Wnt/β-catenin信号因子在HepG2以及L02细胞中的表达

目的:比较Wnt/β-catenin信号分子在HepG2和L02细胞中的表达,探讨Wnt/β-catenin信号转导通路在肝癌发生中的作用机制,为肝癌的防治提供新的思路。方法:选取Wnt/β-catenin信号转导通路中上下游关键因子Wnt1、Wnt4、β-catenin、cyclin D1以及c-myc等,应用RT-PCR的方法观察他们在正常肝脏L02细胞和肝癌HepG2细胞中的转录水平。用免疫细胞化学染色方法和Western blot检测研究Wnt/β-catenin信号转导通路中最关键的成员β-catenin在上述2个细胞株中的定位和定量表达。结果:在正常的L02肝细胞中,用RT-PCR的方法未检测到Wnt1、Wnt4、cyclin D1以及c-myc的mRNA转录,只有β-catenin的基因被转录表达。同时用免疫细胞化学染色观察到β-catenin在L02细胞膜处存在表达。而在HepG2肿瘤细胞中,不仅检测到β-catenin的基因转录,同时也检测到Wnt1、cyclin D1以及c-myc的mRNA转录,只有Wnt4未转录。用免疫细胞化学的方法观察β-catenin在肿瘤细胞中的表达明显增强,表现为胞膜着色减弱而胞质甚至是胞核的阳性染色。采用Western blot检测也验证了β-catenin蛋白在肿瘤细胞中的表达水平明显高于正常细胞。结论:Wnt/β-catenin信号转导通路在人的肝癌细胞HepG2中存在异常活性,Wnt1可能是导致信号通路激活的始动因素之一。

苦荞麦对糖尿病大鼠血糖 蛋白非酶糖基化反应的影响

目的:研究苦荞麦提取物对STZ诱导的糖尿病大鼠血糖、蛋白非酶糖基化反应的影响。方法:用链脲左菌素(STZ)诱导糖尿病大鼠模型,并于第3周开始给予苦荞麦高、中、低(200,100,50mg/kg·d)剂量和氨基胍(100mg/kg·d)剂量处理12周。上述动物于第12周末尾部取血,用血糖仪测定大鼠即时血糖。用酶联免疫吸附分析法(ELISA)测定糖化血红蛋白含量。用荧光分光光度法测定晚期糖基化终末产物含量。计量资料采用SPSS14.0进行方差分析。结果:苦荞麦高、中剂量明显降低糖尿病大鼠血糖、抑制糖基化产物的形成(P<0.01),并且苦荞麦高剂量组的治疗效果优于氨基胍组。结论:中药苦荞麦的提取物具有降低血糖、抑制大鼠体内蛋白非酶糖基化反应的作用。

眼针对脑缺舞再灌注损伤模型大鼠血清TNF-a含量的影响ɑ仪含量的影响ɑ眼针对脑缺血再灌注损伤模型大鼠血清TNF一仪含量的影响眼针对脑缺血再灌注损伤模型大鼠血清TNF一仪含量的影响眼针对脑缺血再灌注损伤模型大鼠血清TNF一仪含量的影响眼针对脑缺血再灌注损伤模型大鼠血清TNF一仪含量的影响眼针对脑缺血再灌注损伤模型大鼠血清TNF一仪含量的影响

目的观察眼针对脑缺血再灌注损伤大鼠血清肿瘤坏死因子仪（TNF-a）的影响，并探讨其作用机制。方法健康SD大鼠，按体重随机分为：正常对照组、假手术组、缺血再灌注模型组、眼针组，其中假手术组、缺血再灌注模型组、眼针组义分为3h、24h、72h三个时问点，共10组，每组8只。缺血再灌注模型组及眼针组应用线栓法复制脑缺血再灌注损伤模型，3h眼针组于脑缺血再灌注即刻及处死动物前30min进行眼针治疗，24h、72h外每隔12h治疗1次。正常对照组未进行处理；假手术组插入龟线深度lcm，其余同模型组。缺血再灌注模型组、眼针组于再灌注后3h、24h、72h进行神经功能缺损评分，采用ELISA法测定大鼠血清TNF-a含量的变化。结果眼针组大鼠三个时间点神经功能缺损评分[分别为（1．500±0．535）、（1．50±0．535）、（1．625±0．518）]各时问点分别与缺血再灌注模型组[分别为（2．625±O．916）、（3．125±0．641）、（2．625±0．744）]比较明显下降。缺血再灌注模型组_二个时问点的TNF—a含量[分别为（76．803±18．325）pg／ml、（85．511±13．334）pg／ml、（86．831±9．232）pg／m1]，与正常对照组（24．304±6．511）pg／ml、假手术组[3h、24h、72hTNF-a含最分别为（24．928±3．792）pg／ml、（27．533±5．362）pg／ml、（29．366±5．874）pg／m1]比较，差异均有统计学意义（P均〈0．01），眼针组3h、24h、72h的TNF．a含馆[分别为（40．185±3．335）pg／ml、（48．523±7．687）pg／ml、（51．611±6．403）pg／m1]，分别与缺血再灌注模型组三i个时间点比较均有统计学意义（P均〈0．01）。结论眼针可明显改善人鼠脑缺血再灌注损伤，其机制可能与降低大鼠血清TNF-a仪含量有关。