细胞质胸苷激酶1在原发性肝癌中的表达及其对预后的临床意义

目的:研究细胞质胸苷激酶1(TK1)在原发性肝癌(PHC)中的表达情况。方法:用免疫增强化学发光法与电化学发光法分别对33例PHC、38例肝硬化、36例肝炎和35例健康人的血清TK1、AFP水平进行检测。结果:PHC组TK1和AFP水平明显高于对照组、肝炎组、肝硬化组(P<0.05),PHC组TK1与AFP呈正相关(r=0.966,P<0.05),PHC组低分化患者TK1水平明显高于中/高分化患者,TNMⅢ+Ⅳ分期患者明显高于Ⅰ+Ⅱ分期患者,TK1≤2.0 pmol/L患者3年生存率和生存时间高于>2.0 pmol/L患者(P<0.05);TK1>2.0 pmol/L和TNM分期≥Ⅲ期是影响PHC患者总体生存率的独立危险因素。结论 :血清TK1可作为PHC诊断、疗效监测、预后评估的一项潜在指标。

糖尿病肾病患者血清25羟基维生素D和CRP变化及意义

目的探讨2型糖尿病肾病（DN）患者血清25羟基维生素D[25-（OH）D]和C-反应蛋白（CRP）变化及临床意义。方法选择2型糖尿病（T2DM）患者148例，体检健康者50例，依据尿清蛋白／肌酐比值（UACR）将T2DM患者分为正常清蛋白（Alb）尿组（UACR〈30mg／gcr）、微量Alb尿组（UACR30—299mg／gcT）和大量Alb尿组（UACR≥300mg／gcr）。用电化学发光法检测血清25-（OH）D，免疫散射比浊法检测CRP，同时检测患者相关生化指标，分析25-（OH）D与CRP及其他实验指标的相关性。结果正常Alb尿组、微量Alb尿组和大量Alb尿组血清25-（OH）D依次降低（P〈0．01），微量Alb尿组和大量Alb尿组血清25-（OH）D较正常Alb尿组和健康人对照组降低（P〈0．01）。正常Alb尿组、微量Alb尿组和大量Alb尿组血清CRP依次升高，较健康人对照组差异均有统计学意义（P均〈0．01）。血清25-（OH）D随病程增加而降低（P〈0．01）；而CRP有增高趋势，但差异无统计学意义（P〉0．05）。血清25-（OH）D与CRP、肌酐（Cr）、尿酸（uA）、磷（P5＋）及UACR呈负相关（r分别为-0．396、-0．198、-0．179、-0．228、-0．793，P均〈0．05），与肾小球滤过率（eGFR）呈正相关（r=0．281，P〈0．01）。结论血清25-（OH）D降低与DN患者肾损伤程度相关，可能参与DN发生与发展。

急性髓系白血病患者外周血中性粒细胞碱性磷酸酶的表达及意义

目的：探讨中性粒细胞碱性磷酸酶（NAP）在急性髓系白血病（AML）患者中的表达情况及临床意义。方法：流式细胞术检测53例AML患者及50例正常对照组外周血NAP的表达水平；ELISA检测53例AML患者及50例正常对照组血浆中粒细胞一集落刺激因子（G．CSF）、中性粒细胞弹性蛋白酶（NE）、白细胞介素-8（IL-8）水平。结果：AML患者外周血NAP[1159（563～2033）AB／c]表达低于正常对照组[1862（1345～2382）AB／c]，差异有统计学意义（P〈0．05）；AML患者血浆中G-CSF、NE及IL-8[34．36（25．17～47．24）ng／L、397．56（324．63～563．84）pg／mL、585．34（403．61～866．54）pg／mL]表达低于正常对照组[54．52（46．27～77．14）ng／L、689．74（496．78～899．14）pg／mL、832．36（625．17～998．24）pg／mL]，差异有统计学意L（P〈0．05）。AML患者外周血NAP的水平与血清中G．CSF水平呈正相关（r=0．621．P=0．007）。结论：AML外周血中NAP表达显著降低，同时伴随血浆中性粒细胞相关因子G—CSF、NE及IL-8分泌减少，推测AML患者中性粒细胞免疫功能受到抑制。

流式细胞术检测中性粒细胞膜碱性磷酸酶方法的建立

目的 建立流式细胞术检测中性粒细胞膜碱性磷酸酶（mNAP）表达.方法 方法学建立.采集研究对象乙二胺四乙酸二钾（EDTA-K2）抗凝静脉血,应用PE标记抗碱性磷酸酶单克隆抗体,建立流式细胞术检测外周血mNAP表达方法.运用BD公司QuantiBRITETM PE于流式细胞术评估每个细胞结合的抗体数（AB/c）,间接反映待测细胞mNAP的表达量.观察肝素、乙二胺四乙酸二钾、柠檬酸钠3种抗凝剂、标本放置温度、时间以及血浆中碱性磷酸酶对结果的影响,评价方法精密度.用所建方法检测481名健康人群外周血mNAP表达水平,对数据进行正态性检验,确立临床参考区间.检测84例重症感染和局部感染患者和39例病毒感染患者外周血mNAP表达水平.结果 标本检测前,应用磷酸盐缓冲液洗涤可以有效消除血浆中碱性磷酸酶（ALP）干扰.3种不同抗凝剂采集的标本对mNAP检测结果无影响.标本放置室温或4℃12 h内对检测结果无影响.精密度实验结果,批内变异系数（CV） 2.01％ ～3.33％,平均CV 2.67％;批间CV 5.80％ ～6.00％,平均CV5.90％.健康成年人无论男女,mNAP表达水平均呈非正态分布.男、女中位数（P25,P75）分别为1 758（1 378 ～2 310） AB/c、1 897（1 369 ～3 249） AB/c,性别之间差异无统计学意义（U=27 140,P=0.243 8）.以2.5％ ～97.5％位数作为临床参考区间,结果为920.5 ～3 493.0 AB/c.细菌感染患者外周血中mNAP表达水平13 532（9 756 ～ 16 869） AB/c高于病毒感染患者1 143（536～2 012）AB/c以及健康对照人群1 879（1 399 ～2 497） AB/c（H=221.5,P＜0.01）.结论 应用QuantiBRITETM PE试剂盒来标准化流式细胞仪的设置,可定量分析待测样品荧光强度,进而获得细胞所含荧光素分子数,并计算出每个细胞表达的抗原位点或抗原分子数目,从而达到定量检测的目的.应用流式细胞术检测外周血中mNAP,操作简便、快速、结果准确,mNAP表达对于鉴别细菌、病毒感染具有重要的临床价值.