoE基因敲除(ApoE-/-)小鼠肝脏脂质沉积及相关基因表达的影响,探讨丹参酮ⅡA抗AS作用及可能机制。方法 20只ApoE-/-小鼠随机分成模型组、丹参酮ⅡA组,10只C57BL/6J小鼠作为空白对照组。模型组、丹参酮ⅡA组给予高脂饲料喂养,空白对照组给予普通饲料。丹参酮ⅡA组每日灌胃丹参酮ⅡA(30 mg/kg)、模型组、空白对照组灌予等量生理盐水灌胃。全自动生化分析仪检测血清中TG、TC、HDL-C、LDL-C含量。HE和油红O染色观察小鼠肝脏组织结构变化以及脂质沉积情况,RT-PCR法检测肝脏低密度脂蛋白受体(LDL-R)、卵磷脂胆固醇脂酰转移酶(LCAT)基因mRNA水平,Western blotting法检测肝脏内LDL-R、LCAT蛋白表达。结果与空白对照组相比,模型组小鼠血清TC、TG、LDL-C水平显著升高,HDL-C水平显著降低,肝脏形成大量脂质沉积,肝脏LDL-R、LCAT基因mRNA和蛋白水平显著下调。与模型组相比,丹参酮ⅡA组小鼠TC、TG、LDL-C水平显著下降,HDL-C水平显著升高,肝脏脂质沉积明显减少,肝脏LDL-R、LCAT基因mRNA和蛋白水平显著上调。结论丹参酮ⅡA具有调节血脂和减少肝脏内脂质沉积的作用,其机制可能与调控LDL-R和LCAT基因表达相关。

妊娠期高脂血症孕妇高密度脂蛋白胆固醇逆向转运功能的变化

目的观察妊娠期高脂血症孕妇的高密度脂蛋白(HDL)胆固醇逆向转运功能的变化。方法选取21例妊娠期高脂血症孕妇、21例妊娠期正常孕妇,采用ELISA法检测其血清HDL胆固醇逆向转运功能指标腺苷三磷酸结合盒转运体A1(ABCA1)、载脂蛋白A1(ApoA-1)、卵磷脂胆固醇酰基转移酶(LCAT)、胆固醇酯转移蛋白(CETP),并进行对比分析。结果妊娠期高脂血症孕妇血清ABCA1、Apo A-1、LCAT、CETP水平分别为(1.19±0.68)ng/mL、(0.80±0.62)μg/mL、(0.92±0.30)μmol/L、(621.48±320.31)ng/mL,妊娠期正常孕妇血清ABCA1、ApoA-1、LCAT、CETP水平分别为(2.30±1.56)ng/mL、(2.18±1.78)μg/mL、(2.19±1.87)μmol/L、(968.94±714.97)ng/mL,两者各指标相比,P均<0.05。结论妊娠期高脂血症孕妇的HDL胆固醇逆向转运功能下降,是妊娠期高脂血症的发病机制,血清ABCA1、Apo A-1、LCAT、CETP可以作为妊娠期高脂血症的生物标志物。

二陈汤合桃红四物汤含药血清对ox-LDL诱导内皮细胞损伤的保护作用及机制

目的观察二陈汤合桃红四物汤含药血清对氧化型低密度脂蛋白(ox-LDL)诱导内皮细胞损伤的保护作用并探讨其可能的机制。方法培养EA.hy926细胞,随机分为对照组、ox-LDL组、干预组、抑制剂组。流式细胞仪检测各组细胞凋亡水平,比色法检测细胞内丙二醛(MDA)、一氧化氮(NO)水平及超氧化物歧化酶(SOD)活性,ELISA检测细胞上清液中肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)水平,Western blot检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、磷酸化AKT(p-AKT)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)蛋白表达水平。结果与对照组比较,ox-LDL组细胞上清液中TNF-α和IL-6水平显著升高(P<0.01),细胞内MDA含量显著升高(P<0.01),SOD活性明显降低(P<0.05),上清液中NO水平显著降低(P<0.01),活性氧(ROS)含量和细胞凋亡率明显升高,PI3K、eNOS蛋白表达水平和AKT蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.01)。与ox-LDL组比较,干预组细胞上清液中TNF-α和IL-6水平显著降低(P<0.01),细胞内MDA含量显著降低(P<0.01),SOD活性明显升高(P<0.05),上清液中NO水平显著升高(P<0.01),ROS含量和细胞凋亡率明显降低,PI3K、eNOS蛋白表达水平和AKT蛋白磷酸化水平显著升高(P <0.01)。与干预组比较,抑制剂组细胞上清液中TNF-α和IL-6水平显著升高(P<0.01),细胞内MDA含量显著升高(P<0.01)、SOD活性明显降低(P<0.05),上清液中NO水平明显降低(P<0.05),细胞内ROS含量升高,PI3K、eNOS蛋白表达水平和AKT蛋白磷酸化水平显著降低(P<0.01)。结论二陈汤合桃红四物汤含药血清能有效保护ox-LDL诱导的内皮细胞损伤,其机制可能与激活PI3K/AKT/eNOS信号通路有关。

冠状动脉粥样硬化性心脏病患者积极心理资源与焦虑的相关分析

目的探讨冠状动脉粥样硬化性心脏病(简称冠心病)患者积极心理资源与焦虑的关系。方法采用横断面调查,以沈阳市中医院339例冠心病患者为研究对象,采用广泛性焦虑量表(GAD-7)、D型人格量表(DS14)、一般自我效能量表(GSES)、乐观量表(LOT-R)、韧性量表(RS)、希望量表(LOT-R)进行调查。采用χ2检验、t检验、方差分析、Pearson相关分析、logistic回归、多元线性回归分析积极心理资源与焦虑的关系。结果冠心病患者焦虑流行率为35.1%。χ2检验结果显示,体质量指数(BMI)、婚姻状况、冠心病病程、D型人格、一般自我效能、韧性、希望与焦虑相关(均P<0.05);logistic回归结果显示,BMI(OR=1.83,95%CI:1.03~3.25)、冠心病病程(OR=0.43,95%CI:0.19~0.98)、D型人格(OR=2.59,95%CI:1.37~4.89)、希望(OR=0.54,95%CI:0.30~0.97)对焦虑有影响(均P<0.05)。相关分析显示,BMI、教育程度、婚姻状况、冠心病分级、D型人格、韧性、希望与焦虑相关(均P<0.05)。多元线性回归分析进一步提示BMI(β=0.12)、D型人格(β=0.18)、韧性(β=-0.18)、希望(β=-0.31)对焦虑有影响(均P<0.05)。结论冠心病患者焦虑发生率较高,BMI、D型人格、希望是重要的影响因素。

补阳还五汤对高血压模型大鼠肾脏组织RAS系统平衡作用机制研究

目的:观察补阳还五汤对Dahl盐敏感大鼠介导的高血压模型大鼠肾脏组织ACE/AngⅡ/AT1R轴与ACE2/Ang(1-7)/MasR轴表达的影响,探讨补阳还五汤对高血压模型大鼠肾脏组织RAS系统平衡作用机制。方法:选取7周龄盐抵抗(SS)大鼠10只分为正常组,30只盐敏感大鼠(DS)随机分为模型组、中药组、西药组3组,每组10只。各组大鼠予以8%Nacl高盐饲料喂养,期间采用智能无创血压计检测大鼠尾动脉收缩压(SBP),高血压模型大鼠造模成功后,停止高盐喂饲,改为普通饲料喂养,中药组和西药组分别给予补阳还五汤和缬沙坦灌胃治疗,1次/d,连续5周。治疗结束后取大鼠肾脏组织,荧光定量PCR法检测各组ACE、AT1R、ACE2、MasR的mRNA表达,ELISA法检测各组AngⅡ、Ang(1-7)含量表达,Western Blot检测各组AT1R的蛋白表达。结果:与正常组相比,模型组大鼠ACE、AT1R的mRNA表达显著上升(P<0.05),ACE2、MasR的mRNA表达显著下降(P<0.05),AngⅡ的含量明显升高(P<0.05),Ang(1-7)的含量明显下降(P<0.05),AT1R的蛋白表达明显上升(P<0.05);与模型组比较,中药组和西药组大鼠ACE、AT1R的mRNA表达显著下降(P<0.05),ACE2、MasR的mRNA表达显著上升(P<0.05),AngⅡ的含量显著下降(P<0.05),Ang(1-7)的含量显著上升(P<0.05),AT1R的蛋白表达显著下降(P<0.05);与中药组相比,西药组大鼠ACE、AT1R的mRNA表达显著下降(P<0.05),ACE2、MasR的mRNA表达显著上升(P<0.05),AngⅡ的含量显著下降(P<0.05),Ang(1-7)的含量显著上升(P<0.05),AT1R的蛋白表达显著下降(P<0.05)。结论:补阳还五汤可能通过抑制ACE/AngⅡ/AT1R轴的表达,促进ACE2/Ang(1-7)/MasR轴的表达,进而维持RAS平衡的状态,从而降低血压,保护肾脏组织的损伤,延缓高血压对靶器官的损伤。

黄连解毒汤的文献分析研究

选用＂维普中文科技期刊数据库＂为资料来源,参照布拉德福文献离散率计量分析研究方法,对1989—2016年黄连解毒汤文献进行归纳分析。分别从发表年度、期刊分布、作者、文献类型、疾病研究等5个方面进行分析统计,讨论其分布特点,以了解黄连解毒汤的研究现状,并对目前存在的问题提出建议,有助于黄连解毒汤进一步的研究。

针刺对乳腺增生大鼠乳腺组织Caspase-8mRNA和Caspase-3mRNA表达的影响

目的：探究针刺对乳腺增生大鼠乳腺组织中Caspase-8mRNA和Caspase-3mRNA表达的影响。方法：选取40只12周龄的健康雌性未孕SD大鼠（SPF级）,将其随机分为正常组、模型组、针刺组与三苯氧胺组,每组10只。造模后进行4周的干预治疗,HE染色后光镜下观察各组大鼠乳腺组织病理状态,PCR法检测各组大鼠乳腺组织Caspase-8mRNA和Caspase-3mRNA的表达情况。结果：HE染色显示模型组较正常组出现乳腺小叶增多、腺泡结构紊乱等组织增生现象,Caspase-8mRNA、Caspase-3mRNA表达水平明显降低（P〈0.01）;与模型组相比,治疗后的针刺组与三苯氧胺组组织增生的病理变化减轻,Caspase-8mRNA、Caspase-3mRNA表达水平明显增高（P〈0.01）。结论：针刺对乳腺增生大鼠乳腺组织中Caspase-8mRNA、Caspase-3mRNA表达有一定影响,可能通过干预凋亡通路对大鼠乳腺增生有调节和治疗作用。

绞股蓝不同有效成分对ox-LDL诱导内皮细胞自噬效应的影响

目的：探讨绞股蓝不同成分（绞股蓝总皂苷、绞股蓝皂苷XILX、人参皂苷GRb3）对氧化低密度脂蛋白诱导内皮细胞自噬效应的影响。方法：采用实时荧光定量PCR法检测自噬相关基因ULK1、Beclin 1的表达;免疫组织化学法分别检测LC3蛋白的表达;Western blotting法检测自噬相关蛋白P-mtor、ULK1、Beclin 1、LC3的表达。结果：与空白对照组相比,模型组ULK1、Beclin 1 mRNA表达减弱;LC3、Beclin 1蛋白表达减弱,P-mtor蛋白表达增多,ULK1蛋白表达减弱,自噬减弱。而Gps、Gp XILX、GRb3处理细胞后,Gps组较模型组ULK1、Beclin 1mRNA表达增强;LC3、Beclin 1蛋白表达增强,P-mtor蛋白表达减少,ULK1蛋白表达增加,自噬增强;GRb3组较模型组Beclin 1 mRNA表达增强;LC3、Beclin 1蛋白表达增强,P-mtor蛋白表达减少,自噬增强;Gp XILX组较模型组,Beclin 1 mRNA表达增加;P-mtor蛋白表达减少,Beclin 1蛋白表达增加。结论：绞股蓝总皂苷、绞股蓝皂苷XILX、人参皂苷GRb3能不同程度的上调ox-LDL诱导内皮细胞的自噬效应,降低内皮细胞损伤。

女性冠心病患者抑郁症状流行状况及其影响因素分析

目的探讨女性冠心病患者抑郁症状流行状况及其影响因素,为改善女性冠心病患者的心理健康提供依据。方法以沈阳市某医院185名女性冠心病患者为研究对象,应用病人健康问卷(PHQ-9)、D型人格量表(DS14)、一般自我效能量表(GSES)、韧性量表(RS)、希望量表(HHI)、乐观量表(LOT-R),采用χ^2检验和logistic回归分析方法探讨女性冠心病患者抑郁症状流行状况和其影响因素。结果女性冠心病患者抑郁症状的流行率为49.7%。单因素χ^2检验显示:女性冠心病患者抑郁症状流行率在BMI、婚姻状况、冠心病病程、D型人格、韧性和希望等变量上各组间差异具有统计学意义(P<0.05);多因素logistic回归进一步提示:BMI(OR=2.79,95%CI:1.08~7.20)、冠心病病程(OR=0.19,95%CI:0.06~0.60)、D型人格(OR=5.04,95%CI:2.01~12.62)和希望(OR=0.16,95%CI:0.07~0.38)是女性冠心病患者抑郁症状的影响因素。结论女性冠心病患者抑郁症状的流行率较高且受多因素影响。

化瘀祛痰方对高脂血症大鼠心功能及脂质代谢的影响

【目的】探讨化瘀祛痰方对高脂血症大鼠心脏功能及脂质代谢的影响。【方法】将40只大鼠随机分为正常组、模型组、化瘀祛痰组和辛伐他汀组,每组10只。正常组给予普通饲料喂养,其余3组给予高脂饲料喂养12周复制高脂血症模型。造模结束后,化瘀祛痰组和辛伐他汀组大鼠分别给予化瘀祛痰方(剂量为16.0 g·kg^-1·d^-1)和辛伐他汀(剂量为3.0 mg·kg^-1·d^-1)灌胃,连续给药30 d。小动物超声影像系统检测大鼠心功能指标变化情况;全自动生化分析仪检测血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)含量;蛋白免疫印迹(Western blot)技术检测肝组织中胆固醇酯转移蛋白(CETP)、肝脂酶(HL)蛋白的表达。【结果】与正常组比较,模型组大鼠TG、TC、LDL-C升高,肝组织CETP蛋白表达升高、HL蛋白表达降低,心功能指标异常(P <0.05或P <0.01);与模型组比较,化瘀祛痰组大鼠血脂TG、TC水平降低,肝脏CETP蛋白表达降低、HL蛋白表达升高,心功能改善(P <0.05或P <0.01)。【结论】化瘀祛痰方可降低高脂血症大鼠血脂水平,调节脂质代谢相关蛋白CETP、HL的表达,改善心功能。

从阴阳自和角度探讨灰树花多糖对CIF模型线粒体自噬蛋白PINK1和Parkin的调节效应

目的:探讨灰树花多糖调节化疗相关性疲劳(CIF)模型骨骼肌线粒体异常的机制。方法:将60只6~8周龄SPF级C57BL/6小鼠随机分为空白组、模型组、灰树花多糖低剂量组(5 mg·kg-1)和灰树花多糖高剂量组(10 mg·kg-1),每组15只。将除空白组以外的小鼠腹腔注射5-氟尿嘧啶(5-Fu,40 mg·kg-1),每天给药1次,连续5 d,同时灰树花多糖低、高剂量组分别给予不同剂量灰树花多糖灌胃,空白组和模型组给予等量生理盐水灌胃,期间测量体质量及抓力。第13天处死动物取腓肠肌,测SOD和MDA含量,透射电镜观察腓肠肌线粒体形态,Western Blot法检测线粒体自噬相关蛋白PINK1和Parkin的表达情况。结果:与空白组相比,模型组抓力显著下降(P<0.05),SOD显著降低(P<0.01),MDA显著升高(P<0.01),灰树花多糖组抓力显著高于模型组(P<0.05),灰树花多糖高剂量组SOD显著高于模型组(P<0.05),灰树花多糖组MDA显著低于模型组(均P<0.01)。电镜结果显示模型组骨骼肌线粒体肿胀变形,且有大量空泡变性,线粒体内嵴排列紊乱或不清晰,灰树花多糖组骨骼肌肌节仍有部分排列紊乱或断裂现象,但可见较多自噬的线粒体。Western Blot结果显示模型组线粒体自噬相关蛋白PINK1和Parkin的表达显著下降(P<0.01),灰树花多糖可显著增加PINK1和Parkin的表达(P<0.01)。结论:灰树花多糖可以改善CIF骨骼肌SOD与MDA失衡,增强线粒体自噬相关蛋白PINK1和Parkin的表达,促进线粒体自噬。

高密度脂蛋白亚类分布与动脉粥样硬化的相关性研究

高密度脂蛋白是一种高度异质型脂蛋白(high density lipoprotein,HDL),因其密度、颗粒大小、电荷和组成成分不同,可分为不同的亚类,不同的亚类对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)的影响和在胆固醇的逆向转运、抗炎、抗氧化过程所发挥的作用均不相同。综述高密度脂蛋白亚类分布与动脉粥样硬化的相关性研究进展,为进一步阐明动脉粥样硬化的发生机制及寻找抗动脉粥样硬化治疗的新的靶点提供参考。