转录因子T-bet在单纯疱疹病毒感染小鼠外周血中的表达

目的 研究单纯疱疹病毒Ⅰ型（herpes simplex virus type 1，HSV-1）感染小鼠眼球以后转录因子T—bet在小鼠外周血中的表达，探讨T—bet的表达与单纯疱疹性角膜基质炎之间的关系。方法 将10^6空斑单位（plague forming unit，PFU）·L^-1的HSV-1 Mckrae毒株接种于BAIB／c鼠的角膜上建立单纯疱疹性角膜基质炎（herpetic stromal keratitis,HSK）动物模型，分别于角膜接种病毒后的第1d、3d、7d、10d、14d、21d及28d，用毛细管取小鼠的左眼眼眶静脉窦血1mL，提取淋巴细胞，用半定量逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）检测T-bet mRNA的表达水平；在裂隙灯显微镜下观察小鼠角膜的临床变化，组织学检查角膜的病理改变；用ELISA法检测T-bet蛋白在角膜组织中的表达水平。结果 BALB／c鼠的角膜接种HSV-1后的1～5d，角膜擦拭液中均检测出HSV-1复制，表明小鼠感染了单纯疱疹病毒；裂隙灯显微镜观察：HSV-1感染鼠的角膜后，小鼠均患了急性角膜上皮炎，并于感染后1周内痊愈。其中81．7％（49／60）的小鼠自感染病毒后10d起开始出现角膜基质炎改变，表现为灶状角膜基质混浊，局部角膜新生血管化，角膜基质内大量的炎性细胞浸润。角膜基质混浊逐渐进展，在病毒感染后的第14～21d达到高峰。RT-PCR检测的数据显示：未感染HSV-1的对照组小鼠的外周血中不表达T-bet mRNA；HSV-1感染小鼠的早期即可诱导T—bet mRNA在小鼠外周血中的表达，并且表达持续存在；T—bet mRNA表达的高峰时间（10～28d），位于角膜基质炎发生和发展的过程中。ELISA法检测角膜提取物中的T-bet蛋白显示了相似的结果。结论 HSV-1上调T-bet mRNA在小鼠外周血中的表达；T-bet的表达与角膜基质炎的发生和发展密切相关。