大鼠心肌缺血再灌注心功能变化与JAK-STAT信号通路相关性研究

目的观察JAK-STAT信号通路在离体大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤过程中激活的时程及意义。方法采用Langendorff离体灌流模型,将42只雄性Wistar大鼠随机分为7组:对照组:用改良的KH液持续灌流180min;I/R组:按再灌注时间分为R0、R5、R15、R30、R60、R120 6组,用改良的KH液灌流平衡30 min后,全心停灌30 min,分别再灌注0、5、15、30、601、20 min。连续监测左室舒张压(LVDP)、左室压力最大升降速率(+dp/dtmax)以评价心功能,免疫印记法检测再灌注不同时程磷酸化的信号转导与转录激活子-1(STAT1)、STAT3蛋白表达的变化。结果与对照组相比,再灌注120 min时,LVDP从(96.0±7.4)mm Hg降至(46.2±3.8)mm Hg,+dp/dtmax从(2002±215)mm Hg降至(642±124)mm Hg(P<0.01)。再灌注各时程STAT1、STAT3均处于激活状态,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.01),但二者表达存在时间差异,p-STAT1在缺血30 min增高不明显,再灌注过程中处于显著激活状态(P<0.01);p-STAT3在缺血30 min即明显升高(P<0.01),而再灌注期未见进一步升高(P>0.05),p-STAT1/p-STAT3与LVDP及+dp/dtmax呈明显的相关性(r=-0.894,r=-0.886,P<0.001)。结论JAK-STAT信号通路参与了心肌I/R损伤,磷酸化的STAT1与STAT3的比值可能决定了再灌注损伤的严重程度。

脂多糖对人甲状腺细胞钠/碘转运体的基因调节作用

目的探讨脂多糖(LPS)对体外培养人甲状腺细胞一氧化氮(NO)的诱生作用及对细胞膜上钠/碘转运体(NIS)基因表达的影响。方法采用细胞培养方法及半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,观察不同浓度LPS对甲状腺细胞NO的诱生作用及对NIS mRNA表达的影响。结果(1)LPS(1、10、100μg/mL)剂量依赖性刺激体外培养人甲状腺细胞产生NO和抑制NIS的表达。结论LPS可抑制甲状腺细胞膜上NIS的基因表达,可能与LPS诱生甲状腺细胞产生NO有关。

不同年龄段大鼠脂肪间充质干细胞生物学特性的研究

目的观察不同年龄段大鼠脂肪间充质干细胞(adipose-derived stromal cells,ADSCs)生物学特点与年龄的关系,为临床寻找理想的种子细胞并迅速获取所需ADSCs提供实验依据。方法使用密度梯度离心法分离不同年龄段脂肪间充质干细胞进行培养,保留贴壁细胞传代,分析脂肪间充质干细胞的纯度,观察细胞生长情况,检测其增殖活性、细胞周期。结果不同年龄段ADSCs均贴壁生长,呈典型ADSCs形态和生长特征,传代细胞的增殖速度比原代细胞快,但随着年龄的增长,原代及传代培养ADSCs的增殖能力下降,生长周期延长。结论ADSCs的增殖能力和活性随着年龄的增长而降低,但各年龄段ADSCs均可满足临床不同患者组织工程种子细胞的要求。

葛根素对糖尿病大鼠心肌损伤的影响

目的:探讨葛根素对糖尿病大鼠心肌的形态结构、功能及NF-κB表达的影响。方法:以45mg/kg剂量一次性尾静脉注射链脲佐菌素建立SD大鼠实验性糖尿病模型。应用葛根素(40mg/kg.d、80mg/kg.d)腹腔注射治疗8周后,测定各组大鼠血糖、血清LDH、CK含量及心肌组织SOD活性、MDA含量,检测心功能,应用光镜、电镜观察大鼠心肌形态结构,免疫组化方法观察心肌组织NF-κB表达情况。结果:与糖尿病模型组比较,葛根素治疗组大鼠血糖水平稍降,血清LDH、CK含量及心肌组织MDA含量显著降低,而高剂量组SOD活性明显增强,左心室功能、心肌形态结构尤其是超微结构明显改善,心肌组织NF-κB阳性表达明显减少。结论:葛根素对糖尿病大鼠心肌具有一定的保护作用,能明显改善心功能和心肌超微结构,可能与其减弱糖尿病大鼠心肌过氧化损伤及减少心肌组织NF-κB阳性表达有关。

芒果苷对大鼠骨髓间充质干细胞缺氧损伤的保护作用

目的研究芒果苷对大鼠骨髓间充质干细胞(MSCs)缺氧损伤的凋亡保护机制。方法利用不同浓度的氯化钴(CoCl)建立细胞缺氧模型,检测MSCs凋亡率,获得最佳CoCl2应用浓度;利用不同浓度的芒果苷2(Mangiferin)对CoCl2建立的缺氧损伤模型进行干预,检测其对MSCs缺氧损伤模型的保护作用;通过MTT和Western blot方法分别测定各组细胞中Caspase3、Bcl-2及Bax等凋亡相关基因的蛋白表达情况。结果芒果苷对大鼠MSCs缺氧损伤具有保护作用,呈浓度依赖性;随着芒果苷浓度的增加,大鼠MSCs在缺氧损伤模型下的凋亡率逐步减少(P<0.05)。氯化钴可引起Caspase3、Bax等凋亡相关基因的蛋白表达上调,Bcl-2基因的蛋白表达下调。芒果苷能抑制氯化钴引起的Caspase3、Bax等凋亡相关基因蛋白表达的上调(<0.05)及减少Bcl-2基因蛋白表达的下调(P<0.05)。结论芒果苷对大鼠MSCs缺氧损伤诱发的凋亡具有浓度依赖性保护作用。