倍他洛尔滴眼液对兔急性高眼压模型视网膜神经节细胞的保护作用

目的应用倍他洛尔（贝特舒）滴眼液对急性高眼压的兔眼进行治疗，通过视网膜神经细胞的凋亡检测和电镜观察超微结构的改变，来了解倍他洛尔滴眼液对青光眼视网膜神经节细胞的保护作用。方法大耳白兔24只，随机分成2组：对照组A和给药组B。A组内再分2组，每只兔选左眼作高眼压灌注，为A2组，右眼作为对照组A1；同样，B组内也分2组，左眼作急性高眼压模型组B2。右眼作为对照蛆B1。30d后各组分别进行视网膜神经细胞凋亡检测（用脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记技术，即TUNEL技术）和电镜观察视网膜神经节细胞超微结构的变化，记数每个高倍镜视野中染色阳性细胞数，经过统计学处理，比较各组的差异。结果在A2组和B2组中。可以观察到染色阳性的细胞，细胞核呈棕黄色，主要分布在视网膜的内核层和节细胞层；A1与B1组没有找到染色阳性细胞。每个高倍镜视野下。阳性细胞数经过统计学处理，比较结果如下：B2组与A2组比较，阳性细胞数减少（t=2．666，to．05．5=2．571，P〈0．05），说明倍他洛尔滴眼液点眼有防止高眼压导致视网膜神经节细胞凋亡发生的作用；B2与A1组比较，阳性细胞数增多（t=8．696，t0.001,5 =6．869,P〈0．001），说明倍他洛尔滴眼液局部点眼不能完全阻止视网膜神经节细胞凋亡的发生；A2与A1组比较，阳性细胞数增多（t=10．826，t0.001,t=6.869，P〈0．001），说明高眼压可以导致视网膜神经节细胞凋亡；B1与A1组比较，差异无显著性（t=0，P=1），说明倍他洛尔滴眼液无毒性作用，不能导致视网膜神经节细胞凋亡；B2与B1组比较，阳性细胞数增多（t=8．696，t0.001,5=6.869,P〈0.001），说明即使局部使用倍他洛尔滴眼液。高眼压仍会导致视网膜神经节细胞凋亡的发生。电镜观察的结果：A1、B1组中视网膜神经节细胞核大，呈圆形或椭圆形，有典型的双层核膜，胞质中粗面型内质网丰富，有颗粒状核糖体附着，线粒体脊清晰；A2组中线粒体高度肿胀，脊大部分消失，空泡化，部分膜破裂，内腔出现细小致密物。粗面型内质网肿胀，脱颗粒；B2组少部分线粒体肿胀，部分脊肿胀变短，极少数有空泡变，粗面型内质网未见明显扩张。结论高眼压能导致视网膜神经节细胞发生凋亡。而倍他洛尔滴眼液能部分地阻止其凋亡的发生，倍他洛尔滴眼液对视网膜神经细胞没有毒性作用。