试论21世纪我国动物生物制品的研究发展趋向

随着饲养业的持续发展 ,动物传染病的流行亦随之产生了许多新特点 ,同时由于科学技术的不断进步 ,自然均会影响到动物生物制品的研制和发展 。

兽医生物制品耐热冻干保护剂的研究进展

冷冻干燥技术是生物学的一个重要应用技术,常用于生物制品的科研和生产中,以保持菌、毒种的生物学特性,稳定生物原料和半成品的生物活性,延长成品的有效期.近年来这一技术因"功能性食品"(Function food)的快速发展也被用于食品生产中.冷冻干燥具有二个优点:防止液体收缩,减少在干燥过程中由于浓缩可能引起的化学变化.但冷冻干燥的过程会对生物活性物质造成损伤,导致溶解度下降,活菌数减少和效价降低.为了尽量减少这种损伤,在冷冻干燥时加入适当的保护剂,以便微生物冻干后,有较高的存活率,同时还可使冻干的微生物在保存的过程中能耐受较高温度而减少死亡.

实验动物在兽医生物制品生产和检验中的重要作用

在生物科学领域,应用实验动物作为模型进行观察研究,包括医学研究、兽医学研究、生命科学研究、药物学研究等,均具有重要意义。作为新兴学科—实验动物学,伴随着生命科学的发展而更加引起人们的重视。本文就实验动物对兽医生物制品生产和检验的影响与作用,谈谈如下粗浅认识。1 兽医生物制品生产、检验对实验动物的要求1.1 兽医生物制品生产,特别是产品的检验,多数离不开动物实验,所以必须按照生物学研究的要求严格选择实验动物。除了按科学的再现性和反应的一致性等基本要求外,还要在实验动物的生物学特性方面符合使用目的的要求,包括遗传学和微生物学要求标准。只有这样,才能取得准确可靠的结果。

猪瘟DNA疫苗在猪体及环境的生物安全性研究

DNA疫苗生物安全性是其走向临床所须解决的关键问题之一。以猪瘟DNA疫苗为研究对象 ,探讨了其两个方面的生物安全性问题。一方面 ,将两种不同的猪瘟DNA疫苗质粒免疫猪后 ,利用PCR技术分析了其与猪细胞基因组整合的可能性 ,结果在灵敏度为 30拷贝的检测条件下 ,未发现猪瘟DNA疫苗整合到细胞基因组 ;另一方面 ,以PCR技术检测了免疫现场环境样品 ,以分析猪瘟DNA疫苗上的E2基因、CMV启动子基因和抗性基因是否在环境细菌中发生转移和扩散。结果未发现DNA疫苗转化环境细菌的直接证据。因此认为DNA疫苗对猪体和环境是安全的。

仔猪水肿病(三价)灭活疫苗的研究 I菌种的微生物学特性、毒力和免疫原性鉴定试验

对引起仔猪水肿病的常见血清型大肠埃希氏菌菌株C83905、C83684和C83527进行了各级系统的鉴定和初步研究。结果表明这3个菌株毒力强,免疫原性好,可以作为预防仔猪水肿病的疫苗候选株。

猪细小病毒分子生物学与核酸探针的研究进展

猪细小病毒( Porci ne parvovi rus,PPV) 是引起猪繁殖障碍的主要病原之一,近年来PPV感染呈扩大上升趋势,给养猪业造成了巨大的经济损失。各国的研究者加强了PPV基因组结构和蛋白质的研究。随着分子生物学的发展,核酸探针以其敏感性和特异性成为快速诊断PPV的一种方法。

我国兽用生物制品生物安全性问题与对策

众所周知,兽用生物制品在畜禽养殖生产中发挥着不可替代的作用,但由于生物制品本身的特性和生产实践中安全应用方面的不足,导致我国兽用生物制品的市场存在着很大的安全隐患。文章列举了我国兽用生物制品生物安全性存在的问题,详细阐述了加强兽用生物制品生物安全的措施,具有一定的参考价值。

大肠杆菌肠毒素ST_1-LT_B融合基因的高效表达

用限制性核酸内切酶ＥｃｏＲⅠ和ＨｉｎｄⅢ双酶切含大肠杆菌肠毒素ＳＴ１—ＬＴＢ融合基因的质粒ｐＸＳＬＴ１，回收０８４ｋｂ的ＳＴ１—ＬＴＢ融合基因，再将载体ｐＥＴ—２８ｂ（＋）用ＥｃｏＲⅠ和ＨｉｎｄⅢ双酶切，然后将其与ＳＴ１—ＬＴＢ融合基因连接，转化至受体菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中。经ＥｃｏＲⅠ、ＨｉｎｄⅢ、ＢａｍＨⅠ酶切反应鉴定重组子质粒，得到了理想重组质粒ｐＸＥＴＳＬＴ１。重组菌株ＢＬ２１（ＤＥ３）（ｐＸＥＴＳＬＴ１）经ＩＰＴＧ诱导后，其表达产物经ＳＤＳ—ＰＡＧＥ和ＥＬＩＳＡ检测，结果表明重组菌株可以高效表达ＳＴ１—ＬＴＢ融合蛋白，该融合蛋白占菌体总蛋白的３３２１％，而且无天然ＳＴ１生物毒性。

犬腺病毒、犬细小病毒联合PCR方法的建立与应用

根据GenBank报道的犬腺病毒(CAV)和犬细小病毒(CPV)序列,设计两对联合PCR引物,其中一对为CAV-1和CAV-2通用引物,另一对为CPV引物。在建立单项PCR基础上,通过优化Mg2+离子浓度和循环参数等反应条件建立联合PCR,确定联合PCR条件为:96℃180s,96℃30s,56℃30s,72℃80s,30个循环。联合PCR结果显示:CAV-1扩增片段大小为497bp,CAV-2为1019bp,CPV为719bp;细胞和其它相关病毒对照均无扩增带。上述PCR产物经用限制性内切酶酶切和克隆测序,结果均与相应病毒的应有条带和序列相同。敏感性比较试验结果表明,联合PCR比用细胞培养分离病毒敏感。将联合PCR应用于15份CAV和CPV细胞培养物,5份CAV-1、1份CAV-2和3份CPV人工感染犬病料以及30份临床病料检测,并与电镜负染、HA/HI及病毒分离等方法的结果进行比较,结果显示,联合PCR的检出率和病毒分离结果一致,高于电镜负染和HA/HI试验。以上结果说明:CAV-1/CAV-2和CPV联合PCR不仅具有很好的特异性和敏感性,而且可以在短时间内(2 5h～3h)同时鉴定出上述三种病毒,因此具有良好的实验室诊断和临床应用价值。

沿江牛成年母牛体重与体尺指标的相关与回归分析

以辽宁省宽甸县沿江牛保种区2004年测量的138条相关数据为基础,分析了体重与年龄、体长、体高、胸围、管围的相关系数,同时,进一步分析了估测沿江牛成年母牛体重的回归模型。结果表明:体重与体高、体长、胸围、管围、年龄分别为0.611、0.661、0.888、0.632、0.290;得到了2个估测体重的回归模型,估测值与实测值之间的相关程度分别为0.933和0.928。

表达大肠杆菌K88ac-ST_1-LT_B融合蛋白基因工程菌株的构建

利用PCR技术 ,从大肠杆菌C8390 2质粒中扩增出K88ac基因、ST1 突变基因和LTB 基因 ,通过分离、纯化、内切酶酶切、连接和转化 ,构建了含K88ac ST1 LTB 融合基因表达载体的重组菌株BL2 1(DE3) (pXKST3LT5 )。经酶切鉴定和DNA序列分析证实 ,构建的重组质粒pXKST3LT5中含有K88ac ST1 LTB 融合基因 ,且基因序列和阅读框架均正确。经ELISA检测 ,重组菌株表达的K88ac ST1 LTB 融合蛋白能够被ST1 单抗、LTB 和K88ac抗体识别。经乳鼠灌胃试验证实 ,表达的融合蛋白已丧失天然ST1 肠毒素的活性。免疫实验结果表明 ,K88ac ST1 LTB 融合蛋白能够诱发小白鼠产生抗体 ,该抗体具有中和天然ST1 肠毒素的毒性作用 ,表明构建的重组菌株可以作为预防仔猪黄。

C型产气荚膜梭菌β毒素基因克隆与核苷酸序列分析

用ＰＣＲ技术，从含Ｃ型产气荚膜梭菌β毒素基因质粒ｐＢ１２中扩增出了０．９５Ｋｂ的β毒素基因，然后用限制性核酸内切酶ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ对其进行双酶切处理，最后将其定向连接在事先经同样内切酶处理的载体ｐＥＴ－２８ｃ（＋）中的相应位点上，转化至受体菌ＢＬ２１（ＤＥ３）中。经ＢａｍＨＩ和ＥｃｏＲＩ双酶切分析和核苷酸序列分析，证明重组质粒ｐＸＥＴＢ２含有产气荚膜梭菌β毒素基因，确定了其全部的核苷酸序列。