银翘散精简方、玉屏风散提取物在鸡胚中抗甲型流感病毒FM1株阻断与抑制作用研究

目的观察银翘散精简方、玉屏风散提取物在鸡胚内抗病毒阻断和抑制的作用。方法采用鸡胚实验技术观察银翘散精简方、玉屏风散提取物对甲型流感病毒FM1株的阻断和抑制作用。结果流感病毒鸡胚半数感染量EID50为10-6;银翘散精简方、玉屏风散提取物对鸡胚最大无毒浓度分别为大于39.15、36.2g/L,利巴韦林最大无毒剂量为100g/L。银翘散精简方提取物对甲型流感病毒FM1株毒力阻断作用:半数有效量(ED50)为7.41g/L,治疗指数(TI)大于5.28,浓度为19.58g/L时鸡胚未感染率为100%,优于其他浓度(P<0.05);银翘散精简方提取物对甲型流感病毒FM1株毒力抑制作用:ED50为9.91g/L,TI大于3.95,浓度为39.15g/L时鸡胚未感染率为100%,优于其他浓度(P<0.05)。玉屏风散提取物对甲型流感病毒FM1株毒力阻断作用:ED50为9.57g/L,TI大于3.78,浓度为36.2g/L时鸡胚未感染率为100%,优于其他浓度(P<0.05);玉屏风散提取物对甲型流感病毒FM1株毒力抑制作用:ED50为10.38g/L,TI大于3.3,浓度为36.2g/L和18.1g/L时(两者毒力抑制作用均等)鸡胚未感染率为83%,优于浓度9.05g/L(P<0.05)。提取物在鸡胚死亡阻断观察上,在对毒力阻断作用时玉屏风散提取物优于银翘散精简方提取物,在对毒力抑制作用时银翘散精简方提取物优于玉屏风散提取物。各提取物对甲型流感病毒FM1株毒力阻断和抑制作用优于利巴韦林组(P<0.05)。结论银翘散精简方、玉屏风散提取物对甲型流感病毒FM1株有阻断和抑制作用。

甲型流感病毒FM1株诱导感染不同鼠龄小鼠肺炎模型比较

目的评价昆明种小鼠哪一鼠龄段为甲型流感病毒FM1株最佳模型。方法 150只清洁级昆明种小鼠,雌雄各半,鼠龄均等,分为幼龄模型组(40只)、成龄模型组(40只)、老龄模型组(40只)、幼龄正常组(10只)、成龄正常组(10只)、老龄正常组(10只),观察小鼠状态,分别于感染3、5、7d,检测其肺湿质量、肺组织肉眼病理评分、肺组织病理切片以及肺组织FQ-PCR病毒载量。结果幼龄模型组14d内死亡最多,整体状态最差,肺部病变最为严重,肺组织病毒载量呈递增趋势。成龄模型组14d内死亡最少,整体状态最好,肺部病变少,肺组织病毒载量无复制的现象。老龄模型组整体状态在第3天出现肺组织病变,但之后有恢复的趋势,第5天后,病毒载量呈下降趋势。结论幼龄昆明种小鼠为甲型流感病毒最佳理想模型。

双表法对流感病毒感染小鼠肺组织TLR4-MyD88-NF-κBP65蛋白表达的影响

目的观察双表法对流感病毒感染小鼠肺组织TLR4-MyD88-NF-κB P65蛋白表达的影响,探讨双表法对流感病毒的防治机制。方法以流感病毒FM1鼠肺适应株滴鼻感染昆明种小鼠,并用解表法(银翘散)、固表法(玉屏风散)、双表法(玉屏风+银翘散)、阳性对照药(利巴韦林)干预相应组别小鼠。在感染病毒后5d采用SABC免疫组织化学染色法检测肺组织TLR4-MyD88-NF-κB P65蛋白表达情况。结果正常组和模型组肺组织中均可检测到TLR4-MyD88-NF-κB P65蛋白表达,但模型组明显高于正常组(P<0.05)。双表法组TLR4-MyD88-NF-κB P65蛋白表达最低,与解表法组、固表法组、利巴韦林组比较有显著性差异(P<0.05)。结论流感病毒感染小鼠时激活了TLR4-MyD88-NF-κB P65信号通路,双表法能较好的抑制TLR4-MyD88-NF-κB P65蛋白表达,且优于解表法、固表法及利巴韦林。

HPLC法同时测定儿童清热口服颗粒剂中3种有效成分的含量

目的探讨高效液相色谱法(HPLC)同时测定儿童清热口服颗粒剂中3种有效成分的含量,为临床合理用药提供依据。方法儿童清热口服颗粒剂,批号:14262461、14261321、14261877,采用HPLC法,色谱条件为:Kromasil C18色谱柱(4.6 mm×250 mm,5μm);流动相:乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱,设定流速为1.0 ml/min;柱温为28℃;选择波长切换法在其最大吸收波长部位检测绿原酸(波长327 nm)、芍药苷(波长230 nm)及黄芩苷含量(波长280 nm)。结果儿童清热口服颗粒剂中,14262461批号绿原酸含量为2.350 mg/g,芍药苷含量0.7152 mg/g,黄芩苷含量3.7025 mg/g;14261321批号绿原酸含量为2.172 mg/g,芍药苷含量0.8571 mg/g,黄芩苷含量3.853 mg/g;14261877批号绿原酸含量为2.639 mg/g,芍药苷含量0.7934 mg/g,黄芩苷含量4.152 mg/g。结论HPLC法用于儿童清热口服颗粒剂中3种有效成分含量测定,具有简便、快速、准确等优点,可用于儿童清热口服颗粒剂的质量控制。