浅析新形势下人体生理学教学要点

人体生理学是研究正常人生命活动及其规律的科学,是理论性和实验性很强的功能性学科。作为一门基础的医学课程,要求医学生必须学好,学懂,为后续的医学课程学习夯下坚实的基础。通过教学相长会了解到本科医学生普遍对生理学产生难学,难记甚至放弃的念头,分析主要存在以下原因:

病理生理学传统讲授教学方式改革探讨

病理生理学是一门研究疾病发生发展规律的医学基础学科,其教学内容亦是临床各学科学习的重要基础。病理生理学的课程内容具有明显的深度和广度,单纯的传统课堂讲授不利于学生对相应知识点的理解,也让教学变得较为枯燥。为此,我们病理生理学教研室尝试了在课程教学中引入新的理念和方式,以此增强学生对教学内容的理解与记忆,提高学生学习的兴趣。此文的目的就是与大家分享我们在病理生理学教学工作中的经验,期望能够对医学的教学改革有所帮助。

病理生理学教学中翻转课堂模式的应用探究

为了探究翻转课堂教学模式在病理生理学教学中的有效性和适用性,我们于2018年3月至5月采用方便抽样法选取遵义医学院2016级本科临床医学专业4个教学班级的学生作为研究对象。对照组采用传统讲授形式的教学方法进行病理生理学理论教学,试验组采用翻转课堂模式,并分为课前短视频、课中互动讨论、课后案例分析三组。结果显示翻转课堂模式组学生考试成绩显著优于传统教学组,同时选择课前短视频教学的翻转课堂模式的考试成绩与知识点掌握情况组显著优于其他两种翻转课堂教学模式。

机能设计性实验与医学生创新思维能力的培养

如何将医学生培养成具有开拓创新精神的高素质人才,是目前我国高等医学教育面临的重要问题。医学机能实验学是以生理学、病理生理学和药理学等相关基础医学知识为理论基础的综合性实验学科。其中,设计性实验作为机能实验教学的重要组成部分,其模拟科研过程的实验教学模式是提高医学人才创新思维能力和综合科研素质的重要途径之一。因此,有必要在机能设计性实验教学中,针对不同环节,采取相应策略,培养并提高医学生创新思维能力和综合科研素质。该教研室经过几年的探索,已取得初步成效。

脊髓背角P2Y_(12)受体/P38MAPK参与MRS2395对CCI大鼠的镇痛作用

目的:观察鞘内注射P2Y12受体拮抗剂MRS2395对慢性坐骨神经结扎(chronic constriction injury,CCI)大鼠机械痛阈及脊髓背角P2Y12受体、P2X4受体和P38MAPK表达变化的影响,探讨P2Y12受体参与神经病理性疼痛的相关机制。方法:成年SD大鼠随机分为3组(n=8):假手术组、CCI模型vehicle组(鞘内注射0.005%DMSO生理盐水)、MRS2395处理组(CCI+鞘内注射MRS2395 100 pmol/L)。CCI及MRS2395处理组大鼠均于鞘内置管7天之后行坐骨神经结扎,连续14天鞘内注射0.005%DMSO生理盐水、MRS2395(100 pmol/L),每天2次,在术前1天、术后第1、3、5、7、10、14天测定给药1 h后机械缩足反射阈值(mechanical withdraw threshold,MWT);在第7、14天处死大鼠,取脊髓背角,免疫印迹观察P2Y12受体、P2X4受体和P38 MAPK表达变化。结果:大鼠CCI术后1天即可出现机械痛敏;与假手术组相比,CCI组第1、3、5、7、10、14天MWT明显降低(P<0.01);与CCI组相比,MRS2395处理组术后第1,3,5,7天MWT明显升高(P<0.01);术后10天和14天MWT升高较缓(P<0.05)。与假手术组相比,CCI组第7、14天背角P2X4受体、P2Y12受体和P38 MAPK表达明显上调(P<0.05);与CCI组相比,MRS2395处理组第7、14天P2Y12受体和P38MAPK表达上调均明显减弱(P<0.05);MRS2395处理组不影响CCI组第7天P2X4受体表达,但可以明显抑制CCI组第14天P2X4受体表达上调(P<0.05)。各组大鼠脊髓背角P2Y12受体和P2X4受体表达之间存在正相关。结论:鞘内注射P2Y12拮抗剂MRS2211可以明显抑制CCI大鼠机械痛敏症状;而且脊髓背角P2X4受体和P38 MAPK表达下调。这提示P2Y12受体拮抗剂可能通过影响脊髓背角小胶质细胞P2X4受体和P38 MAPK表达,在脊髓水平发挥镇痛作用。

脊髓糖皮质激素受体在神经病理性疼痛中的作用

目的观察脊髓背角糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)在慢性病理性神经痛中的作用。方法成年SD大鼠分为假手术组、坐骨神经慢性压迫损伤(CCI)组、CCI+生理盐水组、CCI+RU38486治疗组。测定各组大鼠不同时间点热缩足反射潜伏期(TWL);CCI组于术后7、14 d处死大鼠,取L4～L6脊髓冰冻切片,应用免疫组织化学方法观察GR表达变化;大鼠蛛网膜下腔埋管,于CCI术后1～14 d鞘内注射生理盐水、GR拮抗剂RU38486,测定其对TWL的影响。结果 CCI大鼠术后1 d损伤侧下肢TWL即显著降低,到第14天热疼敏仍持续存在;术后7、14 d损伤侧L4～L6节段脊髓背角GR表达显著增加(P<0.05);术后1～14 d鞘内给予GR拮抗剂RU38486可明显减轻CCI所致的热疼敏。结论脊髓背角糖皮质激素受体的激活可促进坐骨神经慢性压迫损伤所致的神经痛的发生和维持。

大麻素抑制背根节神经元ATP诱发的[Ca^(2+)]i升高

目的:观察大麻素对背根节神经元ATP诱发的[Ca^(2+)]i升高的影响及机制。方法:培养SD大鼠背根节神经元,采用激光共聚焦技术检测培养神经元[Ca^(2+)]i的变化。结果:ATP(100μmol/L)经P2X受体介导可导致培养的背根节神经元[Ca^(2+)]i增高(P<0.05);大麻素受体激动剂CP55940预孵育10 min可剂量依赖性地抑制背根节神经元ATP所致的[Ca^(2+)]i升高(P<0.05);CB1受体(cannabinoid receptor 1,B1R)的拮抗剂AM251(10μmol/L)、CB2受体(Cannabinoid receptor 2,CB2R)的拮抗剂AM630(10μmol/L)均可显著降低CP55940(1μmol/L)的抑制效应(P<0.05);腺苷酸环化酶激动剂Forskolin(10μmol/L)可逆转CP55940对ATP的抑制作用(P<0.05)。结论:CP55940可显著抑制背根节神经元ATP诱发的[Ca^(2+)]i升高,CP55940的抑制效应可能是由CB1、CB2受体介导抑制背根节神经元PKA活性所致。

地塞米松对大鼠背根神经节细胞ATP激活电流的快速抑制作用

目的探讨地塞米松对大鼠背根神经节（DRG）神经元ATP激活电流的快速调节作用及其相关信号机制。方法采用酶加机械法分离、培养大鼠DRG神经元,全细胞膜片钳法记录ATP激活电流及地塞米松对ATP激活电流的影响。结果细胞外给予ATP（100μmol/L）在大鼠DRG神经元可引起3种内向电流,即快速脱敏感反应电流（快反应电流）、慢速脱敏感反应电流（慢反应电流）及混合电流。预先给予地塞米松（0.01~10μmol/L）可剂量依赖性地抑制ATP快反应电流及混合电流中的快反应电流成分,而对慢反应电流及混合电流中的慢反应电流成分无明显影响。地塞米松对ATP激活电流的快速抑制作用可被糖皮质激素受体拮抗剂RU38486（10μmol/L）、蛋白激酶A抑制剂H-89（10μmol/L）阻断,而G蛋白激活抑制剂GDP-β-S（0.2mmol/L）、蛋白激酶C抑制剂Chelerythrine chloride（10μmol/L）对地塞米松的快速抑制作用无明显影响。结论地塞米松通过糖皮质激素受体激活细胞内PKA信号途径可选择性地抑制大鼠DRG神经元中由P2X3受体介导的ATP快反应电流,提示糖皮质激素可能通过非基因组作用影响初级感觉神经元的ATP/P2X3受体功能而参与痛觉的调制。

地塞米松快速升高大鼠脊髓背角星形胶质细胞钙浓度

目的观察地塞米松(dexamethasone,Dex)对培养的脊髓背角星形胶质细胞内游离Ca2+浓度([Ca2+]i)的影响,并初步探讨其作用机制。方法培养纯化新生SD大鼠脊髓背角星形胶质细胞,激光共聚焦显微镜检测星形胶质细胞[Ca2+]i的变化。结果 Dex可导致培养的脊髓背角星形胶质细胞[Ca2+]i快速升高,且呈现剂量依赖性(P<0.05);Dex诱导的星形胶质细胞[Ca2+]i升高是以外钙内流为主;G蛋白阻断剂百日咳毒素(100 ng/mL)可阻断Dex所致的星形胶质细胞[Ca2+]i升高效应(P<0.01),而糖皮质激素细胞质可溶性受体(GR)拮抗剂RU38486(10μmol/L)对Dex的效应无影响;此外,蛋白合成抑制剂放线菌酮对Dex所致的星形胶质细胞[Ca2+]i升高效应无阻断作用。结论 Dex可能通过由糖皮质激素膜受体介导的非基因组作用途径快速升高脊髓背角星形胶质细胞[Ca2+]i。

多指标正交设计评价和优化巴马香猪精液冷冻稀释液

该文通过多指标正交实验设计对巴马香猪精液冷冻稀释液中低密度脂蛋白(LDL,因素A)、海藻糖(因素B)和甘油(因素C)等3种保护剂联合使用时的作用进行评价,并分别对3种物质的最佳体积质量分数、摩尔浓度和体积百分比进行优化.结果表明3种保护剂对精子活率(TMS)、质膜完整性(PMI)和彗星率(CR)作用的主次顺序均为A>C>B,对精子顶体完整性(AI)作用的主次顺序为B>A>C;3种保护剂对TMS和PMI均有极显著的保护作用(p<0.01),对CR均无显著性作用(p>0.05);LDL和海藻糖对AI有显著的保护作用(p<0.05),甘油对AI无显性作用(p>0.05);通过因素与指标关系趋势图的绘制,发现由各个指标得到的最佳组合均为A2B3C2,且指标间的相关性均达到了显著水平(p<0.05).因此,用TMS,PMI,AI和CR评价巴马香猪冷冻-解冻后精液质量时,指标间不存在矛盾,用9%(w/v)低密度脂蛋白、200mmol/L海藻糖和2%甘油为巴马香猪精液冷冻稀释液中最优组合.

20-HETE对大鼠心肌缺血再灌注损伤中NADPH氧化酶活性及ROS生成的影响

目的探讨20-HETE加重大鼠离体心肌缺血再灌注损伤的作用及机制。方法雄性Wistar大鼠随机分为正常对照组(Con组),缺血再灌注模型组(IR组),IR+20-HETE合成酶抑制剂(HET0016)组,Con+HET0016组,每组12只,通过Langendorff灌流系统建立大鼠离体心肌缺血再灌注模型,全心缺血35 min再灌注40 min,Power Lab/8P系统实时监测心肌力学指标;灌流结束后取心肌组织TTC法检测心肌梗死面积;DHE荧光探针法检测活性氧簇(reactive oxygen species,ROS)含量;Western blot检测NADPH氧化酶亚基p47^(phox)磷酸化水平;细胞色素C的还原法检测NADPH氧化酶活性。结果离体心脏缺血再灌注后,加入20-HETE合成酶抑制剂HET0016(1μmol/L)后明显改善了IR导致的心肌力学指标下降,LVDP由IR组的(48.6±3.4)%升至(71.7±3.5)%,+d P/dt_(max)由(51.9±2.1)%升至(69±3.2)%,-d P/dt_(max)由(47.1±3.6)%升至(64.1±3.8)%(P<0.05);IR+HET0016组心肌梗死面积比IR组减小了37.2%(P<0.05)。DHE荧光探针检测发现IR+HET0016处理组心肌组织中ROS含量比IR组降低了45.8%(P<0.05);最后通过对NADPH氧化酶活性检测发现,HET0016显著减少了IR引起的NADPH氧化酶p47^(phox)亚基磷酸化水平及全酶活性的升高(P<0.05)。结论 20-HETE通过激活NADPH氧化酶诱导过量ROS的生成,加重心肌缺血再灌注损伤。

脊髓背角P2X_4、P2Y_(12)和P2Y_(13)受体参与AM1241对CCI大鼠的镇痛效应

目的观察鞘内注射大麻素CB2受体激动剂AM1241对慢性坐骨神经结扎(CCI)大鼠机械痛阈、脊髓背角P2X4、P2Y12和P2Y13受体表达变化的影响。方法健康成年雄性Sprague-Dawley大鼠40只随机分为5组(n=8):假手术组、CCI组(坐骨神经结扎+鞘内注射0.005%DMSO生理盐水)、1 pmol/LAM1241处理组(坐骨神经结扎+鞘内注射AM1241 1pmol/L)、10 pmol/LAM1241处理组(坐骨神经结扎+鞘内注射AM1241 10 pmol/L)、100 pmol/LAM1241处理组(坐骨神经结扎+鞘内注射AM1241 100 pmol/L)。CCI组及不同浓度AM1241处理组大鼠均于鞘内置管7 d之后行坐骨神经结扎,连续14 d鞘内注射,每天2次;分别在术前1 d,术后第1、3、5、7、10、14天注射1 h后测定机械痛阈(MWT),分别在术后第7,14天免疫印迹法(western blot)观察脊髓背角P2X4、P2Y12和P2Y13受体表达变化。结果 1CCI组术后第1、3、5、7、10、14天MWT显著低于假手术组(P<0.05),10 pmol/L AM1241和100 pmol/L AM1241处理组术后第1、3、5、7天MWT明显高于CCI组(P<0.01);但10 pmol/L AM1241处理组术后第10、14天MWT与CCI组相比无明显差异(P>0.05);100 pmol/L AM1241处理组术后第10、14天MWT仍高于CCI组(P<0.05);2与假手术组相比,CCI组术后第7、14天脊髓背角P2X4、P2Y12和P2Y13受体表达显著上调(P<0.01);与CCI组相比,100 mol/L AM1241处理组在术后第7天抑制脊髓背角P2Y12和P2Y13受体表达(P<0.05),在术后第14天抑制背角P2X4受体表达(P<0.05)。结论大麻素CB2受体激动剂AM1241的镇痛效应可能与抑制脊髓背角小胶质细胞P2X4、P2Y12和P2Y13受体表达有关。

人胎盘CD133^+、CD133^-细胞组份中高增殖潜能集落形成细胞及其表型特征的初步探讨

目的研究人胎盘CD133+、CD133-细胞亚群中高增殖潜能集落形成细胞(HPP-CFC)频率及表型特征。方法采用机械法制备人胎盘组织(PT)游离细胞悬液,用Histopaque-1077分离出单个核细胞(MNCs),经磁式分选(MACS)分离纯化CD133+和CD133-细胞。将分选的CD133+和CD133-细胞分别使用H4435培养基培养4wk后观察HPP-CFC集落形成能力,用流式细胞仪(FCM)对分选的细胞组份和HPP-CFC进行表型分析。结果培养4wk后,PT-CD133+、CD133-细胞生成的HPP-CFC集落分别为32.4±11.2/5×103、2.0±2.3/5×103,前者细胞中HPP-CFC数量明显高于后者(P<0.01);PT-CD133+、CD133-细胞培养至28d时CD133+CD34+、CD133+CD34-和CD133-CD34+亚型均比培养前减少。结论人胎盘组织CD133+与CD133-细胞群中均存在HPP-CFC,但CD133+细胞群中的HPP-CFC明显多于CD133-细胞群,说明胎盘CD133+细胞群中存在更多的早期HSPC。

皮质酮对大鼠脊髓背角星形胶质细胞活动的影响

目的:探讨皮质酮(corticosterone,CORT)对培养的大鼠脊髓背角星形胶质细胞活性的调节作用。方法:培养纯化新生SD大鼠脊髓背角星形胶质细胞,荧光双重标记技术检测培养的星形胶质细胞糖皮质激素受体(glucocorticoid receptor,GR)及胶质纤维酸性蛋白(glial fibrillary acidic protein,GFAP)共表达;免疫印迹技术检测星形胶质细胞GFAP表达的变化;高效液相色谱法(high performance liquid chromatography,HPLC)检测星形胶质细培养液中谷氨酸含量。结果:培养的脊髓背角星形胶质细胞均表达GR;CORT孵育3 h可降低脊髓背角星形胶质细胞GFAP表达,GR拮抗剂RU38486可阻断CORT的作用;但CORT对星形胶质细胞谷氨酸释放无显著影响。结论:CORT可降低脊髓背角星形胶质细胞GFAP表达,但对谷氨酸释放无显著影响。

脊髓背角大麻素受体2介导CP55940对CCI大鼠的镇痛作用

目的观察脊髓背角大麻素受体2(CB_2R)是否参与大麻素类药物CP55940对慢性坐骨神经缩窄性损伤(CCI)所致神经病理性疼痛的镇痛作用,并初步探讨其机制。方法成年SD大鼠随机分为4组:对照组、CCI组(鞘内注射DMSO生理盐水)、CP55940+CCI组(鞘内注射0.05 mg/kg CP55940)、AM630+CP55940+CCI组(鞘内注射10^(-8)mol/L AM630,20 min后再给予0.05 mg/kg CP55940)。各组大鼠均于鞘内置管5 d后行CCI术,术后连续14 d鞘内注射给药,每天1次;于CCI术前1 d,术后第1、3、5、7、10、14天鞘内给药1 h后测定热缩足潜伏期(TWL)。分别于CCI术后第7天和第14天处死大鼠,取术侧L_4~L_6脊髓背角,采用免疫印迹技术检测脊髓背角CB_2R及丝裂原活化蛋白激酶家族中p38(p38 MAPK)表达情况。结果大鼠CCI术后即形成稳定的热痛敏,TWL明显缩短;鞘内给予非选择性CB受体激动剂CP55940(0.05mg/kg)可明显延长CCI大鼠TWL(P<0.05);选择性CB_2受体拮抗剂AM630(10^(-8)mol/L)可部分阻断CP55940的镇痛效果(P<0.05)。免疫印迹实验结果显示,CCI术可导致术侧脊髓背角CB_2R、p38表达增加(P<0.01);鞘内给予CP55940可诱导CCI所致的CB_2R表达进一步增加(P<0.01),但明显降低CCI所致的p38表达增加(P<0.01);预先鞘内注射CB_2R拮抗剂AM630可阻断CP55940对CB_2R及p38表达的影响(P<0.01)。结论鞘内给予大麻素类药物CP55940对CCI所致的神经痛具有良好的镇痛效应,CB_2R通过可能抑制脊髓背角胶质细胞p38的活性参与了CP55940的镇痛作用。

脊髓背角HCN通道在神经病理性疼痛中的作用

目的:观察脊髓背角超极化激活环核苷酸门控阳离子通道(HCN通道)在坐骨神经缩窄性损伤(CCI)所致的慢性神经病理性疼痛中的作用。方法:8周龄成年雄性SD大鼠48只随机分为6组:(1)sham组(假手术组)、(2)CCI组(鞘内注射生理盐水)、(3)^(6)ZD7288+CCI(鞘内分别注射1,10,30,50μg ZD7288),每组8只。CCI及CCI+ZD7288组大鼠在鞘内置管5 d后行CCI术,术后鞘内给药,每日两次,连续14 d;sham组大鼠不进行鞘内置管,仅游离坐骨神经,不结扎。分别于CCI术前1 d,术后1、3、5、7、10、14 d鞘内给药2 h后测定热缩足潜伏期(TWL);术后第7、14 d处死大鼠,取术侧L4~L6脊髓背角,采用Western Blot技术检测脊髓背角HCN1,3,4及磷酸化蛋白激酶A(P-PKA)表达的变化。结果:大鼠CCI术后即形成稳定的热痛敏,TWL明显缩短;与CCI组相比,鞘内给予HCN通道阻滞剂ZD7288可明显延长CCI大鼠的TWL(P<0.05)。Western Blot结果显示,与假手术组相比,CCI组大鼠在术后7、14 d术侧脊髓背角HCN1,3,4及P-PKA表达显著增加(P<0.05);鞘内给予ZD7288可显著降低CCI大鼠HCN1,3,4及P-PKA的表达(P<0.05)。结论:脊髓背角HCN通道的激活可促进CCI所致的神经病理性痛的发生与维持,HCN通道阻滞剂ZD7288具有良好的镇痛效应,ZD7288的镇痛作用可能与其抑制PKA的活性密切相关。

外源性硫化氢改善癫痫大鼠脑认知功能障碍

目的探讨外源性硫化氢对癫痫(epilepsy,EP)所致大鼠脑认知功能障碍的保护作用及机制。方法利用氯化锂-匹罗卡品腹腔注射复制雄性SD大鼠96只,6周龄,体质量180～220 g。癫痫模型,大鼠分为正常对照组(NC组)、癫痫模型组(EP组)、癫痫+硫氢化钠组(NaHS组);采用Morris水迷宫检测大鼠的空间学习记忆能力;实时荧光定量PCR检测海马中的胱硫醚-β-合酶(CBS)mRNA和CREB mRNA表达变化。结果 EP组的空间辨别学习记忆能力与NC组比较明显减退:Morris水迷宫定位航行实验中逃避潜伏期明显延长(P<0.01),第3象限探索有效时间显著缩短(P<0.05)、第3象限游泳距离占总距离的百分比以及穿越平台次数明显减少(P<0.01);NaHS可提高癫痫大鼠的学习记忆能力,与EP组比较,空间学习记忆能力各项检测指标均有显著差异(P<0.05,P<0.01)。7、30 d时EP组大鼠海马CBSmRNA表达水平明显低于NC组(P<0.05),而NaHS组CBS mRNA表达水平明显高于EP组(P<0.05);EP组海马CREBmRNA表达在7、30 d时均明显低于NC组(P<0.05),而NaHS组CREB mRNA在24 h、7、30 d时表达显著高于EP组(P<0.05),与NC组相比,7、30 d时均无差异(P>0.05)。结论外源性H2S可能通过上调癫痫大鼠其海马CBS、CREBmRNA表达来改善癫痫大鼠的学习记忆能力。

鞘内注射MRS2395对慢性坐骨神经结扎大鼠脊髓背角钙离子接头蛋白-1表达的影响

目的观察鞘内注射P2Y12受体拮抗剂MRS2395对慢性坐骨神经结扎(CCI)大鼠热痛阈及脊髓背角钙离子接头蛋白-1(Iba1)表达变化的影响。方法成年SD大鼠40只,随机均分为五组:假手术组(A组)、CCI模型组(鞘内注射生理盐水,B组)、CCI+鞘内注射MRS2395 1pmol/L组(C组);CCI+鞘内注射MRS2395 10pmol/L组(D组);CCI+鞘内注射MRS2395 100pmol/L组(E组)。B、C、D、E组大鼠均于鞘内置管5d之后行慢性坐骨神经结扎,分别连续14d鞘内注射生理盐水、MRS2395 1、10、100pmol/L,2次/天,分别在术后第1、7、10、14天测定首次给药1h后的热缩足潜伏期(TWL);分别在第7、14天灌注大鼠取脊髓做冰冻切片,观察大鼠脊髓背角Iba1表达的变化。结果术后第1、3、5、7、10、14天B、C、D、E组大鼠TWL明显短于A组,且C、D、E组TWL明显长于B组(P<0.05)。与A组相比,术后第7、14天B、C、D、E组Iba1阳性细胞个数、平均光密度值明显增加(P<0.05)。与B组比较,术后第7、14天C、D、E组脊髓背角Iba1阳性细胞数目明显减少,其平均光密度值明显降低(P<0.05)。结论鞘内注射P2Y12受体拮抗剂MRS2395可以明显抑制CCI大鼠背角小胶质细胞激活和热痛敏症状,提示P2Y12受体拮抗剂可能通过抑制脊髓小胶质细胞的活化而发挥镇痛作用。

复方莪术油脂质体的制备及质量评价

目的:制备复方莪术油脂质体(ZTOC-LPS)并对其质量进行评价。方法:以复方莪术油中莪术油(以吉马酮表征)和维A酸的包封率及载药量等为考察指标,筛选ZTOC-LPS的制备方法及处方中大豆卵磷脂(SPC)的加入量、脂质中SPC-胆固醇(CH)质量比、莪术油-脂质质量比、维A酸-脂质质量比、水浴温度;并对最优处方制备工艺所制脂质体进行质量评价和初步稳定性考察。结果:优选的制备方法为乙醇注入法;最优处方制备工艺为每1 m L脂质体中SPC 4 mg、SPC-CH质量比3∶1、莪术油-脂质质量比1∶9、维A酸-脂质质量比1∶70、水浴温度55℃。所制3批脂质体中莪术油和维A酸的平均包封率分别为(64.63±1.00)%和(90.33±0.72)%,载药量分别为(9.09±0.14)%和(1.43±0.02)%,粒径为(257.41±7.58)nm,Zeta电位为(-38.77±0.81)m V,多分散系数为0.10±0.04;离心加速试验结果显示脂质体具有良好的物理稳定性;脂质体样品在(4±2)℃条件下放置1个月时各项考察指标均未发生明显变化。结论:建立的制备方法简单可行,所制脂质体质量符合要求,可为后续复方莪术油新剂型的研究提供参考。

P2X3受体对中脑导水管周围灰质神经元放电的促进作用

目的：应用脑片膜片钳记录技术，探讨腺嘌呤核苷酸离子通道型3（P2X3）受体活化对大鼠中脑导水管周围灰质（PAG）外侧区（LPAG）神经元膜电位及动作电位发放频率的影响。方法：制备大鼠PAG脑片，在膜片钳全细胞记录模式下，观察LPAG神经元膜电位及动作电位发放频率以及给予P2X3受体激动剂n、β-me三磷酸腺苷（ATP）后对LPAG神经元兴奋性的影响。结果：记录32个LPAG神经元中有29个神经元观察到膜电位升高以及动作电位频率的增加（P〈O．05）。结论：P2X3受体活化具有促进LPAG神经元膜电位升高以及动作电位发放频率增加的作用。