巴戟天不同炮制品对肾阳虚不育大鼠改善作用研究

目的:观察巴戟天不同炮制品对于用腺嘌呤灌胃诱导的肾阳虚不育大鼠的比较研究,综合评价巴戟天不同炮制品中盐巴戟对生殖功能低下大鼠的改善作用。方法:使用腺嘌呤复制大鼠的肾阳虚模型,用ELISA法测定大鼠血清中促卵泡刺激素(FSH)、促黄体生成素(LH)、睾酮(T)、促性腺释放激素(GnRh)、雌二醇(E2)、肌酐(Cr)的含量,计算肾脏、睾丸、精囊腺脏器系数。用HE染色法观察睾丸和肾脏的组织病理形态,免疫组化染色法(SABC法)测定大鼠睾丸中细胞色素P-19(CYP19)和芳香化酶P450(P450arom)蛋白表达。结果:CYP19和P450arom在大鼠睾丸间质细胞质中均有表达,巴戟天不同炮制品均能使P450arom、CYP19蛋白表达得到不同程度增高与降低。在血清激素水平方面,各给药组均能提高FSH、LH、T、GnRh的含量,降低E2、Cr的含量,其中以盐巴戟的治疗效果最为明显。结论:巴戟天具有较好的补肾壮阳作用,对生殖功能低下的大鼠具有改善作用,且不同炮制品具有显著差异,其中盐巴戟的疗效最佳。本实验结果可为临床合理使用巴戟天不同炮制品提供科学依据。

UPLC-QQQ-MS/MS法比较研究不同片型何首乌饮片水提液中核苷类成分的含量

目的:建立UPLC-QQQ-MS/MS法比较研究不同片型何首乌饮片水提液中尿嘧啶、尿苷、鸟苷、黄嘌呤等核苷类成分的含量。方法:采用Waters BEH C_(18)(50 mm×2.1 mm,1.7μm)色谱柱,以乙腈(A)-0.1%甲酸水(B)为流动相进行梯度洗脱,流速:0.4 ml·min^(-1),进样量:3μl,电喷雾离子源(ESI),正离子多反应监测模式(MRM)对何首乌传统片和微型片水提液中6个核苷类成分含量进行检测分析。结果:何首乌微型片水提液中核苷类成分含量明显高于传统片水提液。何首乌中主要含有尿嘧啶、尿苷、腺嘌呤、鸟苷、肌苷、黄嘌呤等6种核苷类成分。该6种核苷成分在测定质量浓度范围内线性关系良好(r≥0.9991),方法精密度、重复性和稳定性的RSD均小于3.0%,平均加样回收率在98.9%~102.5%,RSD在1.9%~2.7%(n=6)。结论:何首乌切制成微型片较传统片更有利于有效成分的煎出和提取。同时,该试验检测方法准确、可靠,适用于何首乌饮片中核苷类成分的含量测定与质量控制。

UPLC-MS法测定酸枣仁炮制前后的12种成分

目的测定不同来源酸枣仁在炒制前后斯皮诺素、6'''-阿魏酰斯皮诺素、酸枣仁皂苷A、酸枣仁皂苷B、白桦脂酸、当药黄素、柚皮苷、异槲皮苷、芦丁、槲皮素、阿魏酸、异牡荆苷等12种成分的含量。方法采用UPLC-MS技术,以乙腈(A)-水(B)为流动相,经Waters Acquity UPLC BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm)梯度洗脱,流速0.3 mL·min^(-1),柱温30℃,样品室温度8℃,进样量1.0μL。离子源用负离子模式进行扫描采集,用MRM模式监测。结果12种成分在相应的进样量范围内线性关系良好,r^(2)≥0.9990,方法精密度、重复性、稳定性的RSD值均小于2.0%,平均加样回收率为98.37%~101.34%,RSD为0.49%~2.82%。结论所用方法快速、准确,可用于酸枣仁生品及炮制品的质量评价,为优化酸枣仁的炮制工艺提供了依据。

基于Illumina MiSeq高通量测序分析黄芪内生真菌的多样性

目的：分析黄芪内生真菌群落多样性,为筛选菌种进行发酵炮制转化黄芪中活性成分的定向炮制工艺研究提供参考依据。方法：应用Illumina MiSeq高通量测序技术测定黄芪内生真菌的18S rDNA NS1-Fung区域序列并进行物种丰度等生物信息分析。结果：获得有效序列29 677条,操作分类单元188个,测序数量接近于饱和,测序数据量合理。黄芪内生真菌主要分布于驼孢锈菌属（Hemileia）,赤霉菌属（Gibberella）,粪盘菌属（Ascobolus）,假裸囊菌属（Pseudogymnoascus）和曲霉属（Aspergillus）共5个属。结论：黄芪内生真菌群落多样性较低,Hemileia和Gibberella是黄芪内生真菌的优势种群。