应用冷光源内窥镜和点样吸头完成的新型小鼠气管滴注法

目的建立一套新型易操作的小鼠气管插管、滴注方法.方法依靠冷光源内窥镜和电泳点样吸头为插管工具,建立一套新型的插管操作系统.利用高倍放大,完成小鼠气管插管、滴注,研究中1周内对20只♂ CB17-SCID小鼠（体质量24～28g）进行插管和滴注80μL环境污染细颗粒物悬液.结果共完成80次插管、滴注操作,末次滴注24h后解剖小鼠可见气管低端和肺内有散在的空气污染细颗粒物分布.结论应用冷光源内窥镜和电泳点样吸头进行的气管滴注新方法操作快速、简洁、可重复性好,能够广泛用于小鼠呼吸系统的插管和滴注操作.

小檗碱对2型糖尿病大鼠肾小管的影响

目的:研究小檗碱(Berberine,BBR)对2型糖尿病(Type2diabetesmellitus,T2DM)大鼠肾小管的影响,并分析其意义。方法:将30只清洁级雄性SD大鼠高脂高糖喂养8周后随机均分为3组,其中2组通过尾静脉注射链脲佐菌素(Strepto-zotocin,STZ)的方法制成T2DM模型,再分别给予BBR和阿司匹林灌胃;另一组为对照组(CON组),尾静脉注射柠檬酸缓冲液再给予等剂量的阿司匹林灌胃。定期检测血糖、血脂和胰岛素水平,用免疫荧光染色和高碘酸-希夫反应分别检测BBR干预后葡萄糖转运蛋白4(Glucose transporter 4,GLUT4)在肾组织的表达和肾小管的病理变化。结果:BBR干预的T2DM大鼠肾组织GLUT4表达较模型组显著增加;肾小管上皮细胞肿胀和细胞内糖原颗粒积聚的程度较模型组明显轻。结论:BBR可延缓T2DM大鼠肾小管的病理变化进程,其机制可能与提高肾小管GLUT4的表达水平有关。

PM2.5刺激非小细胞肺癌A549细胞凋亡基因的表达

目的观察PM2.5暴露对非小细胞肺癌A549细胞的影响,进而了解其对细胞的毒性作用机制。方法利用细胞活力检测法确定PM2.5暴露的浓度;用透射电镜观察暴露后细胞的形态特征;通过转录组测序及实时定量RT-PCR,对损伤发生机制进行预测。结果通过细胞活力检测确定PM2.5暴露处理的终浓度为50μg/cm2。形态学检测表明,暴露处理后,细胞核内染色质凝聚,边集于核膜。凋亡相关基因IL1A、IL1B、CXCL3、CXCL2、PTGS2、IRAK2的表达上调,TP53和TNFRSF1A的表达下调。结论通过刺激细胞凋亡基因表达水平的变化,PM2.5暴露诱导了非小细胞肺癌A549细胞的凋亡。

盐酸小檗碱对2型糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用

目的探讨盐酸小檗碱对2型糖尿病大鼠心肌损伤的保护作用。方法选择健康雄性SD大鼠60只,随机分为CON组、T2DM组、BBR组和MET组,每组15只。CON组给予清洁级饲料喂养。其余3组均给予高脂、高糖饲料喂养8周后测量大鼠的体质量和空腹12 h血糖水平,尾静脉注射预冷的链脲佐菌素25 mg/kg。72 h后将非空腹血糖浓度大于11.1 mmol/L者视为2型糖尿病诱导成功;CON组和T2DM组用0.9%NaCl 2 mL灌胃;BBR组用BBR 100 mg/kg灌胃;MET组用二甲双胍50 mg/kg灌胃。分别检测心肌糖类物质的变化和葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)在心肌的表达。结果 BBR组大鼠心肌细胞内糖原颗粒积聚和心肌细胞病理变化的程度较T2DM组和MET组明显减轻,GLUT4表达较T2DM组和MET组显著增强(P<0.05)。结论小檗碱可延缓2型糖尿病大鼠心肌细胞病理变化的进程,其机制可能与提高心肌细胞GLUT4的表达水平有关。

三七三醇皂苷对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞的保护作用

目的探讨三七三醇皂苷(PTS)对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞(RGC)的保护作用及机制。方法 SD大鼠随机分为对照组、糖尿病组及治疗组,糖尿病组及治疗组腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病动物模型,治疗组给予PTS 50 mg·kg-1·d-1灌胃,1个月后免疫荧光组化双标检测Nogo受体与RGC特异性标志物Brn3a的共存情况,Western blot检测视网膜Nogo受体表达,试剂盒检测视网膜丙二醛(MDA)含量,HE染色观察RGC数量。结果 Brn3a与Nogo受体于视网膜内大量共存。与对照组相比,糖尿病组视网膜Nogo受体表达上调,MDA含量增加,RGC数量减少(均P<0.001);与糖尿病组相比,治疗组视网膜Nogo受体表达减少,MDA含量降低,RGC数量增加(P<0.001)。结论 PTS可能通过抑制糖尿病大鼠视网膜RGC内Nogo受体的表达,抑制视网膜氧化应激,从而保护糖尿病视网膜RGC。

Nogo受体对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞凋亡的影响

目的探讨Nogo受体对糖尿病大鼠视网膜神经节细胞(RGC)凋亡的影响及机制。方法 SD大鼠腹腔注射链脲佐菌素诱导30只糖尿病模型。分为对照组、糖尿病组、siNgR组、siRNA空白组,每组10只。siNgR组糖尿病大鼠玻璃体内注射Nogo受体反义核苷酸序列;siRNA空白组糖尿病大鼠玻璃体内注射阴性核苷酸序列。1个月后,免疫荧光组化检测Nogo受体与RGC标志物Brn3a的共存;以TUNEL染色观察RGC凋亡;试剂盒检测视网膜丙二醛(MDA)含量;Western blot检测视网膜Nogo受体及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(caspase-3)表达。结果 Nogo受体大量表达于视网膜RGC内,对照组、糖尿病组、siRNA空白组及siNgR组MDA含量分别为(3.68±0.47)、(8.07±1.24)、(7.54±1.53)及(5.12±0.62)μmol/g蛋白,RGC凋亡率分别为(5.1±0.2)%、(49.3±2.7)%、(45.6±1.8)%及(12.4±0.6)%,Nogo受体相对表达量分别为(0.18±0.07)%、(0.45±0.12)%、(0.40±0.09)%及(0.16±0.09)%,caspase-3相对表达量分别为(0.16±0.05)%、(0.40±0.18)%、(0.42±0.12)%及(0.17±0.08)%。与对照组相比,糖尿病组及siRNA空白组视网膜RGC凋亡明显,Nogo受体及caspase-3表达上调,MDA含量增加(P<0.05)。与糖尿病组相比siNgR组视网膜RGC凋亡减少、Nogo受体及caspase-3表达下调、MDA含量降低(P<0.05)。结论 Nogo受体表达上调参与了糖尿病视网膜RGC凋亡,其机制可能与Nogo受体上调caspase-3表达、诱发视网膜氧化应激有关。