Smad7在兔下颌骨牵张成骨过程中的表达

背景:有研究表明Smad7可结合并抑制骨形成蛋白受体的下游信号,而骨形成蛋白可促进牵张成骨过程中的骨愈合,并且Smad7对软骨形成起到抑制作用,但Smad7在牵张成骨中的作用机制尚不清楚。目的:利用种植型牵张器增高兔下颌牙槽嵴,观察下颌骨牵张成骨过程中Smad7的表达规律。方法:将雄性日本大耳白兔24只随机分为对照组4只,牵张成骨组20只,其中牵张成骨组再按牵张时间点不同再随机分为牵张成骨1d,1,2,4和6周组,4只/组。选取牵张成骨组兔左侧下颌骨行牵张成骨,其间歇4d,开始种植型牵张器垂直增高兔下颌牙槽嵴。各组分别于牵张成骨后1d,1,2,4,6周取材,在牵张成骨侧下颌骨行骨密度测量,用免疫组织化学法观察兔下颌骨牵张过程中不同时期Smad7的表达和分布。结果与结论:Smad7在正常下颌骨组织中有少量表达,在牵张后1d下颌骨中的Smad7表达高于对照组(P<0.05)。牵张成骨后1,2和4周组的Smad7表达比牵张成骨后1d组有所减少,但仍高于对照组,牵张成骨后6周时与对照组差异无显著性意义(P>0.05)。牵张区下颌骨骨密度值在牵张成骨后1d最低,1,2和4周组骨密度值相比对照组逐渐增高(P<0.01)。提示Smad7在牵张成骨过程的不同时期表达不同,Smad7可能对牵张成骨早期的新骨形成起一定的促进调节作用。

兔下颌骨牵张成骨与骨切开上徙术成骨中一氧化氮合酶表达的比较研究

目的通过对兔下颌骨牵张成骨与骨切开上徙术成骨过程中一氧化氮合酶(NOS)表达的对比研究,探讨其不同转归的分子生物学机制。方法将日本大耳白兔36只随机分为牵张组、骨切开上徙术组和空白对照组,前2组分别于术后1d,1、2、4周处死实验动物,取下颌骨标本进行大体观察、X线片、HE染色检查,用免疫组化方法检查NOS的表达情况,对诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)阳性表达进行比较。结果免疫组化观察结果可见,正常骨组织NOS仅有少量的阳性表达。在牵张组,iNOS在术后1d表达高于空白对照组,且达到峰值;eNOS在术后1周达到峰值。在骨切开上徙术组,iNOS表达在术后2周达到峰值,eNOS表达在术后1周达到峰值。神经型一氧化氮合酶(nNOS)在牵张成骨组和骨切开上徙术组均无明显表达。结论在下颌骨牵张术时,按常规进行牵张可达到良好的骨再生,断端间如有大的间隙存在,将严重影响骨再生进程。

NOS与TGF-β_1在牵张成骨中的相关性研究

目的:利用种植型牵张器增高兔下颌牙槽嵴,研究一氧化氮合酶(NOS)与转化生长因子-β1(TGF-β1)在牵张成骨过程中的相关性。方法:雄性日本大耳白兔24只,随机分为牵张术后1天、1周、2周、4周、6周组和空白对照组,每组4只。随机选取一侧下颌骨行牵张成骨术。分离处死后的兔下颌骨,行免疫组化观察。对免疫组化染色切片通过高清晰彩色病理图像分析仪测量灰度值,计算染色强度。利用SPSS13.0软件包进行方差分析和Spearman相关分析,并拟合曲线关系,建立相关回归方程。结果:在牵张成骨中,eNOS与TGF-β1呈正相关(P<0.01,r=0.538),iNOS与TGF-β1不存在相关性(P>0.05,r=0.283);eNOS与TGF-β1的曲线拟合回归方程为YeNOS=24.246-1.914XTGF-β1+0.182XTGF-β12-0.004XTGF-β13。结论:TGF-β1在牵张成骨过程中可能起调控作用,对eNOS起正性调控作用,通过调控eNOS来完成对iNOS的调控,iNOS又通过NO浓度的变化完成对TGF-β1的反作用。

转化生长因子β及其信号蛋白Smad2/3在牵张成骨早期表达的动态观察

目的通过对牵张成骨新骨生成早期转化生长因子β及Smad2/3的表达情况的观察,分析转化生长因子β和Smad2/3在牵张成骨中的意义,初步探讨牵张成骨的机制。方法20只成年大耳白兔随机分为5组,每组4只。非手术组作为空白对照,其余用自制的垂直型牵张器按1mm/天,每天4次的速率牵张牙槽骨,分别于牵张后4、7、10、14天处死动物取材。标本进行X线、组织学观察和免疫组织化学的检测。结果两周内牵张区有新生骨小梁生成,沿牵张方向排列,免疫组化结果可见在新生骨的区域有Smad2/3的表达,其中第4天起表达水平升高,至第10天仍维持高水平,在14天开始有下降趋势,主要在间充质细胞、成纤维细胞、成骨细胞及增厚的骨膜细胞中表达。结论Smad2/3和转化生长因子β参与兔下颌骨牵张成骨新骨的生成,在牵张成骨早期发挥重要作用。

兔下颌骨牵张成骨中VEGF与NOS的相关性研究

目的:研究VEGF、iNOS和eNOS在兔下颌骨牵张成骨中的表达及其相关关系;探讨NOS和VEGF的相互作用及在促进新骨生成中的作用机制。方法:日本大耳白兔20只,随机分为五组,每组4只。分别处死空白对照组、牵张后1天组、1周组、2周组、4周组动物,取牵张处骨组织做成切片,行X线和组织学观察。结果:X线下示4周后牵张处骨缺损消失,组织学示牵张处骨小梁逐渐成熟;VEGF与NOS在形成新骨中均有高水平表达,VEGF同iNOS成正相关,r=0.844,P<0.01;VEGF同eNOS成正相关,r=0.647,P<0.;01;结论:VEGF、NOS可能共同参与促进牵张成骨新骨的形成,二者可能在上诉过程相互作用,促使成骨。