急诊临床实习教学初探

急诊医学是一门实践性及操作性较强的学科,而实习教学是培养临床医师不能缺少的关键环节。初步探索通过实习教学管理制度化、临床体系框架(点、线、面、系)的构建及积极培养医学生的综合素质等。最终的目的是通过1年的学习,急诊医学生能为其工作后的再学习打下扎实的基础。

慢病毒介导的降钙素基因相关肽转染对大鼠骨髓间充质干细胞内皮分化的影响

目的:研究慢病毒介导的降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)基因转染对大鼠骨髓间充质干细胞(mesenchymal stem cells,MSCs)内皮分化功能的影响。方法:用密度梯度离心结合贴壁法培养大鼠骨髓MSCs,携带CGRP的慢病毒载体转染MSCs,未转染MSCs作为对照,应用ELISA法检测CGRP蛋白表达;实验分为转染Lenti-CGRP的MSCs(CGRP)组、转染Lenti-CGRP的MSCs+CGRP受体拮抗剂(CGRP8-37)组(CGRP+CGRP8-37)及未经转染的对照组。应用免疫细胞化学检测细胞CD31和Ⅷ因子相关抗原的表达以鉴定其分化能力;细胞计数法观察转染CGRP后MSCs增殖的影响;Matrigel实验观察转染CGRP对MSCs形成管腔样结构能力的影响。结果:MSCs转染CGRP基因经诱导分化后的CD31和Ⅷ因子相关抗原阳性细胞数量增多,与对照组相比有显著差异(P<0.05);转染CGRP组细胞数量增长较快,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05);Matrigel实验显示转染CGRP组细胞微血管新生明显,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。而CGRP+CGRP8-37组上述作用明显被抑制。结论:转染CGRP基因能促进MSCs向内皮分化,并能促进内皮细胞增殖,在一定的条件下,可促进微血管新生。

大黄减轻多发伤合并休克兔肾脏损伤

严重创伤是社会关注的问题，已成为第一大社会公害，多发伤更是导致患者死亡的主要原因［1］，其伤情错综复杂，易并发休克及低氧血症，涉及多个部位及器官，肾脏是最易受到累及的器官之一，其所致肾脏损害越来越引起人们的重视。因此，在处理多发伤的同时，进行有效的肾脏保护很有必要。本课题组前期研究表明，大黄对多发伤兔肝及小肠有保护作用［2］。本研究拟进一步观察大黄对多发伤合并休克兔肾脏的保护作用，报告如下。

蛇咬伤致骨筋膜室综合征的诊治进展

蛇咬伤是一个严重影响公众健康的热带及亚热带急诊疾病，起病急、病情进展快，并发症多且严重，骨筋膜室综合征（OCS）是其并发症之一，文献报道其发病率为0．54％，虽发病率低，但若不能及时诊治，严重时可致截肢，甚至死亡。近年来，国内外有关蛇咬伤致OCS的报道增多，回顾蛇咬伤致OCS的诊治过程，缺乏系统完善的诊治体系及有力的循证依据，需要我们共同努力去建立一个完善的诊治体系，进一步探索蛇咬伤诊治的新思路。

降钙素基因相关肽对血管平滑肌细胞的心肌素表达及细胞炎症激活的作用

目的探讨降钙素基因相关肽(calcitonin gene-related peptide,CGRP)对体外培养的血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)心肌素表达及细胞炎症激活的影响。方法取大鼠胸主动脉,以组织块贴壁培养法获得VSMCs,根据不同的处理方案,分为对照组、IL-1β组、CGRP组、心肌素高表达组、心肌素干扰组和CGRP8-37组(CGRP受体拮抗剂组)。Western blot检测不同组VSMCs中心肌素和IL-6蛋白表达水平。结果以IL-1β处理VSMCs后,细胞培养24、48、72 h时IL-6表达水平均高于基线水平(P<0.05),而心肌素水平无显著变化;以高表达心肌素的腺病毒载体转染VSMCs并给予IL-1β处理后,与单纯IL-1β处理比较,各时间点IL-6水平显著下降(P<0.05)。CGRP组中各个时间点VSMCs内心肌素水平较同时间点IL-1β组心肌素水平显著增加[24 h:(1.17±0.03)vs(0.25±0.03);48 h:(2.04±0.05)vs(0.19±0.01);72 h:(0.96±0.02)vs(0.28±0.02);P<0.05],而细胞内IL-6表达水平较同时间点IL-1β组水平显著降低[24 h:(0.23±0.01)vs(0.77±0.03);48 h:(0.28±0.02)vs(1.35±0.04);72 h:(0.20±0.02)vs(1.04±0.04);P<0.05]。心肌素干扰组VSMCs中CGRP处理后各个时间点细胞内IL-6水平较CGRP组显著升高[24 h:(1.74±0.04)vs(0.51±0.01);48 h:(1.68±0.03)vs(0.29±0.01);72 h:(0.98±0.02)vs(0.31±0.01);P<0.05],且CGRP8-37组与CGRP组比较也获得类似结果,而心肌素干扰组和CGRP8-37组中同时间点的细胞内IL-6水平无明显差异。结论 CGRP通过促进VSMCs心肌素的表达而抑制IL-1β诱导的细胞炎症激活蛋白IL-6表达,且这一作用是CGRP通过与其受体结合后实现的。

降钙素基因相关肽对血管平滑肌细胞心肌素表达及细胞表型改变的作用

目的:研究降钙素基因相关肽(CGRP)对血管平滑肌细胞(VSMCs)心肌素表达的影响及对细胞表型改变的调节作用。方法:取大鼠胸主动脉,以组织块贴壁培养法获得VSMCs,分为对照组、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组(加入AngⅡ处理)、CGRP组(加入AngⅡ和CGRP处理)和CGRP8-37组(在AngⅡ和CGRP基础上加入CGRP8-37)。Western blot法检测VSMCs中心肌素及细胞表型标志蛋白α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)和骨桥蛋白(OPN)表达情况。结果:在VSMCs培养中,细胞心肌素表达水平随着培养时间延长逐渐降低,细胞培养48 h和72h时心肌素表达水平较基线水平显著降低(P<0.05);而加入CGRP处理后,心肌素表达水平逐渐增加,与基线水平比较,加入CGRP培养后48 h和72 h时细胞心肌素水平显著增加(P<0.05)。同时,在VSMCs培养48 h时,AngⅡ组细胞心肌素水平较对照组下降(P<0.05),且α-SMA表达亦相应下降(P<0.05),而OPN表达水平显著增加(P<0.05);CGRP组VSMCs心肌素水平较AngⅡ组增加,伴随着α-SMA表达水平增加(P<0.05),相反地OPN表达水平下降(P<0.05);CGRP8-37组心肌素和α-SMA表达水平较CGRP+AngⅡ组降低(P<0.05),而OPN表达较CGRP组增加(P<0.05)。结论:CGRP通过促进VSMCs心肌素的表达而抑制细胞表型转换,使细胞维持收缩表型,且这一作用是CGRP通过与其受体结合后实现的。

大黄对多发伤合并休克兔小肠的保护作用

目的:观察大黄对多发伤合并休克兔小肠的保护作用。方法:纯种大白兔24只,复制多发性创伤合并休克兔的模型,随机分为治疗组(常规+大黄治疗组),对照组(常规+安慰治疗组),假手术组,每组各8只。复苏24h后处死动物,取小肠行病理检查,并测量细胞线粒体二维平面形态计量学参数和三维平面形态计量学参数。结果:光镜显示治疗组小肠黏膜病理损害的程度较对照组有明显减轻,小肠黏膜上皮及腺体结构完整,间质内有少量炎症细胞浸润,可见杯状细胞增生。电镜显示治疗组上皮细胞、微绒毛、线粒体、内质网损害明显轻于对照组,上皮细胞单位胞浆内治疗组比对照组线粒体数量多,肿胀较轻微。结论:大黄能减轻多发伤合并休克后小肠上皮细胞病理改变,大黄对多发伤合并休克模型兔小肠损伤有显著保护作用。

重型颅脑损伤后并发神经源性肺水肿18例诊治分析

NPE是继发于各种严重的中枢神经系统损伤后导致突发性颅内压增高所致的急性肺水肿，而无原发的心、肺等疾病，起病急，病情重，死亡率高达90％^[1]，且易漏诊和延误治疗，但及时合理的治疗常能挽救不少重症患者的生命。NPE在颅脑损伤中的发病率并不低，尸检报告的发生率一般在11％～70％。一般在中枢神经系统病变后几分钟到几小时内发生，亦可在几天后发生^[2]。它与一般肺水肿临床表现略有不同。但其呼吸病理生理大体相同，即液体在肺脏内潴留和气体交换发生障碍，

注射用盐酸头孢甲肟治疗泌尿系感染的临床观察

目的:探讨注射用盐酸头孢甲肟对泌尿系统感染的临床疗效。方法:将30例病人随机分为观察组和对照组,观察组应用注射用盐酸头孢甲肟注射液,对照组应用头孢哌酮钠,疗程7～14天。结果:临床观察注射用盐酸头孢甲肟和头孢哌酮钠治疗泌尿系感染的有效率分别为86.7%和80%,细菌转阴率分别为80%和60%,不良反应发生率分别为6.7%和6.7%。结论:注射用头孢甲肟是治疗泌尿系感染有效、安全,效果优于头孢哌酮纳。

重楼对多发骨折—脂多糖两次打击模型大鼠的保护作用

目的:探讨重楼总皂苷(RPTS)对多发骨折—脂多糖两次打击模型大鼠的保护作用。方法:将70只Wistar大鼠随机分成3组,除空白对照组外,其余2组按多发骨折—脂多糖两次打击致脓毒症并急性肺损伤动物模型标准制模,制模后1小时,重楼干预组予重楼总皂苷(RPTS)灌胃。干预后6小时,部分动物采血,以ELISA法检测血清中TNF-α、IL-1β及IL-6浓度;各组留取肺组织,光镜下进行病理形态观察。剩余动物用以观察死亡率。结果:重楼干预组大鼠血清TNF-α、IL-1β及IL-6浓度显著低于模型对照组(P<0.001)。死亡率,重楼干预组显著低于模型对照组(P<0.05)。结论:重楼总皂苷对多发骨折-脂多糖两次打击模型大鼠具有保护作用,机制可能与下调血清中的TNF-α、ΙΛ-1β、IL-6水平从而减轻炎症反应以及减轻急性肺损伤有关。

儿童桡尺骨下段横折远端背向移位的手法治疗

目的探讨儿童桡尺骨下段横折远端背向移位的手法治疗。方法通过38例儿童桡尺骨下段横折远端背向移位采用骨折断端加大成角反折的治疗方法，31例经过6个月～8年（平均3．2年）随诊，经X线片检查和临床分析。结果26例解剖对位，腕关节伸屈、前臂旋转功能活动正常。5例功能对位，无血管及神经损伤。结论应用骨折断端加大成角反折手法治疗该型骨折，无并发症，可获得满意的复位效果。

急诊CT检查阴性脑挫裂伤15例

近年来，我国年急性颅脑损伤发病率约为100～200／10万人，占全身创伤第二位，死亡率处于第一位，致残率一直居高不下。轻型脑挫裂伤是临床较多见的一种原发性脑损伤，早期CT检查颅内无明显异常，加之临床不够重视，易造成漏、误诊，亦易致死、致残。Shukla等报告成年人轻型颅脑损伤致死率约为0．1％、致残率约为10％。2008年10月-2011年9月，我院急诊留观共发现15例急诊CT报告阴性的脑挫裂伤。现报告如下。

降钙素基因相关肽和受体活性修饰蛋白1对血管平滑肌细胞迁移的影响及机制

目的 探讨转染降钙素基因相关肽（CGRP）的骨髓间充质干细胞（MSC）对血管平滑肌细胞（VSMC）迁移的影响,及活性修饰蛋白1（RAMP1）在其中的作用和机制.方法 分离、培养大鼠MSC和VSMC,分别应用携带CGRP和RAMP1的慢病毒载体转染MSC和VSMC,然后将MSC与血管紧张素Ⅱ（AngⅡ）诱导的VSMC共培养.实验分为5组：（1） AngⅡ对照组（MSC＋ VSMC＋ AngⅡ）;（2） MSCCGRP＋组（MSCCGRP＋＋ VSMC＋ AngⅡ）;（3）MSCCGRP＋ RAMP1 组（MSCCGRP＋＋ VSMCRAMP1-＋AngⅡ）;（4） MSCCGRP＋ RAMP1＋组：（MSCCGRP＋＋ VSMCRAMP1＋＋ AngⅡ）;（5） RAMP1＋ （MSC＋VSMCRAMP1＋＋ AngⅡ）.应用Transwell实验评价VSMC的迁移能力,Western blot检测蛋白的表达水平.结果 Transwell实验结果显示,MSCCGRP＋组VSMC迁移数量[（50.8±2.6）个]少于AngⅡ对照组[（71.4±2.3）个],而多于MSCCGRP＋ RAMP1＋组[（30.4±3.0）个]（P均＜0.05）;MSCCGRP＋ RAMP1-组VSMC迁移数量[（69.0±5.6）个]多于MSCCGRP＋ RAMP1＋组（P＜0.05）,而与AngⅡ对照组差异无统计学意义（P＞0.05）;RAMP1＋组VSMC迁移数量[（71.6±3.4）个]与AngⅡ对照组差异也无统计学意义（P＞0.05）.Western blot结果显示,MSCCGRP＋组磷酸化核因子-κB P65（P-P65）蛋白表达水平低于AngⅡ对照组（0.475±0.022比0.642±0.035,P＜0.05）;MSCCGRP＋ RAMP1-组P-P65蛋白表达水平高于MSCCGRP＋ RAMP1＋组（0.670±0.030比0.373 ±0.041,P＜0.05）,而与AngⅡ对照组差异无统计学意义（P＞0.05）;RAMP1＋组P-P65蛋白表达量（0.643 ±0.039）与AngⅡ对照组比较差异也无统计学意义（P＞0.05）.结论 RAMP1对CGRP抑制VSMC迁移起促进作用,RAMP1-CGRP通过核因子-κB信号通路抑制VSMC迁移.

361例心脏起搏器植入术患者并发症发生情况及处理策略分析

目的分析361例心脏起搏器植入术患者并发症发生情况,并探讨相应处理策略。方法选择遵义医学院附属医院2010年6月—2014年6月收治的行心脏起搏器植入术的361例患者,随访截至2015年1月,回顾性分析患者心脏起搏器植入术术中及术后并发症发生情况,并总结相应处理策略。结果 361例心脏起搏器植入术患者并发症发生率为9.97%(41/361),其中电极移位10例(2.77%)、心律失常9例(2.49%)、囊袋血肿6例(1.66%)、囊袋感染6例(1.66%)、气胸5例(1.38%)、起搏器综合征3例(0.83%)、心力衰竭2例(0.55%)。经相应处理后患者基本恢复正常。结论心脏起搏器植入术的主要并发症有电极移位、心律失常、囊袋血肿、囊袋感染、气胸、起搏器综合征及心力衰竭。术前需评估心脏起搏器植入术可能出现的并发症,术中规范操作,术后加强随访管理,做到早发现、正确处理相应的并发症,以降低心脏起搏器植入术并发症发生率。

降钙素相关肽对骨髓间充质干细胞生物学特征影响的实验研究

目的 观察携带降钙素基因相关肽（CGRP）的慢病毒对细胞生存和分化的影响. 方法 培养大鼠骨髓间充质干细胞（MSCs）,携带CGRP的慢病毒载体转染MSCs（MSCsCGRP＋＋组）,空病毒载体转染MSCs作为对照组;应用流式细胞仪检测病毒转染率,酶联免疫吸附（ELISA）法测定CGRP蛋白表达,应用流式细胞仪及细胞免疫组化检测细胞表面标记物,胎盘蓝染色观察细胞存活能力,噻唑蓝（MTT）法检测细胞活力,β-半乳糖苷酶染色检测细胞衰老情况. 结果 携带CGRP的慢病毒转染MSCs后1d,荧光显微镜未观察到细胞有荧光,但ELISA测定MSCsCGRP＋ ＋组有少量CGRP表达,随着转染时间延长,细胞逐渐出现荧光,慢病毒转染MSCs后3d和4d,镜下可见强荧光表达,细胞转染率分别为（77.87％和79.58％）,ELISA检测MSCsCGRP＋＋组CGRP表达量较对照组[（19.53±0.50） pg/ml和（3.12±0.001） pg/ml]增加（t=48.964,P＜0.01）.慢病毒转染MSCs后3d,流式细胞仪检测MSCs仍高表达CD29和CD90,CD31的表达为24.75％,细胞转染后7d,CD31的表达为20.72％,与对照组6.63％比较CD31表达增加,vWF表达也随着转染时间延长表达逐渐增加;细胞转染后3d,MSCsCGRP＋/＋组及对照组均未见α-SMA表达,细胞转染14 d,在MSCsCGRP＋＋组α SMA染色仍阴性,对照组胞浆见α-SMA阳性表达;细胞转染后3d和7d,MTT及台盼蓝染色结果显示两组间细胞活力及存活情况均无差异性（3d细胞活力t=-0.253,3d细胞存活率t=-0.307,7d细胞活力t=0.290,7d细胞存活率t=-0.690,均P＞0.05）,β半乳糖苷酶检测细胞衰老程度在两组间差异也无统计学意义（3 d t=0.167,7 dt=0.141,均P＞0.05）,随着转染时间延长,细胞转染14d,MSCsCGRP＋＋组衰老程度较对照组降低（t=2.446,P＜0.05）. 结论 转染慢病毒后细胞生物活性无明显影响,细胞仍具有增殖分化能力,细胞转染分泌的CGRP能促进细胞向内皮分化,抑制细胞向平滑肌细胞分化,这为基因工程细胞疗法治疗血管增殖性疾病提供新的思路和理论及实验依据.