JS-K的抗肿瘤作用研究进展

肿瘤已经成为当今社会的重大健康问题,作为抗肿瘤药物开发的一氧化氮供体药JS-K在这方面引人注目,其具有广谱的抗肿瘤活性。到目前为止,已有研究表明JS-K在白血病、多发性骨髓瘤、肝癌、肺癌和乳腺癌等多种肿瘤细胞中有良好的抗肿瘤作用,也有研究表明JS-K具有对正常细胞几乎没有杀伤作用的特点,本课题组前期研究发现JS-K也具有抗病毒的作用,并对乙肝病毒转染的HepG2.2.15细胞有很好的生长抑制作用。本文通过查阅国内外相关文献,对JS-K的抗肿瘤研究进展作一综述,以期为JSK对抗病毒引起的肝肿瘤的研究提供一定的参考和借鉴。

处理细胞培养污染的新方法

在进行细胞组织培养时,虽然做了大量的消毒和灭菌工作,实验中又注意做到无菌操作,但仍不能完全避免污染.细胞培养产生的污染最常见的是细菌和真菌污染.一般处理污染采用比常用量大5～10倍的冲击(即青霉素和链霉素合用,剂量为每毫升培养液各500～1000U).但这种方法常常不能清除培养液中的微生物.

慢病毒介导过表达NTCP的NTCP-SK-Hep1细胞系构建

目的建立钠离子-牛磺胆酸共转运蛋白(NTCP)过表达的肝癌细胞系,以作为研究乙肝病毒(HBV)感染的细胞模型。方法构建NTCP慢病毒重组质粒Gv-NTCP,挑取克隆进行PCR扩增和序列测定;将阳性重组质粒与慢病毒辅助质粒共转染HEK293T细胞,包装Gv-NTCP慢病毒并进行病毒滴度测定;Gv-NTCP慢病毒感染人肝癌细胞株SK-Hep1,嘌呤霉素筛选,通过荧光显微镜,PCR和Western blot检测NTCP的表达。结果测序结果证实Gv-NTCP慢病毒载体构建成功;在HEK293T细胞中包装的Gv-NTCP慢病毒滴度为2.0×10~8TU/m L;该病毒感染SK-Hep1细胞后,在荧光显微镜下可见感染细胞表达绿色荧光,PCR结果显示感染组的NTCP表达明显增高,WB结果显示感染组的NTCP蛋白表达明显增高。结论成功建立了NTCP过表达的人肝癌细胞系NTCP-SK-Hep1。