黄芪葛根汤与远志汤合方抑制糖尿病动脉粥样硬化大鼠主动脉内皮细胞间质化的作用机制

目的基于转化生长因子-β(transforming growth factor-β,TGF-β)/Smad信号通路探究黄芪葛根汤与远志汤合方抑制糖尿病动脉粥样硬化大鼠血管内皮细胞间质化的作用机制。方法将70只SPF级SD雄性大鼠随机分为空白对照组、模型组、阳性对照组(糖脉康颗粒)、黄芪葛根汤与远志汤合方1组(简称“合方1组”)、黄芪葛根汤与远志汤合方2组(简称“合方2组”)。空白对照组喂食普通饲料,第29天给予大鼠一次性腹腔注射柠檬酸缓冲液;其他组喂食高脂饲料,第29天给予大鼠一次性腹腔注射链脲佐菌素诱导2型糖尿病动脉粥样硬化模型,连续灌胃49 d。苏木精—伊红染色法观察主动脉的组织形态。检测各组大鼠血糖和血清总胆固醇(total cholesterol,TC)、三酰甘油(triglyceride,TG)、糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin A1c,HbA1c)、高密度脂蛋白胆固醇(high-density lipoprotein-cholesterol,HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(low-density lipoprotein-cholesterol,LDL-C)水平;采用酶联免疫吸附试验检测血清波形蛋白(Vimentin)、Twist1、TGF-β、锌指转录因子1(Snail1)水平;采用Western blot法检测肝脏固醇调节元件结合蛋白-1c(sterol regulatory element-binding protein-1c,SREBP-1c)和主动脉Smad-2、Smad-3蛋白表达水平;采用qRT-PCR法检测葡萄糖转运蛋白4(glucose transporter-4,Glut-4)、Vimentin、腺苷酸活化蛋白激酶(AMP-activated protein kinase,AMPK)、SREBP-1c mRNA表达水平。结果与空白对照组比较,模型组大鼠血糖、HbA1c、TG、LDL-C、Vimentin、Twist1、TGF-β、Snail1、SREBP-1c、Smad-2、Smad-3表达水平显著升高(P<0.05),HDL-C、Glut-4、AMPK表达水平显著降低(P<0.05)。与模型组比较,合方1组、合方2组大鼠血糖、HbA1c、TG、TC、LDL-C、Vimentin、SREBP-1c、Twist1、TGF-β、Snail1、Smad-2、Smad-3水平显著降低(P<0.05),HDL-C、Glut-4、AMPK水平显著升高(P<0.05)。结论黄芪葛根汤与远志汤合方抑制主动脉内皮细胞间质化的作用与其参与主动脉TGF-β/Smad信号通路有关。

黄芪葛根汤与瓜蒌汤合方对糖尿病动脉粥样硬化大鼠主动脉SIRT1/AMPK信号通路的影响

目的:基于沉默信息调节因子1/AMP活化蛋白激酶(SIRT1/AMPK)信号通路探讨黄芪葛根汤与瓜蒌汤合方降低糖尿病动脉粥样硬化大鼠血糖、血脂、氧化应激的作用机制。方法:将68只SPF级雄性SD大鼠按随机血糖分为空白组、模型组、TMK组(糖脉康颗粒)、汤剂组(黄芪葛根汤与瓜蒌汤合方汤剂)、颗粒剂组(黄芪葛根汤与瓜蒌汤合方颗粒剂)。除空白组外,其余各组喂养28 d高脂饲料,第29天按30 mg/kg一次性腹腔注射2%链脲佐菌素(STZ)诱导糖尿病动脉粥样硬化大鼠模型,注射STZ第3天灌胃给予相应药物或蒸馏水,连续灌胃49 d。检测血糖、甘油三酯(TG)、胆固醇(CHO)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C),ELISA检测丙二醇(MDA)、活性氧(ROS)、超氧化物歧化酶(SOD)、糖化血红蛋白(HbA1c)含量,Real-time PCR法检测AdipoR1、SIRT1、AMPK、GLUT4、SREBP-1c mRNA相对表达量。结果:与空白组比较,模型组治疗后血糖、TG、CHO、LDL-C含量显著升高(P<0.05),HDL-C含量显著降低(P<0.05),MDA、ROS、HbA1c含量显著升高(P<0.05),SOD含量显著降低(P<0.05),SIRT1、AMPK、GLUT4、AdipoR1 mRNA表达量显著降低(P<0.05),SREBP-1c mRNA表达量显著增加(P<0.05)。与模型组比较,各给药组能降低大鼠血糖、TG、CHO、LDL-C、MDA、ROS、HbA1c含量(P<0.05),升高HDL-C、SOD含量(P<0.05),提升SIRT1、AMPK、GLUT4、AdipoR1 mRNA表达量(P<0.05),降低SREBP-1c mRNA表达量(P<0.05)。结论:黄芪葛根汤与瓜蒌汤合方降低糖尿病动脉粥样硬化大鼠血糖血脂可能与刺激AdipoR1分泌,激活SIRT1/AMPK信号通路,调节下游因子GLUT4、SREBP-1c的活性有关。黄芪葛根汤与瓜蒌汤合方降低氧化应激反应可能与降低ROS、MDA表达,增加SOD、SIRT1表达有关。