Wnt/β-catenin信号途径促进肌源性干细胞向神经细胞分化

目的探讨Wnt/β-catenin信号途径在肌源性干细胞(muscle derived stem cells,MDSCs)分化过程中的调控作用。方法对照组单纯体外培养MDSCs;实验组采用丙戊酸(valproic acid,VA)诱导培养MDSCs分化为类神经细胞;抑制剂组在实验组的基础上采用Dickkopf-1(DKK-1)和sFRP抑制Wnt/β-catenin信号途径。免疫细胞化学检测各组MDSCs的分化情况。RT-PCR检测MDSCs中Wnt3a mRNA表达的变化,Western blot检测MDSCs中GSK-3β、β-catenin蛋白含量的变化。结果实验组和抑制剂组MDSCs经VA诱导后出现神经细胞分化现象,抑制剂组分化水平明显低于实验组,对照组未见分化。与对照组相比,实验组和抑制剂组Wnt3a mRNA和β-catenin表达水平增加,实验组明显高于抑制剂组。实验组和抑制剂组GSK-3β表达水平低于对照组。结论 MDSCs向类神经细胞分化过程中Wnt/β-catenin信号通路被激活,Wnt/β-catenin信号通路阻断能够部分抑制MDSCs向类神经细胞分化。

PFNA内固定与髋关节置换治疗老年股骨粗隆间骨折的Meta分析

目的通过Meta分析比较PFNA内固定术与髋关节置换术治疗老年股骨粗隆间骨折的疗效。方法计算机检索2004~2012年采用PFNA内固定术与髋关节置换术治疗老年股骨粗隆间骨折的对照性研究文献,语言为中文和英文,根据纳入及排除标准对文献进质量评价和筛选,通过Meta分析对两种不同治疗方法在以下5个方面的治疗效果进行评估,包括术后死亡率、手术相关并发症发生率、术后内科并发症发生率、术后负重时间及术后髋关节Harris功能评分。结果总计8篇对照性研究文献纳入本次研究,758例手术患者,接受PFNA内固定治疗360例,接受髋关节置换治疗398例,Meta分析结果显示,两种不同手术方法治疗老年粗隆间骨折在术后内科并发症发生率及术后髋关节Harris功能评分方面无统计学差异,髋关节置换组的术后死亡率及手术相关并发症的发生率均高于PFNA内固定组,但下床负重时间明显短于PFNA内固定组。结论 PFNA内固定在微创治疗及术后恢复方面有一定优势,两者在术后内科并发症发生率及术后髋关节Harris功能评分方面无明显差别。

骨碎补总黄酮预处理转CNTF成肌细胞修复兔桡骨缺损的效果

目的探讨微囊化骨碎补总黄酮(AFDR)预处理转CNTF成肌细胞修复兔桡骨缺损的效果。方法取前期研究中的低浓度AFDR含药血清联合成骨诱导剂预处理转CNTF成肌细胞进行成骨诱导分化,微囊化处理待移植。24只新西兰大白兔行桡骨缺损造模,根据处置条件随机均分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ组(n=6),Ⅰ组为AFDR预处理转CNTF成肌细胞微囊与负载BMP的HA凝胶组,Ⅱ组为转CNTF基因成肌细胞微囊与负载BMP的HA凝胶组,Ⅲ组为仅负载BMP的HA凝胶组,Ⅳ组为仅注入HA凝胶组,植入后8、12 w取标本大体观察,12 w后组织学染色观察骨缺损愈合情况。结果微囊化细胞存活率良好,不影响药物和转基因细胞的活性;移植后各组实验动物存活良好,未发现全身及骨缺损局部明显的免疫排斥反应。标本大体观察及病理组织HE染色显示Ⅰ、Ⅱ组均能够很好地修复兔桡骨缺损,可见新生骨及大量骨痂形成,而Ⅲ组和Ⅳ组修复后较差。结论中药预处理转染CNTF基因成肌细胞和BMP的复合移植物有较强的骨愈合能力,可为桡骨缺损修复提供更多的材料学基础。

RNA干扰沉默BAX基因抑制大鼠软骨细胞凋亡及其可能机制

目的研究RNA干扰沉默BAX基因表达对经线粒体途径大鼠软骨细胞凋亡的影响。方法体外分离培养SD大鼠软骨细胞;BAX siRNA干扰沉默BAX基因表达。RT-PCR检测BAX mRNA;MTT法检测细胞活力;AnnexinV-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡率;Western blot检测BAX、BCL-2、细胞色素C蛋白的表达。结果 BAX siRNA干扰24 h后,BAX mRNA表达为1.030±0.153,对照组为1.836±0.164;蛋白质的表达为0.359±0.089,对照组为0.766±0.082,实验组较对照组明显下调(P<0.01)。细胞凋亡受到明显抑制,对照组、model组、model+BAXsiRNA组和model+control siRNA组细胞凋亡率分别为2.87%、20.07%、9.21%和21.19%,并且在BAX基因沉默的细胞中,细胞色素C蛋白表达水平降低,同时BCL-2蛋白表达水平升高。结论 RNA干扰沉默BAX基因可抑制大鼠软骨细胞凋亡并且促进其存活,其机制可能与线粒体途径相关。