基于细胞凋亡和细胞周期研究荆芥总黄酮对Caco-2细胞的影响

目的:通过体外药效评价实验研究荆芥总黄酮对人结肠癌细胞Caco-2的影响。方法:不同浓度荆芥总黄酮作用Caco-2细胞24、48、72 h,检测其对Caco-2细胞增殖的影响,荆芥总黄酮配成低(0.3 mg/m L)、中(0.9 mg/m L)、高(2.5 mg/m L)浓度,作用Caco-2细胞48 h后,流式细胞仪分析细胞周期及凋亡情况。结果:随着药物浓度的升高及作用时间的延长,其对Caco-2细胞的增殖抑制率呈上升趋势。与空白对照组比较,荆芥总黄酮各组凋亡细胞比例显著升高,细胞分裂周期的各时相所占的比例也发生了改变,其中G0/G1期、S期降低比例显著升高,G2/M期比例显著降低。结论:荆芥总黄酮对Caco-2细胞具有一定的增殖抑制作用。可通过诱导细胞凋亡、抑制肠癌细胞从G0/G1期向S期转化,’加S期细胞比例以延长肿瘤细胞的分裂周期,从而抑制肿瘤细胞的增殖。

基于微流控芯片技术的荆芥诱导肺肿瘤细胞凋亡谱效关系研究

为了进一步全面地阐明荆芥药材乙醇提取物中主要发挥抗肺癌作用的化学组成,本文基于微流控芯片技术开展不同产地荆芥药材乙醇提取物的体外抗肺肿瘤药效学研究,并通过HPLC方法建立9种不同产地荆芥药材乙醇提取物的指纹图谱,将药效指标与指纹图谱的相关信息通过灰色关联度软件进行谱效关系分析,采用HPLC-Q-TOF/MS的技术手段对其进行快速分析与鉴定。结果显示,关联系数较大的色谱峰中第19、6、16、11、18号峰所代表的化合物为香叶木素、木犀草苷、木犀草素、橙皮苷、芹菜素;第10、12、20号峰可能为柚皮素-7-O-葡萄糖醛酸苷或槲皮苷、迷迭香酸甲酯或异鼠李素-3-木糖苷、5,7-二羟基-6,4-二甲氧基黄酮。该研究进一步明确了荆芥中发挥抗肺肿瘤作用的主要化学组成,为荆芥药材的质量控制及中药复杂成分的药效物质基础研究提供方法学探讨和实验依据。

基于3D微流控芯片分析鸡血藤总鞣质对宫颈癌细胞HeLa的药理作用

目的:研究鸡血藤总鞣质的化学成分,并分析该有效部位对宫颈癌细胞HeLa的药效与作用机制,为鸡血藤抗宫颈癌提供实验依据。方法:运用UPLC-Q-TOF/MS对鸡血藤鞣质类化学成分进行定性分析。将不同质量浓度的鸡血藤总鞣质作用于宫颈癌细胞HeLa,通过3维(3D)微流控芯片筛选合适的给药浓度及时间。运用流式细胞仪测定鸡血藤总鞣质对宫颈癌细胞HeLa周期与凋亡的影响,分别应用Flow Jo v10. 0. 7及ModFit LT 3. 2软件进行分析。采用酶联免疫吸附测定(ELISA)测定经鸡血藤总鞣质作用后,宫颈癌细胞HeLa上清液中血管内皮生长因子-A(VEGF-A)与半胱天冬酶-3(Caspase-3)因子的含量变化。结果:鉴定并推断了鸡血藤总鞣质中15种成分。最终确定鸡血藤总鞣质低、中、高给药质量浓度分别为0. 5,1. 0,2. 0 g·L^-1,36 h为最佳给药时间。经鸡血藤总鞣质作用后宫颈癌细胞HeLa早凋与晚凋比例明显增加,宫颈癌细胞HeLa DNA合成前期(G0/G1期)明显增加,DNA合成期(S期)与DNA合成后期(G2/M期)减小。经鸡血藤总鞣质作用后,宫颈癌细胞HeLa上清液中VEGF-A因子显著降低,Caspase-3因子显著增加。结论:鸡血藤中含有丰富的鞣质类成分,此类成分对宫颈癌细胞HeLa有明显的抑制其增殖并促进其凋亡的作用,为该有效部位的后续研究与开发提供了实验依据。