微RNA-21表达下调可抑制人结肠癌SW620细胞在裸鼠体内的生长

目的 :探讨反义寡核苷酸(antisense oligonucleotides,ASOs)下调微RNA-21(micro RNA-21,mi R-21)表达对高侵袭性人结肠癌SW620细胞在裸鼠体内生长的影响。方法 :首先建立人结肠癌SW620细胞的裸鼠荷瘤模型,并于肿瘤局部分别注射p-mi R-21-ASOs重组质粒或p-Cont对照质粒,然后观察裸鼠体内肿瘤的生长变化。末次注射5 d后,处死裸鼠,剥取肿瘤组织,测量各组肿瘤组织的大小和质量。采用HE染色法观察肿瘤组织形态学变化;TUNEL法检测肿瘤局部细胞凋亡情况;免疫组织荧光法检测肿瘤组织中增殖核抗原Ki-67蛋白的表达变化;实时荧光定量PCR法检测肿瘤组织中mi R-21成熟体的表达,以及细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)2、CDK3、CDK4和CDK6的表达变化;蛋白质印迹法检测磷酸化蛋白激酶B(phosphorylated protein kinase B,p-PKB,又称为p-Akt)和磷酸化细胞外信号调节激酶(phosphorylated extracellular regulated protein kinase,p-ERK)的表达水平。结果 :与p-Cont对照组相比,p-mi R-21-ASOs质粒转染组的肿瘤生长缓慢(P<0.05),剥离肿瘤的质量明显减少(P<0.01),肿瘤组织中可见大片坏死区域,而且肿瘤细胞中mi R-21成熟体的表达水平明显下调(P<0.01)。mi R-21表达下调后,肿瘤组织中Ki-67的表达量明显减少(P<0.01),而相对凋亡细胞数明显增多(P<0.05);并且,细胞周期相关分子CDK2、CDK3、CDK4和CDK6的表达均明显下调(P值均<0.001),Akt和ERK蛋白的磷酸化水平也均明显下调(P值均<0.05)。结论 :ASOs下调mi R-21表达可显著抑制人高侵袭性结肠癌细胞在裸鼠体内的生长,提示mi R-21可作为结肠癌基因治疗的一个潜在新靶标。