肩胛盂骨折后方手术入路的解剖及临床应用

目的 :为肩胛盂骨折切开复位内固定提供一种较好的手术入路 ,并为临床应用提供解剖学基础。方法 :利用 2 0具经动脉灌注红色乳胶的成人上肢标本 ,对肩关节后方的有关解剖结构 ,即三角肌后部、冈下肌、小圆肌、大圆肌的形态、比邻及其间的神经界面等进行了观测 ,临床应用 4例。结果 :三角肌和冈下肌与小圆肌之间存在神经界面。沿小圆肌上缘与冈下肌之间进入 ,可避免损伤腋神经和旋肱后、旋肩胛血管。结论 :后方入路对肩胛盂横行、纵行和粉碎骨折都适合 ,是肩胛盂骨折的最好手术途径。

经喙突和肩峰行肩关节外固定术的应用解剖

目的 :通过对喙突和肩峰的解剖学观测探讨经喙突和肩峰行肩关节外固定术的可行性和可靠性 ,为临床治疗肩关节疾病提供一种新的手术方法。方法 :利用 18具经动脉灌注红色乳胶的成人上肢标本 ,对喙突和肩峰的宽度、厚度、长度、轴线的倾斜角度及进钉深度等做了解剖学观测。结果 :喙突宽 ( 17.65± 1.82 )mm ,厚 ( 13 .11± 2 .11)mm ,长 ( 4 5 .43± 4.5 2 )mm ,外倾角 ( 3 0 .2± 8.5 45 )° ,下倾角 ( 2 2 .9± 4.2 2 9)°。肩峰宽 ( 2 4.71± 3 .75 )mm ,厚 :外侧 ( 8.67± 1.3 4)mm ,内侧 ( 11.81± 1.3 3 )mm ,长 ( 4 8.2 1± 4.68)mm ,外倾角 ( 10 .81± 4.3 3 6)° ,上倾角 ( 16.3 16± 6.3 95 )°。结论 :肩关节外固定术效果可靠 ,喙突和肩峰可以接受直径 5mm的螺钉 ,其形态学资料有助于合理选择外固定器、准确确定进钉点的位置和方向、保证肩关节外固定术的成功。

猪带绦虫TSOL18基因的表达、纯化和兔抗血清的制备

目的构建猪带绦虫重组质粒pGEX-TSOL18,表达纯化TSOL18重组蛋白,制备兔抗重组蛋白血清。方法全基因合成猪带绦虫TSOL18抗原编码基因,定向克隆到pGEX-1λT表达载体,构建重组质粒pGEX-TSOL18;转化大肠埃希菌ArcticExpress(DE3),IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表达情况;亲和层析纯化获得重组蛋白,免疫兔制备抗血清;ELISA测定抗血清的效价,Western blot鉴定抗血清的特异性。结果全基因扩增出393bp的TSOL18抗原编码基因,酶切和测序鉴定证实TSOL18基因成功插入pGEX-1λT中;SDS-PAGE分析显示表达重组蛋白相对分子质量(Mr)约为41kDa,经亲和层析后可获得纯度为75%的重组蛋白;ELISA测定抗血清的效价为1∶256 000,Western blot证实该抗血清能与重组蛋白发生特异性反应。结论猪带绦虫TSOL18基因能在大肠埃希菌中高效表达,成功制备了高纯度的TSOL18重组蛋白和高滴度的兔抗重组蛋白血清,为猪带绦虫的疫苗研制奠定了基础。

猪带绦虫TSO45W-4B基因的克隆、表达和抗体制备

目的克隆、表达猪带绦虫TSO45W-4B基因,以重组蛋白TSO45W-4B免疫兔制备抗体。方法全基因合成猪带绦虫TSO45W-4B抗原编码基因,定向克隆至pGEX-1λT表达载体,构建重组质粒pGEX-TSO45W-4B。转化至大肠埃希菌ArcticExpress(DE3)后,异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析表达情况。表达产物经谷胱甘肽-S-转移酶(GST)亲和层析柱纯化后,免疫新西兰大白兔,制备抗血清。GST亲和层析柱纯化获得血清中抗体后,ELISA测定抗体效价,蛋白质印迹法(Western blotting)鉴定抗体特异性。结果酶切和测序结果表明,重组质粒pGEX-TSO45W-4B构建成功。SDS-PAGE结果显示,重组蛋白相对分子质量(M r)约为40 000,经GST亲和层析后可获得纯度为90%以上的重组蛋白。ELISA结果显示,抗体的效价为1∶512 000。Western blotting分析结果显示,该抗体能与纯化的重组蛋白发生特异性反应,在约M r40 000处出现一条带,与预期大小一致。结论猪带绦虫TSO45W-4B基因能在大肠埃希菌中表达,制备了TSO45W-4B重组蛋白和兔抗血清。

人羊膜上皮细胞有向心肌样细胞分化的特性

目的:通过体外诱导分化实验,评价人羊膜上皮细胞向心肌样细胞分化的能力。方法:实验于2005-09/2006-12在贵州省细胞工程重点实验室完成。①对象:经产妇知情同意,无菌采集健康足月剖宫产胎盘6份,实验经医院医学伦理委员会批准。②实验方法:采用机械法将羊膜从胎盘组织上剥离,D-Hank’s液冲洗后剪成碎片,加入含有0.2g/L乙二胺四乙酸的0.5g/L胰蛋白酶溶液,离心、消化、过滤,收集滤液,加入胎牛血清终止消化,重复消化2次。合并3次消化所得的细胞悬液,离心后将细胞沉淀悬浮于L-DMEM培养基中,按1.25×108L-1密度接种,常规培养3d后更换培养基,待细胞达80%～90%融合后用胰蛋白酶+乙二胺四乙酸联合消化,终止后离心弃上清,细胞沉淀用培养基重新悬浮,按1×107L-1密度传代。③实验评估:用流式细胞仪鉴定人羊膜上皮细胞表型;使用10μmol/L5-氮杂胞苷和1mmol/L抗坏血酸磷酸盐诱导第2代人羊膜上皮细胞,免疫荧光染色法检测诱导后细胞中特异蛋白结蛋白和α-辅肌动蛋白的表达,RT-PCR检测心肌特异性转录因子Nkx2.5、GATA-4和心肌特异性收缩蛋白α-肌球蛋白重链mRNA的表达。结果:①人羊膜上皮细胞的免疫组化特征:人羊膜上皮细胞几乎不表达CD44,不表达波形蛋白,表达角蛋白19。②人羊膜上皮细胞α-辅肌动蛋白和结蛋白的表达:人羊膜上皮细胞经诱导分化后,表达肌系细胞标志α-辅肌动蛋白和结蛋白。③人羊膜上皮细胞Nkx2.5、GATA-4和α-肌球蛋白重链mRNA的表达:人羊膜上皮细胞经诱导分化后,表达心肌特异性转录因子Nkx2.5 mRNA和GATA-4 mRNA,心肌特异的可收缩蛋白α-肌球蛋白重链mRNA未见表达。结论:通过胰蛋白酶消化法分离获得的人羊膜上皮细胞具有向心肌样细胞分化的特性,可能成为细胞心肌成形术的候选供体细胞。

人羊膜间充质细胞具有分化成软骨及成骨细胞的潜能

目的:人羊膜间充质细胞具有比骨髓间充质干细胞更强的扩增能力和免疫原性低等优势。建立体外适宜的诱导培养条件,观察人羊膜间充质细胞定向分化为软骨细胞和成骨细胞的能力。方法:实验于2005-09/2006-12在贵州省细胞工程重点实验室完成。①材料来源:经产妇知情同意,无菌采集健康足月分娩新生儿胎盘6份,实验经医院医学伦理委员会批准。②实验方法:采用机械法剥离羊膜组织,二步酶消化法分离收获人羊膜间充质细胞,按2.2×10~8L^(-1)密度接种,传至第1～2代用于诱导分化实验。向软骨细胞诱导分化时,人羊膜间充质细胞按3×10~8L^(-1)密度接种,诱导培养液为含体积分数0.01的胎牛血清、10 mg/L转化生长因β1、100 nmol/L地塞米松、50 mg/L抗坏血酸、1%培养基添加物。向成骨细胞诱导分化时,人羊膜间充质细胞按6×10~7L^(-1)密度接种,诱导培养液为含体积分数0.1的胎牛血清、100 nmol/L地塞米松、50 mg/L抗坏血酸、5 mmol/Lβ-甘油磷酸。③实验评估:原代细胞用流式细胞仪分析表型,免疫细胞化学染色进行波形蛋白表达鉴定。分别于体外诱导第7,14,21,28天采用免疫细胞化学法检测软骨特异性Ⅱ型胶原的表达,细胞化学法检测蛋白聚糖的表达,钙-钴法检测成骨细胞特异性碱性磷酸酶的表达,茜素红S检测钙盐沉积情况。结果:①免疫组化与表型特征:人羊膜间充质细胞高表达间充质干细胞表面标志CD29、CD44和间充质细胞标志波形蛋白。②向软骨细胞诱导分化:诱导14 d后,人羊膜间充质细胞由长梭型逐渐变为多角形,可检测到Ⅱ型胶原蛋白表达及软骨细胞特异性细胞外基质蛋白聚糖。③向成骨细胞诱导分化:诱导21 d后,可观察到人羊膜间充质细胞的胞浆内有碱性磷酸酶表达,且可见钙盐沉积。结论:人羊膜间充质细胞具有分化成软骨细胞和成骨细胞的特性,可作为骨及软骨组织工程种子细胞的新来源。

人羊膜间充质细胞具有向心肌样细胞分化的特性

探讨人羊膜间充质细胞(human amniotic mesenchymal cells,hAMCs)向心肌细胞分化的能力。采用胶原酶消化法分离hAMCs,用流式细胞仪进行表型鉴定;用5-氮杂胞苷和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)诱导hAMCs向心肌细胞分化,免疫荧光染色法检测诱导后细胞中特异蛋白结蛋白和α-辅肌动蛋白的表达,RT-PCR检测心肌特异性转录因子Nkx2.5、GATA-4和心肌特异性收缩蛋白α-肌球蛋白重链(α-myosin heavy chain,α-MHC)mRNA的表达。结果显示:(1)hAMCs原代培养至第6d,贴壁细胞汇合度可达80%,呈漩涡状生长。传代后hAMCs增殖迅速,3～4d细胞汇合度可达100%,细胞呈梭形或多角形。(2)hAMCs表达CD44和波形蛋白,不表达CK19。(3)hAMCs经诱导分化8～10d后细胞排列紧密,多为长梭形。hAMCs诱导2w和4w表达α-辅肌动蛋白和心肌特异性转录因子Nkx2.5。(4)诱导前后的hAMCs均表达结蛋白和GATA-4,但均未见α-MHC表达。说明hAMCs具有向心肌样细胞分化的能力,可望成为细胞心肌成形术(cellular cardiomyoplasty,CCM)的候选细胞。

胸脐岛状皮瓣修复会阴及周围组织缺损

目的 报道胸脐岛状皮瓣在会阴部及周围组织缺损修复的效果。 方法 1988年 1月～ 2 0 0 3年10月 ,采用胸脐岛状皮瓣修复会阴部及周围组织缺损 7例 ,年龄 17～ 5 2岁。烧伤后会阴部严重瘢痕挛缩 2例 ,会阴部恶性肿瘤 1例 ,腹股沟区及大腿中上段大面积创伤性皮肤缺损 4例。皮瓣范围 9cm× 2 7cm～ 12 cm× 30 cm,血管蒂长 12～16 cm。皮瓣供区宽在 10 cm以下者均直接缝合 ,超过 10 cm者行游离植皮覆盖。 结果 术后 7例皮瓣全部成活 ,皮瓣远端无缺血、坏死。 4例获随访 6个月～ 6年 ,皮瓣色泽、质地与外形良好 ,患者行走及下蹲功能满意。 结论 胸脐岛状皮瓣能修复会阴部及周围组织缺损 ,且供区隐蔽效果理想。

高血压病左心室肥厚与血管活性物质的关系及依那普利干预

目的：探讨体循环血液中多种血管活性物质在高血压病左心室肥厚（ＬＶＨ）发生和依那普利（ｅｎａｌａｐｒｉｌ）逆转治疗中的作用。方法：测定高血压病患者４５例合并ＬＶＨ、４５例不合并ＬＶＨ及３０例正常人血流动力学和血浆５种血管活性物质，观察２７例高血压病患者合并ＬＶＨ依那普利治疗２４周后各项参数变化。结果：合并ＬＶＨ组收缩压、血浆内皮素、去甲肾上腺素、内源性洋地黄物质（ＥＤＬＳ）和心钠素高于不合并ＬＶＨ组（Ｐ＜０．０５～０．０１），血管紧张素Ⅱ高于正常人（Ｐ＜０．０１）；对１３个相关因素进行逐步回归分析表明，内皮素、血管紧张素Ⅱ和去甲肾上腺素对ＬＶＨ作用显著（复相关系数０．７６９，Ｐ＜０．００１）；内皮素、血管紧张素Ⅱ、去甲肾上腺素、ＥＤＬＳ之间呈正相关（Ｐ＜０．０５～０．０１）；依那普利干预后，ＬＶＨ消退，血压和血管活性物质同步下降（Ｐ＜０．０５～０．０１）。结论：体循环血液中多种血管活性物质含量改变及其相互作用可能共同参与高血压病ＬＶＨ的形成，依那普利消退ＬＶＨ的机制可能与降低这些物质有关。

拇趾腓侧皮瓣塑形第二足趾中段再造手指

目的介绍将拇趾腓侧皮瓣塑形第二足趾中段后用于手指再造的手术方法。方法切取第二足趾的同时游离并切取带翼状组织瓣的拇趾腓侧皮瓣,将拇趾腓侧皮瓣嵌入第二足趾跖侧,拇趾腓侧皮瓣上的翼状组织瓣嵌入第二足趾中段两侧皮下。将塑形后的第二足趾中段移植于缺损的手指。自2005年1月至2007年4月,采用该方法为15例手指缺损患者行再造术。结果术后15例患者的所有皮瓣全部成活,并经1个月至2年的随访,再造手指的外形及痛温觉恢复较好,对掌对指功能基本恢复。结论拇趾腓侧皮瓣嵌入第二足趾,能较好地重塑第二足趾外形,再造的手指较传统的第二足趾移植手指再造术更接近于正常。

mdm2蛋白在子宫颈上皮内瘤样病变和子宫颈癌中的表达

目的探讨MDM2基因在子宫颈上皮内瘤变(cervicalintraepithelialneoplasia,CIN)和子宫颈鳞癌、腺癌的表达情况。方法采用链霉素生物素蛋白过氧化酶法,对40例子宫CIN、21例子宫颈腺癌、62例子宫颈鳞癌和20例慢性子宫颈炎的石蜡标本中mdm2蛋白的表达进行检测。结果①mdm2蛋白在子宫颈癌组中的表达高于CIN组和慢性子宫颈炎组,差异有统计学意义(均为P<005);②mdm2蛋白在各级CIN中的表达差异均无统计学意义(均为P>005);③在子宫颈腺癌及鳞癌中,mdm2蛋白的表达随分级的增加而增高,差异有统计学意义(P<005)。结论mdm2蛋白的表达在子宫颈癌与子宫颈良性病变间有所不同,且随子宫颈癌变程度的加重而mdm2蛋白的表达增加,故检测mdm2蛋白可能对子宫颈癌的诊断和预后评估有价值。

高血压左室肥厚与细胞离子转运和环核苷酸的关系

目的 探讨血流动力学、细胞阳离子转运和环核苷酸在高血压左心室肥厚 (LVH)发生中的作用。方法 采用 30例正常人和 45例高血压非LVH病人双重同期对照 ,观察 45例高血压LVH病人的血压、外周阻力 ,淋巴细胞ATP酶活性、阳离子和环核苷酸变化。结果 高血压LVH和非LVH病人血压、外周阻力、细胞离子转运和环核苷酸均有异常 ;高血压LVH组收缩压、细胞Na+、Ca2 +、cAMP和cAMP/cGMP比值高于非LVH组 ,细胞Na+ K+ 三磷酸腺苷酶 (Na+ K+ ATPase)、Ca2 + ATPase活性和K+低于非LVH组。左室重量指数 (LVMI)与Ca2 + ATPase、Na+、cAMP和cAMP/cGMP比值相关。逐步回归分析显示 ,在 16个相关预选因子中 ,Na+、Ca2 + ATPase、Mg2 +、cAMP与LVMI之间有独立的相关关系。结论 血流动力学、细胞阳离子转运和环核苷酸变化参与高血压LVH的发病过程 ,其中Na+、Ca2 + ATPase、Mg2

2型糖尿病微血管病变患者血尿酸与胰岛素抵抗的关系

目的 :探讨 2型糖尿病血尿酸与胰岛素抵抗及微血管病变的关系。方法 :观测2型糖尿病微血管病变组及无微血管病变组血糖、餐后 2 h血糖、甘油三脂、胆固醇、血尿酸、空腹胰岛素 ,计算其胰岛素敏感指数。结果 :糖尿病并发微血管病变组 2 h PBG、Trig、UA、FINS较无微血管病变组明显增高 ,ISI明显降低。 UA与 Trig、FINS、2 4 h尿白蛋白定量呈正相关 ,与 ISI呈负相关。结论 :高尿酸血症作为胰岛素抵抗综合征的特点之一 ,参与了糖尿病微血管病变的发生。

血清SCCAg及CA125在诊断宫颈鳞癌及评价预后中作用的研究

目的:探讨血清SCCAg及CA125用于宫颈鳞癌诊断、手术治疗及预后的价值。方法:选取ⅠA2～ⅡA期宫颈鳞状细胞癌为研究组,20例CIN及20例慢性宫颈炎分别为对照组1和对照组2。采用固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清SCCAg的数值,采用化学发光免疫分析法(CLIA)检测血清CA125数值。比较分析血清SCCAg及CA125与宫颈鳞癌临床病理特征、手术疗效及预后的关系。结果:宫颈鳞癌组术前血清SCCAg及CA125水平均高于慢性宫颈炎组,差异均具有统计学意义(P<0.01)。宫颈鳞癌组术前SCCAg水平高于CIN组,差异有统计学意义(P<0.001);宫颈鳞癌组术前CA125水平与CIN组的差异无统计学意义(P=0.049,P>0.0167)。血清SCCAg、CA125诊断宫颈鳞癌的临界值分别为1.03ng/ml、8.16U/ml。血清SCCAg、CA125及两项联合诊断宫颈癌的ROC曲线下面积分别为0.954、0.718、0.960,两项联合后诊断性能无明显增加。宫颈鳞癌术前血清SCCAg随临床分期增加具有线性增加的趋势。脉管有否癌栓、盆腔淋巴结有否转移也与术前血清SCCA水平有关,差异有统计学意义(P=0.011,P=0.043)。宫颈鳞癌组手术治疗后的血清SCCAg及CA125水平均有逐渐降低趋势,差异有统计学意义(P均<0.001)。结论:血清SCCAg对宫颈鳞癌有较高的诊断价值,可考虑作为诊断及手术疗效评估指标之一,有助于初步判断脉管及盆腔淋巴结转移。血清CA125对于宫颈鳞癌诊断、手术评估及随访的价值均低于SCCAg,与SCCAg联合不能增加诊断的敏感度和特异度。

甲状腺功能亢进并周期性麻痹临床特点分析

目的 探讨甲状腺功能亢进 (甲亢 )并周期性麻痹 (周麻 )临床特点。方法 31例甲亢并周麻与 31例初诊的非周麻性Graves病行临床对比分析 ,比较其临床表现 ,测定其TT3、TT4 、TSH、空腹血糖 (FBG)、餐后 2h血糖(2hPBG)、空腹胰岛素 (FINS)、计算胰岛素敏感指数 (ISI)。结果 甲亢并周麻组其高代谢症状群发生率、突眼发生率、甲状腺肿大发生率、ISI及血TT3、TT4 、K+ 明显低于对照组 ,而FBG、2hPBG、FINS及BMI明显高于对照组。结论 甲亢并周麻时往往甲亢症状较轻而不典型 。

高血压病患者细胞钙、镁和环核苷酸含量变化

目的：探讨细胞Ca2+、Mg2+和环磷酸腺苷（cAMP）、环磷酸鸟苷（cGMP）含量及相互关系变化与高血压病的关系。方法：观察107例高血压病患者和30例正常人外周血淋巴细胞Ca2+-三磷酸腺苷酶（Ca2+-ATPase）活性、Ca2+、Mg2+、cAMP和cGMP含量变化。结果：临界高血压和高血压病各期细胞内Ca2+浓度升高、Mg2+浓度降低（P＜0．01）；高血压病各期细胞Ca2+-ATPase活性下降、cAMP和cGMP含量增高（P＜0．05～P＜0．01）。高血压病组平均动脉压与Ca2+-ATPase呈负相关、与Ca2+、cAMP和cGMP呈正相关（P＜0．05～P＜0．01）；Ca2+与Ca2+-ATPase呈负相关，与cAMP和cGMP呈正相关（P＜0．05～P＜0.01）。结论：细胞Ca2+、Mg2+转运障碍和cAMP、cGMP代谢异常可能涉及高血压病的发病机制，细胞Ca2+-ATPase活性下降、cAMP和cGMP含量升高可能部分与细胞Ca2+浓度增高、Mg2+浓度降低有关。

慢性酒精中毒患者血清IL-6水平与脑萎缩

目的 探讨慢性酒精中毒患者白细胞介素 - 6 (IL - 6 )水平的变化及其与酒精中毒性脑萎缩的关系。方法 用双抗体夹心ELISA法对 32例慢性酒精中毒患者和 30例健康对照血清中IL - 6水平进行测定 ,并结合头颅CT扫描进行分析。结果 (1)慢性酒精中毒组脑萎缩出现率为 5 0 % ;(2 )慢性酒精中毒组血清IL - 6水平〔(2 86 31±10 4 79)ng/L〕显著高于健康对照组〔(2 0 5 4 3± 4 8 6 7)ng/L〕(P <0 0 0 1) ;慢性酒精中毒伴有脑萎缩者血清IL - 6水平〔(343 75± 99 5 9)ng/L〕高于无脑萎缩者〔(2 2 8 88± 75 74 )ng/L〕(P <0 0 0 1) ;无脑萎缩者虽然较健康对照组增高 ,但无显著性差异 (P >0 0 5 ) ;(3)慢性酒精中毒患者血清IL - 6水平与脑萎缩程度相关 :与三脑室宽度 (r =0 4 95 ,P <0 0 1)及Huckman值 (r=0 5 5 7,P <0 0 1)呈正相关 ;与脑室指数 (r=- 0 6 6 5 ,P <0 0 1)及侧脑室体部指数 (r =- 0 6 39,P <0 0 1)呈负相关。结论 慢性酒精中毒患者存在免疫功能异常 ,血清IL - 6水平增高与酒精的萎缩性脑损害有相关性。