外周血NLRP3炎性小体-Caspase-1-IL-1β信号轴与肺癌相关性分析

目的:分析外周血核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotide binding oligomerization domain like receptor protein 3,NLRP3)-半胱氨酸蛋白酶1(cysteine-aspartic acid protease 1,Caspase-1)-白细胞介素(interleukin,IL)-1β信号轴与肺癌的相关性。方法:选取2021年6月—2023年8月江苏省连云港市赣榆区人民医院收治的肺癌住院患者72例初诊患者(肺癌组)和72例健康体检者(健康对照组)。比较两组外周血单核细胞、NLRP3、Caspase-1、IL-1β水平及肺功能[1秒用力呼气量(forced expiratory volume in one second,FEV_(1))、用力肺活量(forced vital capacity,FVC)、FEV_(1)/FVC],并分析肺癌组外周血中NLRP3、IL-1β水平与FEV_(1)、FVC、FEV_(1)/FVC的相关性。结果:肺癌组患者FEV_(1)、FVC、FEV_(1)/FVC水平均显著低于健康对照组,差异有统计学意义(P均<0.05);外周血中Nlrp3、Caspase-1、Il-1βmRNA相对表达水平和Caspase-1和IL-1β分泌水平均高于健康对照组,差异有统计学意义(P均<0.05);Spearman相关分析显示,肺癌组患者外周血单核细胞Nlrp3基因mRNA相对表达量与FEV_(1)、FEV_(1)/FVC水平呈负相关(P<0.05);而外周血IL-1β分泌水平与FEV_(1)/FVC水平呈正相关(P<0.05)。结论:外周血单核细胞中NLRP3 mRNA相对表达水平及外周血IL-1β分泌水平与肺癌进展呈负相关,可反映肺癌进展程度,对肺癌的筛查和诊断具有潜在的参考价值。

尿液转铁蛋白用于糖尿病肾病的早期诊断

本文应用ＥＬＩＳＡ测定尿液转铁蛋白（Ｔｒａｎｓｆｅｒｒｉｎ，Ｔｆ），回收率９８．２～１０５．１％，批内ＣＶ６．８６～８．４９％，批间ＣＶ９．４９～９．８９％。健康成年人随意尿Ｔｆ／Ｃｒ比值呈非正态分布，正常参考值上限为０．１２３ｍｇ／ｍｍｏｌＣｒ．临床应用结果表明，糖尿病患者尿Ｔｆ／Ｃｒ比值明显增加，８２．６％糖尿病患者尿Ｔｆ／Ｃｒ升高，而白蛋白／Ｃｒ仅６４％升高，两者比较有非常显著差异。在糖尿病患者Ａ组（Ａｌｂ／Ｃｒ＜２．２１ｍｇ／ｍｍｏｌＣｒ）中，亦有６０．７％患者尿Ｔｆ／Ｃｒ升高，随意尿Ｔｆ／Ｃｒ与Ａｌｂ／Ｃｒ呈正相关，ｒ＝０．８１２。结果提示，尿Ｔｆ／Ｃｒ测定为临床诊断糖尿病性肾病提供了一个较为敏感的指标。

上尿路梗阻患者肾盂尿LDH同工酶测定的临床意义

上尿路梗阻患者肾盂尿ＬＤＨ同工酶测定的临床意义吴惠毅温峰①陈晋沈来龙（连云港市第一人民医院中心实验室，江苏连云港２２２００２）关键词尿液乳酸脱氢酶同工酶上尿路梗阻上尿路梗阻是泌尿外科中的常见病，梗阻病人肾功能的评价一直是人们关注的问题。我们测定了上尿...

同步荧光法测定血清维生素E

同步荧光扫描法测定血清维生素Ｅ有效地消除了溶剂拉曼光谱的干扰，提高了测定方法的灵敏度和准确性。维生素Ｅ含量在０．０１～２０．０μｇ／ｍｌ范围内与同步荧光峰高度成线性关系，ｒ＝０．９９９；回收率９９．９５％；批内ＣＶ２．２１％～２．４１％；批间ＣＶ２．８２％～２．９６％；该法操作简单、快速。

贲门胃底癌中CIP2A mRNA表达与HER-2基因的扩增及其意义

目的检测贲门胃底癌中CIP2A mRNA表达与HER-2基因的扩增并探讨其相关性和临床意义。方法采用半定量RT-PCR法检测47例贲门胃底癌石蜡包埋组织中CIP2A mRNA的转录水平,荧光原位杂交方法(FISH)检测HER-2基因的扩增情况,统计分析CIP2A mRNA与HER-2扩增情况的相关性,同时了解二者与贲门胃底癌患者临床病理参数的关系。另选取47例对应的癌旁组织纳入半定量RT-PCR方法检测,并统计分析CIP2A mRNA在癌和癌旁组织中转录水平的差异。结果 CIP2A mRNA高水平转录与肠型胃癌、较高的分化程度、较大的肿瘤浸润深度、较高的TNM分期、血管癌栓、神经侵犯等临床病理参数相关(P <0.05);HER-2扩增与肠型胃癌、较高的分化程度、神经侵犯等临床病理参数相关(P <0.05)。CIP2AmRNA高水平转录与HER-2扩增呈正相关。贲门胃底癌组织中CIP2A m RNA的转录水平显著高于其对应的癌旁组织(P <0.05)。结论 CIP2A基因在贲门胃底癌组织中高表达,与患者的恶性临床病理参数密切相关。CIP2A基因可能成为贲门胃底癌患者新的分子标志物和治疗靶点,其可受到HER-2正调节。

注射用还原型谷胱甘肽钠的毛细管区带电泳分离及其光学纯度分析

运用毛细管区带电泳(CZE),以pH=6.59的60mmol/L Na2HPO4-NaH2PO4作为电泳缓冲溶液,测定波长为200nm,还原型谷胱甘肽(GSH)和氧化型谷胱甘肽(GSSG)于5min内达到基线分离。GSH和GSSG的线性范围分别为4～1 000μmol/L和2～1 000μmol/L,相关系数R2值均为0.9999,迁移时间和峰面积的相对标准偏差分别小于0.58%和2.30%,GSH和GSSG的检出限分别为1.66μmol/L和0.86μmol/L,回收率在95.4%～103.3%之间,相对标准偏差均小于3.05%(n=3)。建立的新方法用于市售注射用还原型谷胱甘肽钠的分析,测得注射用还原型谷胱甘肽钠中GSSG含量为0.47%,光学纯度为99.53%。

急性心肌梗死患者血清LD同工酶异常区带的检出及意义

目的 探讨电泳法检测LD同工酶时位于LD5阴极侧异常区带 (LD6)的电泳特性及其临床意义。方法 对LD6的电泳特性、热稳定性、抑制剂的影响、显色底物成份的影响进行实验研究 ,并动态观察了急性心肌梗死 (AMI)患者血液酶学指标变化规律。结果 用乙醇取代显色液中的乳酸锂时 ,LD6显色明显增强 ,氰化钾可以完全抑制LD6活性 ;去除显色液中的乳酸锂时 ,LD6显色减弱 ,但仍然可见 ;LD6在 4℃保存至少稳定 7天 ,5 6℃加热 1h活性变化不大 ;4例AMI患者在出现LD6后 8～ 30h内全部死亡。结论 LD6是一种醇脱氢酶 ,它是肝小叶受损的标志 。

导数同步荧光法测定血清色氨酸

为了排除酪氨酸、苯丙氨酸对荧光法测定色氨酸的干扰，建立了色氨酸导数－同步荧光测定法。结果表明，当Δλ为９０ｎｍ时，色氨酸的一阶导数－同步荧光峰在２８５ｎｍ时不受酪氨酸、苯丙氨酸的干扰；色氨酸浓度在０～４００μｍｏｌ／Ｌ与导数－同步荧光值成线性，Ｙ＝０．２８７Ｘ±０．０９６，ｒ＝０．９９９；批内、批间ＣＶ分别为２．５７％、３．４２％；回收率９３．８％～９７．２％；血红蛋白含量在０．２５～５．０ｇ／Ｌ、胆红素含量在４２．７５～３４２μｍｏｌ／Ｌ对测定无干扰；３０例健康成年人血清色氨酸测定结果为７３．９８±７．２６（ｘ±ｓ）μｍｏｌ／Ｌ；本法操作简单、快速，测定结果准确，是血清色氨酸常规测定较为理想的方法。

4种抗体联合检测在类风湿关节炎中的临床意义

类风湿关节炎（rheumatoid arthritis，RA）是一种以慢性破坏性多发关节炎为主要表现的全身自身免疫性疾病，在发病的前2年内即可出现不可逆的骨关节破坏，导致患者出现残疾和功能障碍。早期诊断和系统性治疗是防止关节畸性和致残的关键。以往RA的辅助检查多依赖x线和类风湿因子（RF）检测，x线改变发生时关节已经受损，不能做到早期诊断；而RF并非RA的特异性抗体，

导数-同步荧光光谱法测定尿液肾上腺素和去甲肾上腺素

为了解决肾上腺素（Ｅ）、去甲肾上腺素（ＮＥ）氧化产物的荧光光谱严重重叠难题，将同步荧光与导数光谱两种技术结合起来用于尿液Ｅ、ＮＥ测定。结果发现，在激发波长与发射波长相差Δλ＝４０ｎｍ时获得的Ｅ、ＮＥ二阶导数－同步荧光光谱中，４５０ｎｍ处Ｅ的荧光强度的导数信号不受ＮＥ的干扰；４３２ｎｍ处，ＮＥ的荧光强度的导数信号不受Ｅ的干扰，Ｅ、ＮＥ含量在１～２００ｎｇ／ｍｌ范围内成线性关系；最低检测限为０．５ｎｇ／ｍｌ；批内ＣＶ３．２１％～３．９５％，批间ＣＶ４．２６％～５．１０％，Ｅ和ＮＥ的回收率分别为９４．９％～９５．４％、９４．７％～９６．３％；该法操作简单、快速、成本低廉，适合于％批量测定，是测定尿液Ｅ、ＮＥ较为理想的常规方法。

布洛芬抑制人肝癌细胞BEL-7402生长及机制的初步研究

背景与目的:近来发现,临床上常用的非甾体类抗炎药(non-steroidal anti-inflammatory drugs,NSAIDs)可以降低多种癌症的发病率。布洛芬(ibuprofen)作为一种常用的NSAIDs,对肝癌是否具有抑制作用,国内外鲜有报道。本研究初步探讨布洛芬抑制肝癌细胞BEL-7402的作用,并研究其相关机制。方法:肝癌细胞BEL-7402分为对照组和不同浓度布洛芬处理组,药物处理0、24、48和72 h后用MTT法检测各组细胞增殖抑制率;流式细胞术检测各组细胞的周期分布;细胞分析仪检测各组细胞活力及细胞凋亡;蛋白[质]印迹(Western blot)检测各组细胞增殖性核抗原(PCNA)、细胞周期蛋白(Cyclin D1)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)和环氧合酶-2(COX-2)蛋白的表达;ELISA法检测细胞培养上清液中前列腺素E2(PGE2)蛋白表达水平。结果:布洛芬组中BEL-7402细胞增殖受到抑制,且抑制作用呈时间和剂量依赖性(P<0.05)。2.0 mmol/L布洛芬组48 h细胞活力明显低于对照组[(47.87±5.23)%vs(88.93±5.49)%],G0/G1期细胞比例明显高于对照组[(80.04±3.61)%vs(62.36±8.33)%],细胞早期凋亡率明显高于对照组[(36.65±10.07)%vs(9.81±6.80)%],差异有统计学意义(P<0.05)。布洛芬作用于细胞48 h后,PCNA、Cyclin D1、Bcl-2以及COX-2蛋白表达与对照组相比显著减少(P<0.05);细胞培养上清液中PGE2蛋白表达量与对照组[(23.98±4.89)ng/L vs(68.70±9.43)ng/L]相比,显著降低(P<0.01)。结论:布洛芬能够抑制肝癌细胞BEL-7402增殖与活力,阻滞细胞周期,促进细胞凋亡,其作用机制可能与抑制COX-2及PGE2表达有关。

急性脑梗死患者血tPA和PAI-1水平的临床分析

目的 探讨急性脑梗死患者血纤溶活性的特点、相关因素及其在脑梗死复发中的作用。方法 用酶联免疫吸附法测定tPA和PAI- 1,常规方法测定血脂和血流动力学指标。采用单因素和多因素分析的方法比较复发脑梗死 (复发组 )、初发脑梗死 (初发组 )和对照组血tPA和PAI- 1水平 ,并分析纤溶指标与危险因素之间的关系。结果 复发组和初发组急性期先后两次血tPA和PAI - 1水平比较无差异 (P >0 .0 5 )。tPA水平在复发组 (80 .95± 5 4 .4 3)、初发组 (84 .16± 6 6 .36 )和对照组 (5 5 .72±6 1.95 )之间比较有统计学差异 (P <0 .0 5 )。复发组与初发组之间tPA和PAI - 1水平比较无差异(P >0 .0 5 ) 。tPA与血脂各指标之间无相关性 ;PAI- 1水平与TG相关 (r =0 .2 341,P =0 .0 0 36 ) ;tPA和PAI- 1水平与多项血流变指标相关。复发脑梗死患者的危险因素分别为高血压病 (OR =13.5 90 ,1.770～ 10 4 .36 6 ) ,纤维蛋白原 (OR =6 .5 2 9,1.6 4 2～ 2 5 .96 5 ) ,总胆固醇 (OR =4 .82 0 ,1.6 4 8～14 .10 3) ,红细胞刚性 (OR =4 .14 8,1.5 0 9～ 11.399)和tPA水平 (OR =0 .976 ,0 .95 5～ 0 .997)。结论 急性脑梗死患者纤溶功能变化的特点是纤溶活性降低 ,它与脂代谢紊乱、血流动力学异常、房颤和中风家族史密切相关。

人胃癌微环境来源间充质干细胞促进胃癌细胞BGC-823的体外增殖、迁移和促血管生成能力

目的探讨人胃癌微环境来源间充质干细胞(GC-MSCs)能否促进胃癌细胞增殖、迁移及其体外促血管生成能力。方法采用MTT增殖试验和细胞克隆形成试验观察GC-MSCs细胞对胃癌细胞系BGC-823生长的影响;Transwell迁移试验检测GC-MSCs细胞对BGC-823细胞迁移能力的影响;利用管形成试验观察并分析GC-MSCs细胞对BGC-823细胞促血管生成能力的影响;RT-PCR检测GC-MSCs细胞作用BGC-823细胞后其促血管生成相关基因(VEGF、MIP-2和TGF-β1基因)的表达情况。结果 MTT增殖试验和克隆形成试验结果表明,GC-MSCs来源的细胞培养上清可以明显促进胃癌细胞BGC-823的体外生长(P<0.05);Transwell迁移试验结果表明,GC-MSCs来源细胞培养上清对BGC-823的迁移能力具有显著促进作用(P<0.01);RT-PCR检测结果显示,GC-MSCs来源的细胞培养上清可明显上调促血管生成相关因子(VEGF、MIP-2和TGF-β1基因)在BGC-823细胞中的表达水平;管形成试验结果显示,BGC-823和GC-MSCs细胞共培养上清与BGC-823、GC-MSCs单独培养组相比具有更强的促血管生成能力。结论 GC-MSCs可通过旁分泌的方式促进胃癌细胞增殖、迁移及其促血管生成能力,进而诱导胃癌的恶性转化。

毛细管胶束电动色谱法检测尿液肌酸和肌酐含量

目的建立高效毛细管电泳技术(HPCE)测定尿液中肌酸(Cri)和肌酐(Cr)的方法。方法运用毛细管胶束电动色谱技术(MEKC),以pH5.5、20mmol/L的Na2HPO4-H3PO4(含100mmol/LSDS)作为电泳缓冲液,非涂层石英毛细管进行分离,样品经过20倍稀释后以1psi压力进样4s,15kV电压下分离尿液中的Cri和Cr,二极管阵列检测器(DAD)(λ=200nm)检测。结果 Cri和Cr的线性范围为4.9～2500μmol/L和4.9～2500μmol/L(r值分别为0.9998和1);Cri回收率为97.8%～100.8%、平均99.2%,Cr回收率为99.5%～104%、平均101.8%;Cri迁移时间批内和批间差异(CV)平均值为3.2%和8.0%、Cr为2.3%和6.8%;Cri和Cr的最低检出限分别为1.4μmol/L和3.31μmol/L。结论本法标本用量小、干扰因素少、精密度和准确度高、线性范围宽、测定成本低廉,可满足临床常规检测要求。

HLA-G在食道鳞癌中的表达及意义

目的观察HLA-G在食道鳞癌组织和癌旁组织中的表达情况,探讨HLA-G在食道鳞癌中表达的临床意义。方法应用免疫组化S-P法,对47例食管癌及其癌旁组织中HLA-G的表达进行免疫组化染色。结果HLA-G在食道鳞癌组织和癌旁组织中表达率分别为78.7%、0%。癌组织中HLA-G主要表达于肿瘤细胞胞浆中。HLA-G的表达与肿瘤大小、浸润程度、病理学分级及淋巴节转移状况无关。结论HLA-G在食道鳞癌中有显著表达,且其表达主要由肿瘤细胞产生。

尿蛋白超薄琼脂糖凝胶电泳及初步临床应用

报道尿蛋白超薄琼脂糖凝胶电泳，采用考马斯亮蓝染色，对人血清白蛋白（HSA）灵敏度为3μg／ml，对尿本─周氏蛋白灵敏度为5μg／ml．通过改进凝胶制板工艺和琼脂糖板的贮存方法，使每次可以大量制板，保存期可在三个月以上。该法具有快速、简便、不需浓缩标本、便于临床常规开展的优点。对52例临床尿标本的电泳分析表明，该法对肾脏损害程度的鉴别诊断及指导临床用药方面有主要实用价值。

探讨血清25羟基维生素D水平在糖尿病肾损伤中的作用

目的探讨血清25羟基维生素D[25-hydroxy vitamin D，25-（OH）D]水平与2型糖尿病肾损伤的关系。方法选择2012年12月至2013年5月我院内分泌科住院的2型糖尿病患者148例，选择同期健康体检者50例作为对照组。依据尿白蛋白／肌酐（albumin／creatinine，Alb／Cr）水平将糖尿病患者分为正常蛋白尿组（Alb／Cr〈30mg／gCr）、微量蛋白尿组（Alb／Cr30～299mg／gCr）和大量蛋白尿组（Alb／Cr≥300mg／gCr）。检测血清中25-（OH）D、空腹血糖（fasting plasma glucose，FPG）、糖化血红蛋白（hemoglobin Alc，HbAlc）、Cr、尿酸（uric acid，UA）、总胆固醇（total cholesterol，TCH）、甘油三酯（triglyceride，TG）、高密度脂蛋白（highdensity lipoprotein，HDL）、低密度脂蛋白（low density lipoprotein，LDL）。并对所得数据进行统计学分析。结果糖尿病患者的蛋白尿水平随着病程的延长而升高。三组糖尿病患者的病程差异有统计学意义（P〈0．01）。三组患者的收缩压、Alb／Cr、FPG、HbAlc、TCH、TG、LDL、UA和血Cr水平均高于对照组，而肾小球滤过率（glomerular filtration rate，eGFR）和HDL低于对照组，差异均有统计学意义（P均〈0．05）。大量蛋白尿组和微量蛋白尿组血清25-（OH）D水平较正常蛋白尿组和对照组明显降低，差异均有统计学意义（P均〈0．01），而正常蛋白尿组与对照组比较差异无统计学意义。病程〉10年的患者25-（OH）D水平显著低于病程5—10年及〈5年的患者，差异均具有统计学意义（P均〈0．05）。Pearson相关分析结果表明，血清25-（0H）D与尿Alb／Cr、血Cr和UA均呈负相关，而与eGFR呈正相关（P均〈0．05）。多元logistic回归分析结果表明，25-（0H）D与DN呈独立相关（β=-0．39，P〈0．01），且OR为2．98。结论血清25-（0H）D是糖尿病肾脏损伤的独立危险因素，其水平降低可能导致糖尿病肾病的发生。