17-AAG阻滞HCT-15细胞周期并诱导其凋亡

目的：观察17-AAG对人结直肠癌HCT-15细胞株凋亡和周期及相关分子机制的影响。方法：体外培养HCT-15细胞，分别给予不同剂量的17-AAG及不同作用时间，采用四甲基偶氮唑盐微量酶反应比色法（ MTT法）检测细胞的活力；Annexin V-FITC／PI双标记流式细胞术检测细胞凋亡；流式细胞术检测细胞周期的变化；RT-PCR和Western blotting法检测凋亡和周期相关因子的表达水平。结果：1．25～20 mg／L浓度的17-AAG作用24 h和48 h后对HCT-15细胞有显著抑制作用，且有明显的时间、剂量依赖性；0.425、0.85和1.7 mg／L浓度的17-AAG作用48 h后，各组细胞发生G1期阻滞及明显凋亡，STAT3 mRNA和蛋白的表达水平明显下降，凋亡和周期相关因子cyclin D1 mRNA和蛋白表达水平下调，Cyt C、caspase 9及caspase 3 mRNA和蛋白表达水平上调。结论：17-AAG对人结直肠癌细胞的活力具有明显抑制作用，使细胞周期发生G1期阻滞和细胞凋亡。17-AAG可能通过阻断STAT3通路下调cyclin D1而发生G1期阻滞；17-AAG可能通过阻断STAT3通路启动线粒体凋亡通路来诱导细胞凋亡。