辽宁中医药大学亚洲留学生“生物化学”教学的实践与体会

来自亚洲国家的留学生,在文化上存在一些联系,但又有不同,在学习必修课程《生物化学》上存在一定难度。文章就如何兼顾不同留学生的学习背景、保证教学质量为出发点,在实践中总结出从学习目的、授课形式、实验教学及考评形式等多方面促进其知识掌握的方法。

中医院校生物化学分级实验教学模式的研究

总结了生物化学实验改革中的探索经验,提出了在中医院校建立生物化学分级实验教学模式,把实验内容分成基本实验技术、综合性和设计性实验三个部分。不同级别实验采用不同教学方式,改变以往完全以教师为主体的教学方式,激发学生学习的主动性和积极性,使学生在实验过程中,建立完善的学科知识与技能体系。

中医院校生物化学实验考核方法的改革和探索

基于中医院校生物化学实验课存在的主要问题,提出对生物化学实验课进行考核改革的必要性,并通过介绍教研室生物化学实验课考试方法改革的实践情况和实施生物化学实验课考核的内容和评分标准,为探索在中医院校生物化学实验课教学中实施标准化考核的具体实施方案提供实践基础。

中医药院校生物化学和分子生物学课程整合的设想和探索

生物化学是包括医学在内的所有生命科学的基础课程，特别在20世纪50年代Watson和Crick揭示了遗传信息携带者DNA的双螺旋结构，标志着生物化学发展进入分子生物学时期之后，更成为生命科学领域的带头学科。医药学、农学、生物学等各学科的研究都进入了分子水平，都要应用生物化学与分子生物学的理论和实验方法，例如：核酸杂交技术、分子克隆技术、生物芯片技术及蛋白质组技术等。随着近代医学的发展，

生物化学绪论教学中激发学生学习兴趣的实践

为了扭转学生在初学生物化学时的抵触、畏难的情绪,增强其学习动力,以绪论讲授作为切入点,研究探索出一套有效的、操作性强的方法,使学生在绪论讲授过程中明确学习目的,激发学生的学习兴趣。

中医药院校开展生物化学课程双语教学的体会

随着科学的进步和发展，本世纪已经进入了信息化、科技化和国际社会化的时代，社会改革深入发展对专业人才的要求不断提高，要求专业人才能熟练地用英语作为工具顺利地获取和交流专业信息。在这种形势下，全国各高等院校一方面对专业英语教学给予充分的重视：另一方面积极开展专业课的双语教学工作．培养了具有较高专业英语水平的专业人才，以适应时代发展的需要。教育部也于2001年颁发了《关于加强高等学校本科教学工作提高教学质量的若干意见》，

在大学生创新计划中培养学生科研能力的探讨

在执行大学生创业计划过程中,不论是指导教师,还是团队中的学生都会遇到一些新问题,如何及时高效地解决这些问题,进而不断完善创新计划实施的成果,这就要求师生共同努力,不断总结经验,提高大学生的综合素质,以达到培养创新性人才的目的。

培土生金法对脾虚哮喘大鼠模型水通道蛋白5表达的影响

目的观察培土生金法对脾虚哮喘大鼠模型肺组织水通道蛋白5(AQP5)表达的影响,探讨脾虚对哮喘气道黏液高分泌形成的影响及培土生金法对其的调控作用。方法 50只健康雄性Wistar大鼠,随机分为5组:对照组、脾虚哮喘组、哮喘组、脾虚哮喘治疗组、哮喘治疗组,每组10只。采用RT-PCR测定大鼠肺组织AQP5 mRNA表达水平,采用免疫组化测定肺组织AQP5蛋白表达水平。结果脾虚哮喘组、哮喘组与对照组比较,脾虚哮喘组与哮喘组比较,大鼠肺组织AQP5 mRNA和蛋白表达水平均显著降低(P<0.01)。脾虚哮喘治疗组与脾虚哮喘组比较,哮喘治疗组与哮喘组比较,肺组织AQP5 mRNA和蛋白表达水平均显著升高(P<0.01)。结论培土生金法能够升高脾虚哮喘和哮喘时肺组织AQP5 mRNA和蛋白表达水平。

补脾益气方对脾虚哮喘大鼠肺组织黏蛋白5AC表达的影响

目的观察补脾益气方治疗前、后的脾虚哮喘大鼠黏蛋白(mucin,MUC)5AC表达的变化,旨在探讨补脾益气方对脾虚哮喘气道黏液高分泌的影响。方法 50只W istar雄性大鼠,按照随机数字法分为5组:对照组、脾虚哮喘组、哮喘组、脾虚哮喘治疗组和哮喘治疗组,每组10只。采用ELISA测定支气管肺泡灌洗液(BALF)中MUC5AC含量,采用RT-PCR测定肺组织MUC5AC的mRNA表达水平。结果脾虚哮喘组和哮喘组大鼠BALF中MUC5AC含量和肺组织MUC5AC表达均显著升高,和对照组比较差异显著(P<0.01)。并且和哮喘组相比较,脾虚哮喘组BALF中MUC5AC含量和肺组织MUC5AC表达显著升高(P<0.01)。和脾虚哮喘组比较,脾虚哮喘治疗组BALF中MUC5AC含量和肺组织MUC5AC表达显著降低(P<0.01),和哮喘组比较,哮喘治疗组BALF中MUC5AC含量显著降低(P<0.01)。结论脾虚哮喘大鼠肺组织MUC5AC表达进一步升高,BALF中的MUC5AC含量进一步增加,补脾益气方能够使其不同程度逆转。

培土生金法对脾虚哮喘模型大鼠NF-κB表达的影响

目的观察培土生金法对脾虚哮喘模型大鼠TNF-α/NF-κB信号通路变化的影响,探讨培土生金法干预哮喘气道炎症和黏液高分泌的信号转导机制。方法健康雄性Wistar大鼠50只,随机分成5组:对照组、脾虚哮喘组、哮喘组、脾虚哮喘治疗组和哮喘治疗组,每组10只。采用ELISA试剂盒法测定血清和BALF中TNF-α的含量,采用免疫组化测定大鼠肺组织NF-κBp65的表达和入核率。结果脾虚哮喘组和哮喘组血清和BALF中TNF-α含量及大鼠支气管上皮细胞中NF-κBp65阳性表达均显著升高,和对照组比较差异显著(P<0.01);但是脾虚哮喘组和哮喘组比较,血清和BALF中TNF-α含量无显著性差异。与哮喘组比较,脾虚哮喘组大鼠支气管上皮细胞中NF-κBp65入核率显著增加(P<0.01)。和脾虚哮喘组比较,脾虚哮喘治疗组血清和BALF中TNF-α含量及肺组织NF-κBp65入核率显著降低(P<0.01);和哮喘组比较,哮喘治疗组血清和BALF中TNF-α含量及肺组织NF-κBp65入核率显著降低(P<0.01)。结论培土生金法能够降低脾虚哮喘和哮喘大鼠血清和BALF中TNF-α的含量和肺组织NF-κBp65入核率。

知母总皂苷对β-淀粉样蛋白诱导PC12细胞凋亡的抑制作用

目的探讨知母总皂苷对于β-淀粉样蛋白(Aβ)诱导的PC12细胞凋亡的保护作用。方法采用10、20、30、40μmol/L Aβ25～35分别刺激PC12细胞24、36、48、72 h,通过MTT法测定出最佳的刺激浓度为20μmol/L和时间为48 h用于后期的实验。用0.05、0.25、0.5、2.5、5、10、15、20 mg/L的知母总皂苷和20μmol/L Aβ25～35共同作用PC12细胞48 h,MTT测定出其细胞活力的改变,选定最佳知母总皂苷浓度0.5 mg/L用于实验。实验分为:空白组,正常组,模型组,知母治疗组。通过倒置相差显微镜观察各组细胞的形态和成长情况,MTT比色法检测细胞活力,流式细胞仪检测细胞凋亡率,荧光显微镜观察细胞凋亡的形态变化。结果 MTT法显示不同时间,不同浓度的Aβ25～35处理细胞后细胞均有不同程度的凋亡,并成剂量依赖关系。不同浓度的Aβ25～35其最大抑制率均在48 h。用不同浓度的知母总皂苷预保护PC12细胞,可抑制Aβ25～35诱导的凋亡,0.5 mg/L效果最为显著,与模型组有显著性差异(P<0.01),流式细胞仪检测凋亡率和荧光显微镜观察均能显著抑制Aβ25～35对于PC12细胞的凋亡的作用(P<0.01)。结论 Aβ25～35能诱导PC12细胞凋亡,知母总皂苷对其诱导的细胞凋亡具有明显的保护作用。

藏花素对H_2O_2诱导PC12细胞Bcl-2、Bax和Caspase-3的影响

本文通过观察藏花素对H2O2诱导的PC12细胞的保护作用和对Bcl-2、Bax和Caspase-3的影响,探讨藏花素对阿尔茨海默病细胞模型保护作用的机制。MTT法及LDH活性测定观察藏花素对PC12细胞模型的影响,RT-PCR检测Bcl-2、Bax和Caspase-3 mRNA表达水平,Western blot检测Bcl-2、Bax和Caspase-3的蛋白表达。藏花素预保护浓度在0.625μM和5μM之间,细胞存活率随着藏花素浓度的升高而升高;藏花素组和VE组与模型组相比,Bcl-2 mRNA和蛋白表达增加(P<0.05),Bax和Caspase-3 mRNA和蛋白表达降低(P<0.05)。研究结果表明:藏花素可能是通过上调Bcl-2的表达,从而介导PC12细胞发挥抗氧化和细胞凋亡的生物学功能。

知母总皂苷对Aβ2535诱导的PC12细胞Bax表达的影响

目的观察知母总皂苷对Aβ25~35诱导PC12细胞凋亡及凋亡相关基因Bax表达的影响。方法培养PC12细胞,实验分为6组:正常组、模型组、知母低剂量组、知母中剂量组、知母高剂量组、西药组。20μmol/L Aβ25~35作用PC12细胞48 h,诱导其凋亡。采用流式细胞仪检测各组细胞凋亡率的变化;采用RT-PCR检测各组细胞中Bax mRNA表达水平的变化;采用Western印迹技术检测各组细胞中Bax蛋白的表达水平的变化。结果和模型组比较,知母总皂苷能显著降低Aβ25~35诱导的凋亡(P<0.05),能显著性降低凋亡基因Bax mRNA和蛋白的表达水平(P<0.05)。结论知母总皂苷能降低Aβ25~35诱导的PC12细胞凋亡率,其机制可能是降Bax mRNA及蛋白表达水平。

苦荞麦提取物对糖尿病大鼠肾脏糖基化反应的影响及机制

目的观察苦荞麦提取物对链脲佐菌素(STZ)诱导的糖尿病大鼠糖基化反应的影响。方法 STZ诱导建立糖尿病大鼠模型,然后分别给予苦荞麦高、中、低200,100,50 mg·kg-1·d-1剂量和氨基胍100 mg·kg-1·d-1治疗12 w。采用荧光分光光度法测定肾脏组织中糖基化终末产物(AGEs)及硫化巴比妥酸反应物(TBARS)含量;采用免疫印迹法测定肾脏组织中糖基化终末产物受体(RAGE)的蛋白表达水平。结果与正常组比较,模型组肾脏组织中AGEs含量及TBARS含量均显著升高,肾脏组织中RAGE的蛋白表达水平显著升高;与模型组比较,苦荞麦各剂量组及氨基胍组肾脏组织中AGEs含量及TBARS含量均显著降低,以苦荞麦高剂量组下降最明显(P<0.01);苦荞麦各剂量组及氨基胍组肾脏组织中RAGE的蛋白表达水平亦降低,以苦荞麦高剂量组下降明显(P<0.01)。结论苦荞麦能够抑制糖尿病大鼠体内的糖基化反应,并且随着苦荞麦剂量的增加,抑制作用更加明显。

网络微视频与线上教学相结合在高校教学活动中的探索

网络微视频作为一种新兴媒介,被应用于线上教学,能够激发学习兴趣,给学生留下深刻的印象,达到增强教学效果的目的,是一种同时能被师生所接受的有效教学辅助形式。文章从网络微视频应用于高校线上教学的优势,网络微视频的搜集、筛选与制作,在教学活动中植入网络微视频的方式,以及在实践过程中应注意的问题等方面进行探讨。

知母总皂苷对阿尔茨海默病细胞模型的保护作用

[目的]探讨知母总皂苷对Aβ25-35诱导PC12细胞凋亡的保护作用。[方法]用10～40μMAβ25-35分别刺激PC12细胞48h,MTT法测定细胞活力改变。分组:正常组,模型组,知母保护组。用0.5～40mg/L知母总皂苷和20μMAβ25-35共同作用PC12细胞48h,倒置相差显微镜观察各组细胞形态变化,MTT测其活力改变。[结果]MTT法显示不同浓度Aβ25-35可引起不同程度凋亡,成剂量依赖关系。不同浓度知母总皂苷保护PC12细胞,可抑制这种凋亡,5～20mg/L效果显著(P<0.01)。[结论]Aβ25-35能诱导PC12细胞凋亡,知母总皂苷对其诱导的细胞凋亡有明显保护作用。

羟苯磺酸钙联合前列地尔对早期糖尿病肾病患者血管内皮功能的影响

目的:研究羟苯磺酸钙联合前列地尔治疗早期糖尿病肾病(DN)患者的血管内皮功能、舒缩功能的影响,并评估其临床疗效,记录不良反应。方法:收集来我院就诊的早期DN患者84例,分为对照组与观察组各42例。两组均降糖治疗(二甲双胍等)+改善循环(羟苯磺酸钙),观察组在此基础上给予前列地尔,两组均连续治疗1个月。检测治疗前后两组空腹血糖(FBG)、餐后2小时血糖(2 hPBG)、一氧化氮(NO)、内皮素-1(ET-1)、血管内皮生长因子(VEGF)、肱动脉血流介导的内皮依赖性血管舒张功能(FDM)、硝酸甘油所介导的非内皮依赖性血管舒张功能(NMD)、肾小球滤过率(GFR)、血清肌酐(Cr)、血清尿素氮(BUN)、尿微量白蛋白肌酐比值(UACR)、醛固酮排泄率(AER)、尿蛋白排泄率(UAER),记录治疗过程中的不良反应。结果:治疗后两组FBG、PBG均低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后两组FBG、PBG比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后两组的ET-1、VEGF均低于治疗前,且观察组的ET-1、VEGF均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),治疗后两组NO均高于治疗前,且观察组NO高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗后两组FDM、NDM均高于治疗前,且观察组FDM、NDM高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);治疗后两组GFR、Cr、BUN、AER、UACR、UAER均低于治疗前,且观察组上述指标均低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。治疗过程中两组均未发生严重不良反应(AEs),仅出现轻度胃肠道反应、皮疹、干咳等,且两组发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论:在早期DN患者在降糖、改善循环的治疗基础上加用前列地尔能很好改善血管内皮功能,提高临床疗效,安全可靠。

钙离子信号通路对肾虚型阿尔茨海默病作用机制转录组学研究

目的针对肾虚型阿尔茨海默病小鼠与对照组小鼠的对比转录组学研究,分析肾虚型阿尔茨海默病小鼠病理机制相关通路及基因差异表达情况,探讨相关病理机制。方法设置正常组与肾虚阿尔茨海默病模型组,Illumina Hi Seq TM平台检测模型组小鼠基因转录组学差异表达,通过功能注释以及富集分析模型组小鼠基因测序情况,筛选出与肾虚阿尔茨海默病病理机制相关的基因以及代谢途径。根据转录组学结果,采用Real-time PCR方法对参与病理机制形成的信号通路中差异表达基因进行量化。结果通过GO、KEGG富集结果分析,肾虚阿尔茨海默病病理机制主要涉及ECM-receptor interaction、Protein digestion and absorption、Pancreatic secretion、Calcium signaling pathway、Cell adon molecules等信号途径。肾虚型阿尔茨海默病模型组对比对照组差异基因一共1765个,其中肾虚阿尔茨海默病组1219个基因表达上调,546个基因表达下调;Real-time PCR法对致病小鼠海马转录组数据库关键基因进行转录丰度验证结果显示,钙离子信号通路中Camk2a、IP3R、Calm13个基因在小鼠海马组织中均有表达,且表达量比值趋势与转录组表达趋势一致。结论通过对肾虚阿尔茨海默病小鼠的转录组学研究结果及Real-time PCR验证分析,肾虚阿尔茨海默病涉及的病理机制较多,肾虚阿尔茨海默病模型组小鼠海马神经元内Camk2a表达下调,IP3R、Calm1表达上调,可以说明肾虚阿尔茨海默病的病理机制可能与钙离子信号通路表达异常有关。

补脾益气方对脾虚哮喘大鼠肺组织Toll样受体4表达的影响

目的:观察补脾益气方对脾虚哮喘大鼠模型肺组织Toll样受体4(TLR4)表达的影响,探讨脾虚对哮喘大鼠气道炎症影响机制及补脾益气方对其的调控作用。方法:36只健康雄性Wistar大鼠,随机分为3组:对照组、脾虚哮喘组、脾虚哮喘治疗组,每组12只。采用RT-PCR检测大鼠肺组织TLR4 mRNA表达水平;采用免疫组化检测大鼠肺组织TLR4的蛋白表达水平。结果:和对照组比较,脾虚哮喘组大鼠肺组织TLR4 mRNA和蛋白表达水平显著增高(P<0.01);和脾虚哮喘组比较,脾虚哮喘治疗组大鼠肺组织TLR4 mRNA和蛋白表达水平显著降低(P<0.01)。结论:脾虚哮喘组大鼠肺组织中TLR4 mRNA及蛋白表达水平显著增高,补脾益气方能够降低脾虚哮喘大鼠肺组织中TLR4 mRNA和蛋白表达水平。

补脾益气方对哮喘模型大鼠肺组织核因子Kappa B抑制剂的激酶β表达的影响

目的:探讨补脾益气方对哮喘模型大鼠肺组织核因子Kappa B(NF-κB)抑制剂的激酶β(the kinase of nuclear fac-tor-kappa B inhibitor β,IKKβ)的调控作用及对白介素8(IL-8)含量的影响。方法:SPF级雄性Wistar大鼠随机分为对照组(A)、哮喘组(B)、补脾益气方治疗组(C)。卵蛋白致敏和激发复制出哮喘模型,按照10 g.kg-1体重给予C组大鼠中药ig 1次/d,共21d。采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测肺组织IKKβ的mRNA表达水平,采用免疫组化检测肺组织IKKβ的蛋白表达水平,采用酶联免疫吸附法(ELISA)测定支气管肺泡灌洗液IL-8的含量。结果:①肺组织IKKβ的mRNA的表达:B组显著高于A组(P<0.01);C组显著低于B组(P<0.05)。②肺组织IKKβ的蛋白表达水平:B组显著高于A组(P<0.01);C组显著低于B组(P<0.01)。③肺泡灌洗液IL-8含量:B组显著高于A组(P<0.01);C组显著低于B组(P<0.01)。结论:哮喘组大鼠肺组织IKKβmRNA和蛋白的表达水平显著增强,补脾益气方能有效抑制其表达,降低肺泡灌洗液IL-8含量,证明补脾益气方能有效抑制IKKβ信号转导的途径。