HSCCC分离天然产物中化学成分研究进展

随着人们生活水平日益提高,天然产物资源的功能性和安全性受到了科研人员广泛关注,但从中进一步提取分析有效成分是一个非常复杂的过程,如何实现对其深度利用、提高活性物质分离的产率与纯度是亟待解决的问题。高速逆流色谱(HSCCC)是一种现代化制备分离技术,其负载容量大、重复性好,已成功从天然产物中分离纯化多种化合物。本文对HSCCC在天然产物活性小分子分离、多肽和蛋白质等生物大分子分离、手性分离方面进行概述,以期为分离纯化高产率、高纯度有效化学成分提供一种新的分析方法与思路。

基因芯片技术在中药现代化研究中的应用进展

高通量基因芯片技术是一种高度集成化的分析和研究技术,是进行药物基因组学研究的主要平台.而中药是中华民族的宝藏,已有几千年的发展历史,将基因芯片技术应用到中药研究中是中医全息性思维的体现,会从根本上改变长期以来人们对中药的认识层次和研究手段,是中药研究领域中一次具有深远意义的改革,将为中药现代化的发展提供新的途径.近年来,国内外已有一些将基因芯片技术应用到中药研究的报道,从中医传统思维的角度探讨基因芯片技术应用在中药现代化研究,讨论利用基因芯片进行中药有效成分筛选及新药研发、中药作用机理研究、中药复方研究、中药质量控制及安全性评价、中药基因组学研究和药效变化方面的应用,为中药现代化研究提供参考.

光谱法研究灿烂甲酚蓝与血浆蛋白质结合性质及蛋白质构象变化

在模拟的生理条件下,采用荧光发射光谱、紫外-可见分光光度法、同步荧光光谱、三维荧光光谱和圆二色(Circular dichroism,CD)光谱等技术研究了灿烂甲酚蓝(Brilliant cresyl blue,BCB)与人血清白蛋白(Human serum albumin,HSA)的结合性质以及药物的结合对HSA构象的影响.结果表明,BCB和能猝灭HSA的内源荧光,BCB对HSA的荧光猝灭是形成HSA-BCB复合物的静态猝灭过程,紫外-可见吸收光谱的结果也进一步证实了BCB对HSA荧光的静态猝灭.BCB与HSA分子Trp残基的距离r小于7 nm,说明HSA与BCB之间能够发生非辐射能量转移,但由于r>R0值,这说明形成HSA-BCB复合物导致的静态猝灭是HSA荧光猝灭的主要原因.热力学参数计算结果表明BCB与HSA相互作用形成HSA-BCB复合物的过程是自发进行的,疏水作用力和氢键在形成HSA-BCB复合物的过程中发挥主要作用.同步荧光光谱、三维荧光光谱和CD光谱的结果说明BCB与HSA的相互作用形成的HSA-BCB复合物导致了HSA的构象发生了变化.

轮环藤碱对小胶质细胞活化的抑制作用研究

考察了轮环藤碱对脂多糖(LPS)诱导小胶质细胞过度活化的抑制作用.培养BV2小鼠小胶质细胞系,以脂多糖(1μg/mL)激活小胶质细胞,同时给予不同浓度的轮环藤碱(0.1~10μmol/L)处理细胞,以四甲基偶氮唑盐(MTT)法测定细胞存活率,Griess法测定细胞释放一氧化氮(NO)水平,酶联免疫吸附分析实验(ELISA)检测细胞释放肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素-1β(IL-1β)和白介素-6(IL-6)的水平.进一步在无细胞体系中考察了轮环藤碱对NO的直接清除能力;以及对DPPH、羟自由基(·OH)、过氧亚硝酸根离子自由基(ONOO-)和超氧阴离子(·O-2)自由基的清除作用.结果表明,轮环藤碱可显著抑制LPS激活的小胶质细胞释放NO及三种炎症因子(IL-1β、IL-6和TNF-α),且对细胞存活率无明显影响;此外,轮环藤碱对NO、DPPH、·OH、ONOO-和·O-2自由基均具有显著清除能力.综上,轮环藤碱可能对小胶质细胞过度激活引起的神经炎性相关疾病具有潜在的防治作用.

超声结合4,4-双甲基姜黄素对DNA损伤的实验研究

文章以4',6-二脒基-2-苯基吲哚为荧光探针,通过荧光光谱方法研究了超声结合姜黄素类似物4,4-双甲基姜黄素(dimethylcurcumin,DMCU)对DNA的损伤作用,并采用氧化-萃取分光光度法及活性氧清除剂对超声作用过程中活性氧(Reactive Oxygen Species,ROS)的产生及其种类进行了检测和鉴别。结果表明,与单独DMCU作用或单独超声作用相比,超声与DMCU的协同作用对DNA的损伤效应更强,且损伤程度随超声照射时间和DMCU浓度的增加而增大。此外,DMCU在超声作用下会降解,且DMCU的降解速率和程度与一定条件下的DNA损伤程度有关,说明DMCU声化学反应中活性氧的产生是导致DNA损伤的原因。结果表明DMCU有可能成为一种新结构类型的声敏剂。

作为药物载体金属有机框架的功能化材料研究进展

金属有机框架(MOFs)是一类新兴的材料,也称为配位聚合物,具有许多作为药物载体所需的特性,近年来已经成为药物存储和传递重要的候选材料。通常合成的纳米MOFs难以满足其在生物医学中的应用,通过表面修饰可以提高MOFs的稳定性和分散性,可以协助药物跨过生理障碍,实现MOFs的口服给药;另外通过表面改性也可以减缓MOFs的降解,实现缓释给药;通过进一步修饰还可以增加药物在特定部位的富集,实现靶向治疗。表面修饰对于MOFs药物传输系统的发展非常重要。近年来,比较常见的MOFs表面修饰材料有聚乙二醇、二氧化硅、环糊精、肝素、壳聚糖,以及其他靶向修饰材料,如叶酸、DNA、甘草次酸等。介绍了药物载体MOFs常见的表面修饰材料,及通过这些材料修饰后赋予MOFs的优良性能,并举例阐述了修饰后的MOFs在生物医药领域的应用前景,为MOFs作为药物载体的开发提供参考。

亚甲蓝类似物的合成及其与牛血清白蛋白相互作用的研究

目的合成3种亚甲蓝类似物3,7-二(二正丙胺基)-吩噻嗪-5-鎓碘化物、3,7-二(二正丁胺基)-吩噻嗪-5-鎓碘化物和3,7-二(二正戊胺基)-吩噻嗪-5-鎓碘化物,并研究模拟生理条件下这3种亚甲蓝类似物与牛血清白蛋白的相互作用。方法通过1H-NMR及MS对这3种亚甲蓝类似物进行结构表征,应用荧光光谱法研究了模拟生理条件下这3种亚甲蓝类似物与牛血清白蛋白的相互作用。结果 3种亚甲蓝类似物和BSA相互作用形成了蛋白质-药物复合物并猝灭其固有荧光,亚甲蓝类似物与BSA相互作用过程的ΔG^0<0,亚甲蓝类似物与BSA荧光残基间的距离r均小于7 nm。结论亚甲蓝类似物和BSA相互作用的猝灭机制为静态猝灭,二者之间的反应是自发进行的。非辐射能量转移理论表明BSA与亚甲蓝类似物之间存在非辐射能量转移。同步荧光光谱和三维荧光光谱的研究结果表明,亚甲蓝类似物与BSA的相互作用导致BSA构象发生变化。

超高效液相色谱-串联质谱测定饲料中镇静剂类和β-受体激素类药物残留

采用超高效液相色谱-串联质谱技术,建立了饲料中8种镇静剂类和15种β-受体激素类药物残留的分析检测方法。样品采用乙腈-1%(体积分数)三氯乙酸水溶液(7∶3,v/v)提取,目标物通过阳离子固相萃取柱净化,经Agilent Zorbax Eclipse Plus C_(18)色谱柱(100 mm×3.0 mm,1.8μm)分离,液相色谱-串联质谱进行检测,标准曲线内标法定量。结果表明:23种目标物在2.0~200.0μg/L内线性关系良好(r2>0.99)。在饲料样品基质中,目标化合物在5.0、10、50μg/kg 3个加标水平下的平均回收率为75.1%~102.4%,相对标准偏差(RSD)为4.3%~14.3%(n=6)。该方法净化效率高,适用范围广,可用于饲料中镇静剂类和β-受体激素类药物残留筛查和检测。

虫草素体外大鼠肝微粒体代谢初步研究

目的:建立大鼠肝微粒体药物代谢酶体外转化模型,探讨虫草素的体外代谢情况,为规模化制备虫草素的代谢产物提供方法。方法:将虫草素与大鼠肝微粒体药物代谢酶共温孵,用液质联用的方法检测肝微粒体中虫草素代谢产物(2种生物碱类,2种葡萄糖醛酸结合产物,1种谷氨酰胺结合产物)。色谱条件:采用DiamonsilTM ODS C18(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱分离,以含0.1%甲酸的甲醇-含0.1%甲酸的水(15∶85)为流动相,以0.5 mL·min^(-1)的流速进行洗脱,洗脱时间为32 min,进样量10μL;质谱条件:电喷雾离子源(ESI源),正离子模式检测。采用虫草素代谢产物的MS和MS/MS以及MS-DIAL V1.57,Mass Lynx V4.1和CFM-ID等软件和本项目组建立的数据库来推测其化学结构式。结果:虫草素在大鼠肝微粒体药物代谢酶作用下可以被代谢,并且发现了8个代谢产物,其中鉴定7个代谢产物的分子式。在已鉴定的7个分子式中,确定了4个代谢物的结构式和1个与谷氨酰胺结合的代谢产物,确定的代谢产物分别是4-羧酸咪唑葡萄糖醛酸结合物,3,4,5-三甲氧基氧代四氢呋喃-2-羧酸葡萄糖醛酸结合物,C6H5O2谷氨酰胺结合物,呋喃-2-甲醇葡萄糖醛酸结合物和氧化虫草素。结论:建立的肝微粒体药物代谢酶模型可靠有效,可用于虫草素的体外代谢研究。

一测多评法在中药中的应用及研究进展

一测多评法(QAMS法)是一种多指标同步质量控制方法,它先确定待测样品中有代表性成分的含量,然后根据相对校正因子(RCF)计算待测样品中其他多种成分的含量。目前,各种药品的质量控制和中药现代化都对中药标准的研究和质量控制提出了更高的要求,QAMS作为一种经济、准确的方法,在中药材及其制剂的含量测定中已得到推广应用。自一测多评法提出至今,已有500多篇论文,涉及到药材中多种活性成分的测定、不同制剂中活性成分的测定、药材中某些化学物质的含量测定等。本文对QAMS法的原理、特点、技术要求以及影响因素进行了具体的综述,对近些年QAMS的应用及研究进展进行探讨分析,并展望了QAMS的应用未来,为QAMS质量评价模式在中药分析领域中的进一步研究和应用提供参考。

中医中药代谢组学生物标记物的研究进展

代谢组学是系统生物学的重要组成部分,是继基因组学和蛋白质组学之后近年来发展起来的一门新型学科。20世纪末国内外对代谢组学进行了深入研究,同时代谢组学也渗透到各个学科,它相较于传统的分析方法更加整体、全面,因而更适合中医中药理论体系的整体性研究。作者通过对代谢组学生物标记物在中医中药领域中的发现情况进行文献总结和分析,以期为该领域生物标记物快速发现及准确筛选提供参考。