以健康教育基地为依托的口腔预防医学实验教学改革

目的探索预防口腔医学实验教学改革,优化人才培养方式。方法以口腔健康教育基地为依托,开展口腔预防医学实验教学改革,让大学生提前参与社区口腔保健,培养创新性与实用型相结合的口腔卫生人才。结果通过实验教学改革培养学生的学习能力、创新能力和团队精神,使实验教学成为理论教学与实践技能的桥梁。结论依托健康教育基地,发挥实验教学的作用,促进大学生成才及长远发展,培养社会需要的实用型口腔卫生人才。

提高医学硕士研究生综合实验技术课教学效果的探讨

医学综合实验技术是医学类硕士研究生学习阶段的一个重要组成部分,作者所在院校通过加强师资队伍建设、优化教学内容、调整教学方法、改革考试方式等实验教学改革,让研究生在有限的实验课程时间内不但能掌握实验技术,还能激发其创新意识和创新精神,显著地提高了医学研究生综合实验技术课的教学质量和效果。

多孔羟基磷灰石椎间融合器制备工艺研究

目的制备一种具有三维贯通孔隙结构的生物活性椎间融合器模型。方法选取羟基磷灰石粉体、聚乙二醇6000(PEG6000)、甲基纤维素(MC)和双氧水为原料,采用气体发泡法制孔成型,通过调节成型时加入不同的双氧水量调节孔隙率,烧结后得到多孔羟基磷灰石陶瓷,进一步进行切割加工后得到椎间融合器模型。结果随着成型时加入双氧水量的增加,5个样品组的孔隙率从(24.6±5.7)%增加到(78.4±2.3)%,其对应的抗压强度从(13.8±3.4)MPa降低到(0.6±0.1)MPa。表明通过控制成型时加入的双氧水量可调节样品的孔隙率,进一步调节其抗压强度。结论通过气体发泡法制备多孔羟基磷灰石陶瓷,成型时加入双氧水量为5 mL,聚乙二醇量为7 mL,甲基纤维素量为10 mL,温度为1 150℃时,烧结打磨后得到的椎间融合器模型孔隙率为57.7%,抗压强度为7.3 MPa,与成人胸腰椎椎体抗压强度相近,有望进一步应用于临床。

牙龈卟啉单胞菌基因疫苗的研究进展

牙周炎是发生在牙周支持组织的细菌感染性疾病,亦是导致成人牙齿脱落的主要原因,菌斑微生物是引发牙周炎的始动因子,因此,研究有效和可靠的疫苗来防治牙周炎逐渐成为各国学者研究的热点。牙龈卟啉单胞菌与牙周炎的发生发展密切相关,本文就近年来牙周炎基因疫苗的研究现状作一综述。

转基因番茄防龋疫苗中外源目的基因拷贝数的检测

目的:采用SYBR Green实时荧光定量PCR方法检测转基因番茄防龋疫苗中外源目的基因的拷贝数。方法:用本课题组前期构建的重组质粒pEAC10、pEPC10作为标准品,SYBR Green实时荧光定量PCR法对含外源目的基因pacA-ctxB、pacP-ctxB的转基因番茄植株总基因组样本重复检测,取平均值作为目的基因拷贝数。结果:含pacA-ctxB转基因番茄植株外源目的基因的拷贝数为1.3,含pacP-ctxB转基因番茄植株外源目的基因的拷贝数为3.2。结论:构建的转基因番茄植株属低拷贝转基因植物,具有较好的稳定性。

布雷菲德菌素A通过线粒体凋亡途径增强顺铂抗肺癌细胞的作用

本研究证明了线粒体凋亡途径在布雷菲德菌素A (brefeldin A,BFA)联合顺铂(cisdichlorodiamine platinum,CDDP)抗非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)中的作用。MTT结果显示,BFA对肺癌GLC-82和NCI-H1299细胞的半数有效抑制浓度(half maximal inhibitory concentration,IC_(50))分别是100 ng/mL和400 ng/mL,CDDP对GLC-82和NCI-H1299细胞的IC_(50)分别是4μg/mL和15μg/mL;而分别采用半量的BFA和CDDP联合处理GLC-82或NCIH1299细胞后,抑制作用均进一步加强。DAPI染色结果进一步证明了二者的协同作用——与单独用药组相比,细胞核染色质固缩加剧,核裂解碎片增多,乃至形成凋亡小体,表明细胞凋亡的发生。与单药组比较,联合用药导致肺癌GLC-82细胞线粒体膜电位显著下降; q-RT-PCR及Western印迹结果显示,在联合用药早期(24 h),GLC-82细胞可能通过提高Bcl2表达以促进存活;而在联合用药晚期(48 h),细胞已发生不可逆转的凋亡,Bcl2表达受抑制,同时二者通过促进Bax表达来诱导细胞色素C释放,使胱天蛋白酶3发生剪切激活,最终诱导细胞凋亡发生。提示线粒体凋亡途径可能是BFA协同CDDP抗非小细胞肺癌的分子机制之一,为肺癌的临床治疗方案提供了更多的理论依据。

Brefeldin A调控ATF6通路增强顺铂抑制肺癌细胞增殖的作用

目的检测肺癌GLC-82细胞内质网应激ATF6通路的激活水平,以探究布雷菲德菌素A(BFA)增强顺铂(CDDP)抑制肺癌细胞增殖的分子机制。方法取对数期细胞,分别设置50 ng/mL BFA组、2μg/mL CDDP组及50 ng/mL BFA+2μg/mL CDDP组作为实验组,同时设置加入等体积二甲基亚砜(DMSO)的对照组。继续培养24 h后,利用CCK8法检测细胞增殖抑制率;培养24 h和48 h后,利用实时荧光定量PCR和免疫印迹检测细胞GRP94、ATF6和ATF6B的mRNA水平和蛋白质水平。结果药物处理24 h后,BFA组、CDDP组和联合用药组细胞增殖抑制率分别为(28.6±6.8)%、(24.0±9.6)%和(57.1±3.1)%,均显著高于对照组(P<0.01),且联合用药组细胞生长抑制率亦显著高于BFA组和CDDP组(P<0.01、P<0.01)。与对照组相比,药物处理24 h后,联合用药组GRP94、ATF6 mRNA水平分别上调(19.9±2.8、22.9±4.7)倍,GRP94、ATF6和ATF6B蛋白质水平分别上调(1.3±0.4、6.1±1.8、5.7±1.8)倍(P<0.01或P<0.05);药物处理48 h后,联合用药组GRP94、ATF6 mRNA水平分别上调(10.5±0.7、12.1±1.8)倍(P<0.01),GRP94蛋白质水平下调(4.5±1.7)倍、ATF6和ATF6B蛋白质水平分别上调(1.4±0.3、2.6±0.9)倍(P<0.01或P<0.05)。结论 BFA协同增强CDDP抑制肺癌GLC-82细胞增殖的作用,与内质网应激ATF6通路和GRP94分子的激活密切相关,为肺癌的临床治疗方案提供更多的理论基础。

不同磷酸钙陶瓷对兔骨髓基质干细胞增殖及成骨分化相关基因表达的影响

目的比较不同成分磷酸钙陶瓷材料对兔骨髓基质干细胞(BMSCs)增殖及成骨分化基因表达的影响。方法将不同相成分的磷酸钙陶瓷材料分为两组,分离并培养兔BMSCs分别与之共培养,于第1、3、7天用MTT法检测细胞增殖情况,并用FDA/PI染色后观察细胞形态。于第3、7、14天采用实时荧光定量PCR检测BMSCs的碱性磷酸酶(ALP)、骨形态发生蛋白(BMP-2)、骨唾液酸蛋白(BSP)和转录因子Osterix的mRNA表达变化。结果共培养7d后,两种材料上BMSCs均快速增殖;共培养14d时,双相磷酸钙陶瓷(BCP)组BMSCs的ALP、BMP-2、BSP和Osterix mRNA表达均明显高于羟基磷灰石(HA)组(P<0.05)。结论两种磷酸钙材料均能促进BMSCs增殖及向成骨方向分化,双相磷酸钙陶瓷这一能力强于羟基磷灰石陶瓷,预示出其更加优异的体外成骨诱导潜力。

外泌体及其在肿瘤微环境中的作用与肿瘤诊疗应用

外泌体(exosomes)是一种微小的囊泡样小体,起源于细胞内吞产生的胞内体,正常细胞和肿瘤细胞均可分泌。外泌体中含有蛋白质、脂类、mRNAs和miRNAs等多种成分,能够靶向运输到其他组织或细胞,通过细胞间的物质交换或信息交流,参与肿瘤细胞的生长、转移、免疫应答等过程,可作为多种肿瘤诊断的潜在生物标志物,在肿瘤发生发展和防治研究中意义深远。本文就外泌体的生物学特性、在肿瘤微环境中的作用和肿瘤诊疗中的应用现状进行综述。

不同时程吗啡依赖对雄性大鼠睾丸GRP94和XBP-1表达的影响

目的观察内质网应激标志性分子GRP94和XBP-1在不同时程吗啡依赖大鼠睾丸组织中的动态表达,以探究吗啡依赖对生殖系统的影响。方法建立吗啡戒断、消退及点燃大鼠模型后,利用定量PCR(RTPCR)技术和蛋白免疫印迹(Western blot)技术分别检测睾丸组织中GRP94和XBP-1 mRNA或蛋白的表达水平。结果 RT-PCR和Western blot结果显示,与NS对照组比较,吗啡依赖大鼠戒断48 h后,其睾丸组织GRP94和XBP-1表达水平均显著升高(P<0.01);经17 d的戒断,大鼠对吗啡依赖消退后,GRP94和XBP-1表达水平均有所升高(P>0.05);大鼠对吗啡依赖消退后,于31 d给予吗啡进行复燃,GRP94和XBP-1表达水平均显著升高(P<0.01或P<0.05)。吗啡依赖大鼠睾丸组织GRP94和XBP-1表达水平在戒断48 h后最高,消退时有所降低(P<0.01),而点燃后水平又有所上调(P<0.05)。结论吗啡依赖与睾丸内质网应激标志性分子GRP94及其XBP-1通路的激活密切相关,为吗啡依赖患者生殖系统损伤的修复提供更多的理论依据。