人髓核细胞体外培养及冻存的实验研究

目的研究颈椎手术所取髓核组织培养髓核细胞的可行性,适合作为种子的代次,冻存复苏是否影响其传代。方法测量传1-5代次髓核细胞免疫组织化学法照片光密度（OD）值,观察胞质内Ⅱ型胶原蛋白含量的差异。通过噻唑蓝（MTT）试验观察冻存（实验组）与未冻存（对照组）髓核细胞增殖活力的差异。通过免疫组织化学法观察冻存对髓核细胞胞质内Ⅱ型胶原蛋白含量的影响。结果 1采用酶消化法可成功分离并培养出人髓核细胞,传1、2代细胞形态呈短梭型、三角形或多边形,传3代以后,细胞形态逐渐变为长梭型。2Ⅱ型胶原蛋白免疫组织化学法测OD值,传1与2代比较差异无统计学意义（P〉0.05）。3实验组细胞胞质内Ⅱ型胶原蛋白免疫组织化学法测得OD值与对照组细胞比较,差异无统计学意义（P〉0.05）,实验组细胞与对照组细胞MTT比色法测OD值比较,差异无统计学意义（P〉0.05）。结论 1经颈椎手术取得的髓核组织,可体外培养出髓核细胞,并可获得传代细胞。2传1、2代髓核细胞胞质内Ⅱ型胶原蛋白含量差异较小,细胞形态分化不明显,适宜做髓核组织工程学种子细胞。3冻存复苏处理未能使髓核细胞胞质内Ⅱ型胶原蛋白含量减少,细胞增殖活力亦未降低。

髓核细胞与干细胞共培养的研究进展

讨论开展髓核细胞与干细胞共培养相关研究现状进展。通过对种子细胞、共培养方式、生长因子等方面国内外研究进展进行讨论。通过椎间盘组织细胞与干细胞共培养增加细胞数量或诱导干细胞分化为髓核细胞可能是一种增加椎间盘细胞较为适当的方法。通过细胞共培养技术可能分泌延缓退行性变在组织细胞中发生发展提供新的途径,也是目前研究的热点。基础研究及临床应用有着广阔科研前景。