晚期结直肠癌靶向治疗的现状及进展

结直肠癌发病率逐年上升,晚期疾病以药物治疗为主。化疗能显著延长患者生存期及改善生活质量。近十几年来,分子靶向治疗在不断进步,化疗联合靶向治疗使晚期结直肠癌患者的生存得到进一步改善。随着对靶向药物与化疗方案的配伍、优势人群的筛选、药物治疗顺序的合理安排以及最佳治疗模式的制定等问题的不断探索,晚期结直肠癌的治疗更为个体化及精准化。本文针对晚期不可切除及转移性结直肠癌靶向治疗的现状及进展进行评述。

基于中国人Lynch综合征临床标准的家族性结直肠癌胚系突变谱多中心研究

目的:Lynch综合征作为一种常染色体显性遗传的恶性肿瘤综合征,基于肿瘤家族史对患者进行初筛是目前Lynch综合征筛查的主要手段。本研究旨在明确符合中国人Lynch综合征临床标准的结直肠癌患者最终确诊为Lynch综合征的比例,以及二代测序在Lynch综合征临床诊断中的应用。方法:2017年2月至2019年10月纳入85例就诊于国内7家医院(浙江大学医学院附属第二医院、北京协和医院、江苏省人民医院、北京大学第一医院、辽宁省肿瘤医院、四川大学华西医院和温州市中心医院)无血缘关系的符合中国人Lynch综合征临床标准的结直肠癌患者,利用含61个已报道与遗传性肿瘤相关基因的二代测序平台检测入组先证者的胚系突变。对于检出的临床意义不明的基因变异,通过一代测序、多重荧光PCR毛细管电泳检测肿瘤组织微卫星状态等手段判读该变异的致病意义。结果:符合中国人Lynch综合征临床标准的结直肠癌患者中,28.2%检测出Lynch综合征关键基因已知致病性或疑似致病性胚系突变,另外15.3%患者携带上述基因的临床意义不明的变异。通过对这些变异进行分析,本研究认为MLH1基因c.2240_2255 delCTGATCTATACAAAGT通读突变为遗传性结直肠癌的致病性突变;然而目前尚缺乏充足证据证明MLH3基因第2~11号外显子大片段重复与遗传性结直肠癌的发生存在密切联系。结论:本研究发现同样基于符合中国人Lynch综合征临床标准的结直肠癌患者,与既往利用一代测序的研究报道相比,二代测序并未提高Lynch综合征的确诊率。但是,二代测序会带来大量临床意义不明的突变。需要谨慎对待尚未明确的基因突变检测结果,必要时应该进行更深入的家系研究和更全面的分子检测以明确这些突变的致病意义。

结直肠癌伴同时肝转移患者同期切除术后预后风险模型的创建及应用

目的:探讨结直肠癌伴同时肝转移(synchronous colorectal liver metastasis,sCRLM)患者接受原发肿瘤和肝转移灶同期切除术后的预后风险因素,并建立sCRLM术后的预后风险模型。方法:回顾性分析127例在我院接受原发肿瘤和肝转移灶同期切除的sCRLM患者的临床病理学因素,采用单因素和多因素Cox模型分析方法确定总生存期(overall survival,OS)和肝无复发生存时间(recurrence-free survival,RFS)的独立预后因素,根据Cox模型的风险比(hazard ratio,HR)对独立因素赋值,从而建立OS和肝RFS的新预后风险模型。根据新模型将患者分为低、中和高风险组,各组间生存差异采用Log-rank检验。ROC曲线下面积用于比较新风险模型和Fong临床风险评分的预后预测能力。结果:本研究中位随访期23.4个月,多因素Cox分析确定下列4个因素为OS较差的独立预后因素,并根据HR值对各危险因素赋值:原发肿瘤淋巴结转移≥4个(P=0.047,1分),CEA≥200 ng/ml(P=0.023,2分),TBS 3~8分(P=0.048,1分)和TBS≥9分(P=0.021,2分)。根据下列标准建立OS的预后风险模型:低风险组(0~1分)、中风险组(2~3分)和高风险组(≥4分)。新风险模型OS的预后预测能力优于Fong临床风险评分(AUC:0.726 vs 0.564)。多因素Cox分析确定下列2个因素为肝RFS较差的独立预后因素,根据HR值赋值如下:肝转移灶双叶分布(P=0.020,1分)和TBS≥9分(P=0.016,2分)。结论:本研究纳入接受同期手术切除的sCRLM患者创建了预后风险模型,用于评估sCRLM患者术后的OS和肝RFS。低风险组患者术后的生存情况(OS和肝RFS)优于高风险组,其预测能力尚需前瞻性临床模型进一步验证。

miR-338-3p靶向PTP1B抑制胃癌细胞迁移和侵袭

目的:探讨miR-338-3p和PTP1B对胃癌细胞迁移和侵袭的影响。方法:Western Blot法测定PTP1B在胃癌标本及癌旁组织中的表达。通过qRT-PCR检测miR-338-3p的表达。用PTP1B质粒和siRNA、miR-338-3p类似物转染SGC7901细胞,用Transwell法测定miR-338-3p和PTP1B对细胞迁移和侵袭的影响。最后,使用双重荧光素酶报告基因来验证miR-338-3p对PTP1B的靶向作用。结果:在这项研究中,我们发现PTP1B蛋白水平在胃癌组织中明显增加,并且PTP1B促进了胃癌细胞的迁移和侵袭。生物信息学分析表明,miR-338-3p可能靶向PTP1B。在胃癌组织中,miR-338-3p与PTP1B负相关(r=-0.653,P=0.013)。我们证明了miR-338-3p可能调节胃癌细胞中的PTP1B,通过靶向PTP1B来调节胃癌细胞的迁移和侵袭。结论:miR-338-3p可抑制胃癌细胞的迁移和侵袭,可能与靶向PTP1B有关,本研究为胃癌治疗提供新的分子靶点和依据。

EPHA2抗体对结直肠癌西妥昔单抗耐药的逆转作用

目的明确结直肠癌(CRC)病人西妥昔单抗治疗前后EPHA2的表达水平,并探索EPHA2抗体能否逆转西妥昔单抗的耐药。方法收集8例KRAS野生型CRC病人在西妥昔单抗治疗前及疾病进展后的配对肿瘤组织标本,采用免疫组化方法检测EPHA2的表达水平。使用西妥昔单抗处理其敏感细胞系、原发及继发耐药的CRC细胞系,以MTT方法检测细胞增殖能力。使用EPHA2抗体DS-8895a、西妥昔单抗单药或联合处理原发及继发耐药的CRC细胞,检测各组细胞增殖能力。结果在西妥昔单抗治疗前及进展后的肿瘤组织中,存在治疗后EPHA2表达的上调(t=6.056,P<0.05)。在KRAS野生型CRC细胞系中,DS-8895a与西妥昔单抗有协同增敏作用;而在西妥昔单抗继发耐药CRC细胞系中,DS-8895a可逆转西妥昔单抗的耐药。结论 EPHA2抗体与西妥昔单抗联合可能具有逆转西妥昔单抗继发耐药作用,以及潜在的协同增敏作用。EPHA2有可能成为CRC治疗策略的新突破。

活化肝星状细胞促进肠癌奥沙利铂耐药

目的研究活化肝星状细胞促进肠癌奥沙利铂耐药。方法 Western blot方法及免疫荧光方法检测肝星状细胞α-SMA及CollagenI蛋白表达,同时Western blot方法检测肠癌细胞上皮间质转化(Epithelialmesenchymal transition, EMT)相关蛋白Vimentin与E-cadherin的表达,应用集落形成实验检测肠癌细胞增殖能力,Transwell实验检测肠癌细胞迁移能力,MTT实验验证肠癌细胞的奥沙利铂敏感性。结果肝星状细胞α-SMA及CollagenI高表达;活化肝星状细胞促进Caco2及RKO肠癌细胞增殖能力、迁移能力及奥沙利铂耐药。Caco2及RKO肠癌细胞镜下细胞形态发生改变,EMT相关蛋白Vimentin表达增加,E-cadherin表达降低。结论活化肝星状细胞促使肠癌细胞发生EMT从而对奥沙利铂耐药。

lncRNA HOTAIR在胃癌中的表达及对胃癌细胞增殖及自噬的影响

目的研究lncRNA HOTAIR在胃癌中的表达及其对胃癌细胞增殖和自噬的影响,探讨lncRNA HOTAIR调控胃癌细胞自噬的机制。方法收集2015年1月—2017年12月于中国医科大学附属肿瘤医院确诊为胃癌的60例癌组织及其配对癌旁组织;实时荧光定量PCR (RT-PCR)检测HOTAIR表达水平,CCK-8实验检测siHOTAIR及si-ATG3对细胞增殖影响,蛋白免疫印迹实验检测HOTAIR对细胞自噬水平及ATG3表达水平影响,免疫荧光实验检测HOTAIR对胃癌细胞自噬的影响。结果 HOTAIR在胃癌组织及癌细胞株MGC-803、BGC-823、SGC-7901中表达水平显著高于癌旁正常组织及人胃黏膜细胞株GES-1。通过转染si-HOTAIR,构建胃癌HOTAIR干扰细胞株;与空载对照组相比,HOTAIR干扰组胃癌细胞增殖水平降低,胃癌细胞自噬标志蛋白LC3表达水平降低,LC3-Ⅱ/Ⅰ比例降低,P62表达增高,自噬相关蛋白ATG3表达亦降低。结论胃癌组织中HOTAIR表达上调,抑制HOTAIR促进了胃癌细胞增殖能力;且HOTAIR能够通过ATG3促进自噬水平。