骨质疏松合并2型糖尿病老年男性患者血清Sclerostin水平及临床意义

目的分析骨质疏松合并2型糖尿病（T2DM）老年男性患者血清骨硬化蛋白（Sclerostin）表达水平及临床意义。方法选择2014年7月。2015年10月在遵义医学院第五附属（珠海）医院确诊骨质疏松症的老年男性患者80例，依据是否合并T2DM分为T2DM组（合并T2DM）与NDM组（非糖尿病），每组各40例。比较两组患者的Sclerostin水平；比较两组患者血钙、血磷、空腹血糖（FPG）、糖化血红蛋白（HbA1c）等生化指标以及k～L4、股骨颈、Ward三角区及大转子区域骨密度数值。应用直线相关分析评估Sclerostin血清水平与骨密度相关性。结果T2DM组血清Sclerostin、FPG及HbA。。显著高于NDM组（均P〈0．01），而两组血钙、血磷比较差异无统计学意义（P〉0．05）。T2DM组股骨颈、Ward三角区及大转子区域骨密度较NDM低（P〈0．05或P〈0．01），而两组L2～L4的骨密度比较差异无统计学意义（P〉O．05）。相关性分析显示，血清Sclerostin与股骨颈及ward三角的骨密度呈负相关（r=-O．650、-0．674，均P〈0．05），而与大转子区域及L2～L4的骨密度无相关性（P〉0．05）。结论骨质疏松合并T2DM老年男性患者血清Sclerostin表达水平较高，且与骨质疏松部位、糖尿病病程及血糖水平有相关性。

间接共培养条件下成熟脂肪细胞诱导成骨细胞成脂横向分化的能力

背景:细胞共培养技术是在体外条件下将细胞与另一种细胞共同培养。对于成骨细胞和脂肪细胞横向分化研究多采用体外条件下成脂诱导液诱导成骨细胞发生横向分化,而忽略了体内环境中细胞互相作用的因素。目的:探讨在Transwell间接共培养条件下成熟脂肪细胞诱导成骨细胞成脂横向分化的能力。方法:(1)选取小鼠成纤维样3t3-l1前体脂肪细胞进行成脂诱导为成熟脂肪细胞;(2)实验分组:A组接种成熟脂肪细胞(Transwell间接共培养体系下室),B组接种小鼠成骨样细胞mc3t3-e1(以1∶4比例接种到Transwell间接共培养体系上室),C组单独培养的小鼠成骨样细胞mc3t3-e1;(3)检测指标:分别在7,14,21 d倒置相差显微镜下观察细胞形态变化,检测各组细胞三酰甘油相对含量、成脂目的蛋白PPARγ2表达,并进行油红O染色以及茜素红染色观察;以0,24,36 h为截点检测B组与C组细胞增殖抑制率的变化。结果与结论:(1)培养2周时,3t3-l1细胞由长梭形变为圆形,胞质内脂滴增多呈亮圆形,油红O染色鉴定后备用;(2)细胞形态:B组共培养7 d时呈长梭形,未见透明脂滴;14 d时胞质内出现黑色颗粒及小圆形脂滴;21 d细胞形态由长梭形变为椭圆形或圆形,脂滴变大;(3)茜素红染色:7,14,21 d时B组细胞呈染色区减少的趋势,C组细胞无明显变化均呈大片着色区;(4)油红O染色:7,14,21 d时,B组细胞染色区呈递增趋势且与时间成正比,C组细胞染色阴性且无明显变化;(5)三酰甘油:B组细胞三酰甘油聚集量呈递增趋势且与时间成正比,B组组间及与A组相比差异有显著性意义(P<0.05),C组无明显变化(P>0.05);(6)MTT抑制率:B组细胞增殖抑制率与时间成正比,与C组差异有显著性意义(P<0.05);(7)Western blot实验:B组细胞PPARAγ2蛋白表达量呈递增趋势且与时间成正比,与A、C组相比,差异均有显著性意义(P<0.05);(8)结果提示,在Transwell间接共培养体系中,成骨细胞在成熟脂肪细胞诱导下呈现出成脂横向分化趋势,其中脂肪细胞代谢产物及细胞因子可明显抑制成骨细胞的增殖能力,其是否可以完全横向分化为脂肪细胞有待进一步研究。

去卵巢结合蔗糖铁诱导家兔铁蓄积状态骨质疏松模型的建立与评价

目的通过去卵巢结合蔗糖铁诱导家兔铁蓄积状态骨质疏松模型,以期为有关铁蓄积状态骨质疏松的实验研究提供动物模型基础。方法将30只5月龄的新西兰雌性家兔随机分为对照组、去势组和铁蓄积组;每组分别于术前1天检测血清1型前胶原氨基末端肽(P1NP),1型胶原羟基末端肽(CTX)及血清铁蛋白水平,并行腰椎骨密度测量;去势组和铁蓄积组手术切除双侧卵巢,对照组仅切开卵巢周围部分脂肪;1周后铁蓄积组耳缘静脉注射蔗糖铁,剂量为15 mg/kg,每周1次,共12周;对照组和去势组以同样方式和频次给予等量生理盐水注射;所有组分别于术后4、8、12、16、20、24周检测血清P1NP,CTX及血清铁蛋白水平,并行腰椎骨密度测量。结果 (1)所有家兔注射蔗糖铁后均未出现昏迷、抽搐、精神萎靡、呼吸急促等不良反应或致死的情况;(2)铁蓄积组血清铁蛋白水平在造模后8、12、16、20及24周均明显高于对照组(P<0.05);(3)铁蓄积组与去势组血清P1NP,CTX水平在造模后12周、16周、20周及24周均明显高于对照组(P<0.05);铁蓄积组血清P1NP,CTX水平在造模后20周及24周均明显高于去势组(P<0.05);(4)铁蓄积组与去势组腰椎骨密度丢失百分率均在造模后第24周超过25%(33.72%、25.92%)。结论去卵巢结合蔗糖铁可成功建立家兔铁蓄积状态骨质疏松模型。