重组酶聚合酶扩增结合侧向流动试纸条技术快速可视化检测嗜麦芽窄食单胞菌方法的建立与应用

目的:建立一种基于重组酶聚合酶扩增(recombinant polymerase amplification,RPA)和侧向流动试纸条(lateral flow strips,LFS)的嗜麦芽窄食单胞菌快速可视化检测方法。方法:以嗜麦芽窄食单胞菌特异性序列(NC_010943.1)为模板,设计RPA引物。通过基础型RPA反应和琼脂糖凝胶电泳,根据候选引物对的扩增性能及引物二聚体的形成情况筛选最佳引物对。根据最佳引物对,设计探针和修饰引物。在引物和探针中引入碱基错配以消除假阳性信号,建立RPA-LFS反应体系。根据检测线的显色情况,优化RPA-LFS的最佳反应条件。使用临床常见的12种致病菌和12个临床来源的嗜麦芽窄食单胞菌检测该方法的特异性。以10倍梯度稀释的嗜麦芽窄食单胞菌基因组为模板,检测该方法的灵敏度。收集108例临床样本,将该方法与qPCR检测法和生化培养法对比,对RPA-LFS检测法进行kappa一致性检验及临床应用评价。结果:RPA-LFS检测法在37℃恒温条件下8 min即可完成扩增反应,1 min内可在LFS上观察到结果。该方法灵敏度高,最低检出限为1.107 CFU,并且与其他病原菌无交叉反应,特异性强。应用于临床样本检测时,该方法与qPCR相比,检测结果准确性一致。与生化培养方法的符合率为99.07%,kappa指数值为0.972,具有良好的一致性。结论:本研究建立了一种不依赖于精密仪器和专业技术人员的RPA-LFS检测方法,能够短时间内精准鉴定嗜麦芽窄食单胞菌。该方法的建立可为及时制定合理的抗菌治疗方案提供信息,具有较大的临床应用潜力。

大艾段温针法治疗肾虚肝郁型弱精子症临床研究

目的观察大艾段温针灸法治疗肾虚肝郁型弱精子症的临床疗效及对精液常规、精浆生化、性激素水平的影响。方法将纳入病例随机分为观察组、药物组、常规温针组、普通针刺组,每组各35例,观察组使用大艾段温针灸法,采用4 cm艾段,药物组应用硫酸锌片、维生素E软胶囊、五子衍宗丸,常规温针组采用2.5 cm艾段,普通针刺组常规针刺,不用灸法。各组均4周为1个疗程,共治疗2个疗程。观察4组治疗前后中医证候积分、精液常规、精浆生化以及性激素水平变化情况。结果观察组、药物组疗效均优于普通针刺组(P<0.05)。中医证候积分(情绪低落、记忆力下降、精液清冷)改善方面,观察组优于其他3组(P<0.05~0.01)。4组精子活率、a级精子、a+b级精子均较治疗前升高(P<0.05~0.01),4组的精子畸形率均较治疗前下降(P<0.01);畸形率、a级精子、a+b级精子方面,观察组均优于其他3组(P<0.05~0.01),精子活率方面,观察组优于常规温针组、普通针刺组(P<0.01)。4组的精浆果糖、中性α-葡萄糖糖苷酶及药物组精浆锌含量均较治疗前升高(P<0.01),在精浆果糖、中性α-葡萄糖糖苷酶方面,观察组均优于其他3组(P<0.01)。4组的睾酮、促黄体生成素、促卵泡生成激素均较治疗前升高(P<0.05~0.01);睾酮方面观察组优于药物组(P<0.01),促黄体生成素、促卵泡生成激素方面,观察组均优于其他3组(P<0.05~0.01)。结论大艾段温针灸法治疗肾虚肝郁型弱精子症疗效较好,可显著改善中医临床症状、精液常规、精浆生化以及性激素水平相关指标。其作用机制可能与调节性激素水平相关。

大艾段温针灸法治疗肾虚肝郁型弱精症的临床效果

目的:探讨大艾段温针灸法治疗肾虚肝郁型弱精症的临床疗效。方法:选取2018年1月至2019年12月课题病例招募组的肾虚肝郁型弱精症患者140例作为研究对象,按照随机数字表法随机分为观察组,药物对照组,常规温针对照组和普通针刺对照组,每组35例。观察组使用4 cm大艾段进行温针灸,药物组服用硫酸锌片、维生素E软胶囊、五子衍宗丸,常规温针组选用2.5 cm艾段,普通针刺组常规针刺,不加灸。各组均4周为1个疗程,2个疗程后分析4组中医证候、精液常规、精浆生化、性激素水平变化情况。结果:观察组疗效优于普通针刺组(P<0.05);药物组精液量优于观察组(P<0.05);观察组畸形率、a级精子、a+b级精子优于其他3组(P<0.05);观察组精子活率优于常规温针组、普通针刺组(P<0.05)。观察组精浆果糖、中性α-葡萄糖苷酶优于其他3组(P<0.05)。观察组睾酮优于药物组(P<0.05);观察组促黄体生成素、促卵泡生成激素优于其他3组(P<0.05)。结论:大艾段温针灸法治疗肾虚肝郁型弱精症疗效肯定,在改善精液常规、精浆生化指标、性激素水平相关参数方面,优于常规温针灸、普通针刺、药物,作用机制可能与调节性激素水平有关。

大艾段温针灸治疗肺气虚寒型变应性鼻炎100例

目的观察大艾段温针灸治疗肺气虚寒型变应性鼻炎(AR)的疗效并探索其作用机制。方法将入选病例随机分为观察组、对照组各105例。观察组大艾段温针灸,每日1次,每周治疗4次,4周为1个疗程。对照组急性期丙酸氟替卡松鼻喷雾剂喷鼻,枸地氯雷他定片口服。病情稳定后,枸地氯雷他定片停药,丙酸氟替卡松鼻喷雾剂继续喷鼻。4周为1个疗程。观察2组治疗结束时及治疗后30d的中医证候总积分、西医临床症状总积分、体征总积分、视觉模拟评分法(VAS评分)以及血清免疫球蛋白E(IgE)、白细胞介素-4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)水平的变化。结果治疗后2组中医证候总积分、临床症状总积分、体征总积分以及鼻部整体症状的严重程度VAS评分均明显低于同组治疗前(P<0.01),观察组明显低于对照组(P<0.05~0.01);血清3项指标,组内及组间差异均具有统计学意义(P<0.01)。治疗结束后30d随访,观察组疗效优于对照组(P<0.05);2组中医证候总积分、临床症状总积分、体征总积分以及鼻部整体症状的严重程度VAS评分均明显低于同组治疗前(P<0.01);观察组明显低于对照组(P<0.05~0.01);血清3项指标,IFN-γ含量,对照组治疗结束后30d与治疗前比,差异无统计学意义(P>0.05),其余各组内、组间3项指标比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论大艾段温针灸法治疗肺气虚寒型变应性鼻炎的疗效较好,可显著改善患者的中医证候、临床症状、体征、VAS评分,在调节血清IgE、IL-4、IFN-γ含量方面优于对照组,作用机制可能也与降低血清IgE、IL-4含量,升高IFN-γ含量相关。

连云港地区社区获得性肺炎患者呼吸道病原体感染分子病原学研究

目的探究连云港地区社区获得性肺炎患者呼吸道病原体分布特征。方法选取2019年因罹患社区获得性肺炎(CAP)而收住连云港市第二人民医院的612例患者作为研究对象,采集患者的痰或咽拭子提取核酸,用PCR毛细电泳片段分析法对呼吸道病原体进行13重核酸检测;应用SPSS统计学软件和GraphPad5.0统计制图软件分别统计分析。结果成年组呼吸道病原体检出率:冬季82.0%>春季48.4%>秋季28.0%>夏季20.0%,χ^(2)=38.473,P=0.000,不同季节核酸检测阳性率差异显著,其中冬季呼吸道病原体检出率最高;未成年组呼吸道病原体检出率:春季86.0%>冬季76.2%>夏季71.3%>秋季66.7%,χ^(2)=7.946,P=0.047,不同季节核酸检测阳性率差异显著;按照性别分组计算核酸阳性率,成年组与未成年组核酸检测阳性率在不同季节的对比:春季86.0%vs 48.4%,χ^(2)=19.436,P=0.000;夏季71.3%vs 20.0%,χ^(2)=22.180,P=0.000;秋季66.7%vs 28.0%,χ^(2)=13.485,P=0.000;冬季76.2%vs 82.0%,χ^(2)=0.758,P=0.384,除了冬季之外,未成年组病原体核酸检出率要明显高于成年组。结论不同季节、不同年龄组社区获得性肺炎患者的呼吸道病原体核酸检出率和病原学分布特征不同,13种呼吸道病原体多重检测手段可以为临床CAP患者的诊治提供有利的实验室数据支撑。

大灸量温针灸治疗原发性早泄肾虚肝郁证:随机对照试验

目的:观察大灸量温针灸治疗原发性早泄肾虚肝郁证的临床疗效。方法:将240例原发性早泄肾虚肝郁证患者随机分为温针组(80例,脱落5例)、针刺组(80例,脱落4例)、西药组(80例,脱落6例)。温针组予大灸量温针灸治疗,穴取百会、气海、关元、中极及双侧风池、额旁3线、内生殖器(耳穴)、肝俞、肾俞等。每次40 min,每日1次,每周5次,共治疗4周。针刺组不进行艾灸,针刺操作与温针组一致。西药组予盐酸达泊西汀片口服,每次30 mg,性交前1~3 h温水送服,24 h内最多服药1次,每周最多使用2次,4周内完成6次使用。观察各组患者治疗前后中医证候评分、早泄诊断工具量表(PEDT)评分、阴道内射精潜伏时间(IELT)、血清性激素含量[睾酮(T)、黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)],并评定临床疗效。结果:治疗后,各组患者性交不足1 min、泄后疲惫、精神低落、性欲减退评分及总分,PEDT评分均较治疗前降低(P<0.01,P<0.05),IELT均较治疗前延长(P<0.01);温针组血清T含量较治疗前升高(P<0.05)。治疗后,温针组泄后疲惫、腰膝酸软、性欲减退、少寐多梦、夜尿频评分及总分低于针刺组和西药组(P<0.05,P<0.01),血清T含量高于针刺组和西药组(P<0.05);温针组与西药组PEDT评分低于针刺组、IELT长于针刺组(P<0.05,P<0.01)。温针组总有效率为82.7%(62/75),高于针刺组的68.4%(52/76)和西药组的64.9%(48/74,P<0.05)。结论:大灸量温针灸能改善原发性早泄肾虚肝郁证患者的临床症状,延长阴道内射精潜伏时间,改善性激素水平。

不同长度艾段温针灸治疗神经根型颈椎病气滞血瘀证:随机对照试验

目的:比较不同长度艾段温针灸治疗神经根型颈椎病气滞血瘀证临床疗效。方法:将600例神经根型颈椎病气滞血瘀证患者随机分为4组:4 cm组(150例,脱落5例、中止2例)、3 cm组(150例,脱落6例、中止2例)、2 cm组(150例,脱落6例)和常规针刺组(150例,脱落6例)。4 cm组采用4 cm艾段温针灸治疗,3 cm组采用3 cm艾段温针灸治疗,2 cm组采用2 cm艾段温针灸治疗,常规针刺组仅予针刺治疗,取穴均为大椎及双侧夹脊穴(C_(5)、C_(7))、风池、肩贞、曲池、中渚等,每天1次,每周治疗5次,两周为一疗程,共治疗2个疗程。分别于治疗前后比较各组患者中医证候评分、临床症状评价量表(CASCS)评分、患侧臂丛神经牵拉试验评分及患侧上肢神经(尺神经、正中神经和桡神经)F波出现率和传导速度,测定各组患者治疗前后血清炎性因子[白介素-1β(IL-1β)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和超敏C反应蛋白(hs-CRP)]含量,并评定各组临床疗效。结果:治疗后,各组患者中医证候评分中颈部疼痛、活动受限、上肢麻痛评分及总分,臂丛神经牵拉试验评分均较治疗前降低(P<0.01,P<0.05);CASCS评分中主观症状、适应能力评分及总分均较治疗前升高(P<0.01,P<0.05)。治疗后,4 cm组中医证候评分中颈部疼痛、活动受限评分及总分低于其他3组(P<0.05,P<0.01),CASCS评分中主观症状、适应能力评分及总分高于其他3组(P<0.05,P<0.01),臂丛神经牵拉试验评分低于常规针刺组(P<0.05)。治疗后,各组患者正中神经、桡神经F波出现率及传导速度均较治疗前升高(P<0.05,P<0.01),4 cm组桡神经F波出现率及传导速度高于其他3组、正中神经F波出现率及传导速度高于常规针刺组(P<0.05)。治疗后,各组患者血清IL-1β、IL-6、TNF-α含量均较治疗前降低(P<0.01,P<0.05),4 cm组IL-6含量低于其他3组、TNF-α含量低于常规针刺组(P<0.05)。4 cm组总有效率为78.3%(112/143),高于3 cm组(67.6%,96/142)、2 cm组(65.3%,94/144)和常规针刺组(53.5%,77/144,P<0.05)。结论:4 cm长度艾段温针灸可有效改善神经根型颈椎病气滞血瘀证的临床症状,提升上肢神经功能,减轻神经压迫造成的炎性反应,临床疗效优于3 cm、2 cm长度艾段温针灸和常规针刺。

不同长度艾段温针灸治疗肾虚肝郁型弱精症:随机对照试验

目的:探讨不同长度艾段温针灸治疗肾虚肝郁型弱精症的临床疗效。方法:将240例肾虚肝郁型弱精症患者随机分为4 cm组(4 cm艾段温针灸组,60例,脱落3例)、3 cm组(3 cm艾段温针灸组,60例,脱落4例)、2 cm组(2 cm艾段温针灸组,60例,脱落2例)和针刺组(60例,脱落3例)。各组患者均穴取中脘、关元、中极、归来、腰阳关、关元俞等分别进行不同长度艾段温针灸和常规针刺治疗,每日1次,每周治疗5次,4周为一疗程,共治疗2个疗程。比较各组患者治疗前后精液常规、精浆生化指标及性激素水平、中医证候评分。结果:治疗后,4 cm组、3 cm组患者精子密度、精子活率、a级精子比例、a+b级精子比例、精浆果糖及中性α-葡萄糖苷酶含量均较治疗前升高(P<0.05,P<0.01),精子畸形率较治疗前降低(P<0.01,P<0.05);4 cm组患者a级精子比例、a+b级精子比例、精浆果糖及中性α-葡萄糖苷酶含量高于其他3组(P<0.05,P<0.01),精子畸形率低于其他3组(P<0.05)。治疗后,除头昏耳鸣评分外,4 cm组、3 cm组患者各项中医证候评分及总分均较治疗前降低(P<0.01,P<0.05);4 cm组患者情绪低落、腰膝酸软、性功能低下评分及总分均低于其他3组(P<0.05,P<0.01)。4 cm组总有效率为87.7%(50/57),高于3 cm组、2 cm组、针刺组的78.6%(44/56)、77.6%(45/58)、70.2%(40/57,P<0.05,P<0.01)。结论:4 cm艾段温针灸可有效提升肾虚肝郁型弱精症患者精子质量和活力,改善临床症状,疗效优于3 cm、2 cm艾段温针灸和常规针刺治疗。

慢性牙周炎与1级高血压的相关性

目的探讨慢性牙周炎与1级高血压的关系,以及牙周强化治疗对慢性牙周炎合并1级高血压患者血压及牙周状况的影响。方法以2020年1-12月在连云港市第二人民医院心内科就诊的110例1级高血压患者作为高血压组,110例同期非高血压的健康体检人群作为正常血压组,比较两组人群的血压、血液学指标和牙周参数。采用随机单盲法将1级高血压伴发慢性牙周炎患者54例分为一般治疗组(27例)和强化治疗组(27例),一般治疗组仅进行龈上洁治术,强化治疗组进行龈上洁治术和牙周强化治疗,随访3、6个月评估两组患者牙周参数、炎性指标及血压的变化。结果高血压组的收缩压、舒张压、牙周探诊深度(PD)、临床附着丧失水平(CAL)、探诊出血指数(BOP)高于正常血压组(均P<0.01)。高血压组慢性牙周炎发生率高于正常血压组(72.7%比52.7%,χ^(2)=9.410,P=0.002)。随着慢性牙周炎程度的加重,高血压的发生率增加(重度牙周炎组76.7%比中度牙周炎组70.0%比轻度牙周炎组34.0%比无牙周炎组36.6%,χ^(2)=27.901,P<0.001)。治疗方法和治疗时间对牙周指标、炎性指标以及血压的影响存在交互作用(均P<0.05),一般治疗组(n=24)治疗后3个月,PD、CAL、高敏C反应蛋白(hsCRP)等指标较治疗前降低(均P<0.05)。强化治疗组(n=24)治疗后6个月,PD、CAL、BOP、hsCRP、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)、收缩压、舒张压等指标较治疗前降低(均P<0.05)。治疗后6个月,强化治疗组PD、CAL、BOP、TNF-α、IL-6、收缩压、舒张压等指标低于一般治疗组(均P<0.05)。结论牙周炎与1级高血压相关;牙周强化治疗可改善慢性牙周炎合并1级高血压患者的牙周状况,同时可降低炎性标志物和血压水平。

细菌基因水平转移机制研究进展

基因水平转移(HGT)是细胞间遗传物质交换的重要方式,HGT增加了细菌基因组的开放性与复杂性,使细菌获得某种药物的抗性,细菌耐药基因经常位于一些移动遗传元件(MGE)上,如接合质粒、整合和接合元件(ICE)以及作为传播载体的噬菌体,但同时细菌也可以编码阻碍基因水平转移防御机制,如规则间隔短回文重复(CRISPR)相关蛋白(CRISPR-Cas)系统、限制-修饰(RM)系统以及毒素与抗毒素系统等。ArdA、ArdB和KlcA蛋白,以及抑制细菌CRISPR-Cas系统活性的蛋白质可以使质粒等可移动遗传原件有效逃脱宿主这种先天免疫和适应性免疫。本综述探讨影响HGT的因素,论述细菌的基因水平转移机制。