南方鲇(Silurus meridionalis)豚鼠气单胞菌溶血素的分离、纯化与致病性研究

采用硫酸铵盐析、DEAE-Sephadex A50凝胶层析法对豚鼠气单胞菌的溶血素进行分离、纯化,获得分子量为32.2kDa的单一多肽溶血素,测定溶血价为25。将该溶血素倍比稀释后梯度接种南方鲇,研究其对南方鲇的致病性和组织病理损伤情况。结果表明:豚鼠气单胞菌溶血素具有较强的毒力,对南方鲇的半数致死剂量(LD50)为0.29mg蛋白/kg体重;病鱼表现为体表褪色,腹部膨大,肝、脾、肾肿大,肝、脾淤血、出血明显;胃肠道内充有大量粘液,黏膜充血、出血;组织病理学表现为骨骼肌水肿、变性,肝细胞变性、坏死,血窦扩张淤血,肾小管上皮细胞变性、坏死,脾脏淋巴细胞减少,胃肠道黏膜上皮变性、坏死,脱落。

我国鱼类寄生虫病的防治策略及研究现状

寄生虫病是威胁我国水产养殖业的一类重要疾病,严重危害养殖动物的健康,阻碍养殖生产的发展,同时也使行业经济遭受巨大的损失。国内许多学者长期以来通过对鱼类寄生虫及寄生虫病进行大量系统的调查研究,目前已对寄生虫的种类、生活史、危害、流行情况等信息有了详尽的了解和认知,为渔业生产过程中鱼类寄生虫病的预防和控制提供了科学的依据。该文将围绕水产寄生虫病的种类、危害、防治方法、难点及热点研究方向等方面进行阐述。

沙门氏菌入侵基因研究进展

沙门氏菌是一种侵袭性胞内菌,由侵入基因表达的沙门氏菌侵袭蛋白与沙门氏菌的致病性密切相关。沙门氏菌的侵袭蛋白为invA、invB、invC、invD、invE、invF、invG、invH、invI、invJ等一组位于SPI-1毒力岛的基因编码。对沙门氏菌入侵基因的研究进展进行综述。

对虾白便综合征的研究进展

简述了对虾白便综合征(white feces syndrome,WFS)的发病症状、流行特点和危害。分析了对虾白便综合征的病因,包括:肝胰腺和肠道病变、弧菌感染、肝肠孢虫感染、消化系统微生物结构变化和其他因素。从种苗、水质、饲料和管理等方面提出了对虾白便综合征的防治措施。

冬春季大口黑鲈溃疡症病原分离鉴定及病理形态学观察

【目的】近年来,养殖大口黑鲈Micropterus salmoides在冬春季流行一种体表形成明显溃疡的疫病,本研究旨在明确其病因。【方法】从眉山东坡区和洪雅县采集病料,采用病原学、病理学和分子生物学相结合的方法对患病鱼进行研究。【结果】溃疡组织压片观察到大量直径10~30μm、长丝状且分支较少的菌丝体;组织病理学上,肌纤坏死、溶解,炎性细胞浸润,病变组织中分布大量由上皮样细胞、纤维细胞及位于中央的菌丝体组成的霉菌性肉芽肿;六胺银染色(Periodic acid-silver metheramine,PASM)发现,霉菌性肉芽肿中央的菌丝体呈黑色。病变肌肉组织基于侵入丝囊霉菌Aphanomyces invadans ITS基因的特异性PCR检测为阳性。以葡糖糖/蛋白胨(Glucose and peotone,GP)琼脂分离培养得到的霉菌纯培养物(BW1、BW3)在灭菌池塘水过夜培养12 h后,形成原孢子囊,符合侵入丝囊霉菌属特征;两株分离霉菌ITS基因序列分析发现,其与侵入丝囊霉菌ITS基因的序列相似性分别为99.64%与99.46%,在系统发育树上与侵入丝囊霉菌聚类为一支。【结论】确定大口黑鲈冬春季溃疡病是侵入丝囊霉菌感染所致。

斑点叉尾鮰冬季大规模死亡病原分离与鉴定

2016年1—2月湖南安化地区网箱养殖的斑点叉尾鲴暴发大规模死亡，死亡率接近80％，发病鱼体重为1．5～2．0kg。本研究从患病濒死鱼肝、脾、肾分离到1株致病菌，对其进行常规理化特性、分子生物学、人工感染实验以及药敏性检测。结果显示，分离菌株理化特性与鲁氏耶尔森氏菌（Yersiniaruckeri）特征相符，与NCBI中登录的鲁氏耶尔森氏菌的16SrDNA基因同源性达99％以上，在系统发育树上与鲁氏耶尔森氏菌聚为一族。人工感染鱼出现与自然发病相似症状，并能够从发病鱼组织中再次分离到相同病原菌，表明鲁氏耶尔森氏菌为斑点叉尾鲴该病病原菌。该分离菌株对氟苯尼考、多西环素及新霉素等药物高度敏感，本研究为斑点又尾鲴暴发性出血病防控提供了理论依据。

中药治疗仔猪腹泻效果观察

为探讨以连翘、白头翁、柴胡、陈皮等多味中药组成的"抗腹泻功能包"A、B、C对仔猪腹泻的治疗效果,选取成都周边某地区发生腹泻的仔猪216头,将其分为5组,分别为A包治疗组、B包治疗组、C包治疗组、常规治疗组和空白对照组进行对应治疗,记录仔猪的治疗情况并计算腹泻率和腹泻指数。治疗结果统计显示,3种抗腹泻功能包均能有效治疗仔猪腹泻,其中B包治疗组在治疗后期的腹泻率和腹泻指数均较其他组低且差异明显。

弧菌属PCR检测方法的建立与应用

根据弧菌属细菌(Vibrio spp.)共有的rpo A基因序列,比对和设计了一对PCR引物,建立了能够快速而准确地检测弧菌属细菌的通用PCR检测方法,该方法对靶标DNA的检测灵敏度为58 fg/μL,对菌液的检测灵敏度为2.7×102cfu/m L,能够区分该属细菌与其它属的细菌,具有极高的特异性。使用建立的方法对分离自南美白对虾的病原菌进行了检验,并结合16S r DNA序列分析,结果显示待检测病原均为弧菌属的细菌,与测序结果一致,说明该检测方法可用于弧菌属细菌的检测和诊断。

爱德华氏菌常规PCR检测体系的建立

根据NCBI公布的爱德华氏菌(Edwardsiella ictaluri)磷酸丝氨酸转氨酶(phosphoserine transaminase,serC)的基因序列,设计一对特异性引物,建立了可快速而准确地检测爱德华氏菌的PCR方法,并对患病鱼组织进行了检测。研究结果表明,使用设计的引物能够扩增出与预计大小一致的124 bp的特异性片段,具有较好的检测特异性,对靶标DNA的检测灵敏度为50 pg/反应,对靶标细菌的检测灵敏度为56 cfu/反应。样品的检测结果与实际发病情况一致,表明成功建立了爱德华氏菌常规PCR检测方法,可用于爱德华氏菌病的诊断。

急性低氧应激对鲫鱼血液生化指标的影响

低氧是水产动物活体运输过程中的一个重要应激源,会影响水产品的运输存活率。本文旨在模拟并探究急性低氧应激对鲫鱼幼鱼(Carassius auratus)相关血液生化指标的影响。对鲫鱼进行24 h的急性低氧处理,溶氧水平为(0.61±0.23)mg/L,测定低氧应激0 h、3 h、6 h、12 h和24 h,共5个时间点的血液血红蛋白(Hb)、血液高铁血红蛋白(MetHb)、血清皮质醇(COR)、葡萄糖(GLU)、热休克蛋白70(Hsp70)含量和超氧化物歧化酶(SOD)活性的变化。结果显示:在低氧应激过程中,Hb含量呈现先降低后升高的变化趋势,12 h时显著低于0 h(P<0.05),24 h时又恢复至应激前水平;MetHb、COR、GLU和Hsp70含量均呈现先升高后降低的变化趋势,且不同指标达到含量峰值的时间点略有差异;SOD活力随着低氧应激时间的延长有升高趋势,但是前后变化差异不显著(P>0.05)。研究表明,当水体溶氧低于0.6 mg/L时,随着急性低氧应激时间的延长,会造成鲫鱼的部分血液生化指标发生显著性变化,预示着低氧应激对鲫鱼机体代谢功能产生了较大的影响,因此在鲫鱼运输过程中,为提高运输存活率,应避免低氧等不良环境条件的出现。

2015年海南罗非鱼链球菌病调查

海南罗非鱼养殖以水产品加工出口为主,为海南当地第一大出口创汇农产品之一,近5年的年产量均占世界总产量40%以上。海南也是我国罗非鱼养殖重要省份,其产量在全国也名列前茅。随着养殖总量加大,池塘养殖罗非鱼的链球菌病暴发日益严重,已成为海南罗非鱼养殖户的最大噩梦,严重影响到罗非鱼产业的健康发展。

浅谈腹泻保育仔猪的综合护理

在养猪生产中,腹泻较为常见,也易造成重大经济损失。保育仔猪发生腹泻后,若治疗、护理不当,可能迁延病情,影响仔猪的生长性能。采取合理、积极的综合护理措施,可缩短治疗时间,提高仔猪成活率。本文对保温、限饲、补液、合理给药、环境消毒隔离、康复期合理饲喂等6个方面的护理措施进行了总结,供广大养殖业者参考。

广西一例黄颡鱼急性细菌性疾病的诊断与防治

近几年来,每年3-5月,广西部分地区水库及河道网箱养殖黄颡鱼因鳍条基部充血肿胀、吻部溃烂和体表溃疡等症状造成大批死亡,养殖户经济损失惨重。2014年4月初,广西凤亭河水库和宾阳黎塘清水河部分黄颡鱼网箱养殖户的黄颡鱼暴发了一种流行性传染病,患病鱼体胸鳍、背鳍基部明显充血肿胀且体表呈现不同程度的褪色斑，剖解后肝脏肿大且有不同程度的出血，肠道无食糜且部分患病鱼有肠道充气等症状。该病发病快，死亡率高，流行范围广，患病鱼体在一星期内死亡率可达10％。经笔者对死亡鱼进行解剖及对致病菌分离、鉴定，最终确定为因革兰氏阴性短杆菌引起的急性细菌性疾病。现将该病例的诊断及防治情况介绍如下。

黄颡鱼“一点红”病的诊治

黄颡鱼近年来已经发展为我国主要的淡水特种鱼养殖品种,在四川、两湖和两广等区域都有大量养殖。而黄颡鱼＂一点红＂病（俗称爆头病）一直都是危害黄颡鱼养殖的主要疾病之一,其发病率、死亡率都较高,给养殖户造成了巨大的经济损失。2014年7-8月份,四川邛崃某区域3户养殖户就相继暴发黄颡鱼＂一点红＂病,笔者分别对其进行了相关诊断,并进行了治疗,取得了很好的治疗效果。

温度、光照及pH对蟾酥提取液中指标成分稳定性的影响

目的：考察温度、光照及pH对蟾酥提取液中华蟾酥毒基、脂蟾毒配基、总蟾毒色胺稳定性的影响。方法：采用HPLC测定蟾酥提取液中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的含量,检测波长296 nm,流动相乙腈-水（58∶42）;利用UV测定蟾酥提取液中总蟾毒色胺的含量,检测波长559 nm。分别考察高温（60,40℃）,强光照射[（4 500±500）Lx]及不同pH（40℃,pH分别为4.32,4.99,5.73,6.47,6.97,7.75）条件下蟾酥提取液放置0,5,10 d后华蟾酥毒基、脂蟾毒配基、总蟾毒色胺的含量变化。结果：60℃条件下放置10 d后3种指标成分降解率均〉5%;40℃及（4 500±500）Lx条件下华蟾酥毒基和脂蟾毒配基的降解率均〈5%;总蟾毒色胺在上述条件下的降解率均〉5%。华蟾酥毒基、脂蟾毒配基、总蟾毒色胺分别在pH 5.73,6.47,6.47时降解最慢。结论：蟾酥提取液中华蟾酥毒基和脂蟾毒配基受高温及强光照射的影响较小,总蟾毒色胺受高温及强光照射的影响较大;pH是影响蟾酥提取液中3种指标成分稳定性的主要因素,不同pH条件对3种指标成分的稳定性有不同程度的影响。